有氧運(yùn)動對高脂飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗大鼠心肌C-EBPβ表達(dá)的影響.pdf

1、研究目的:胰島素抵抗(IR)是高血壓病、冠心病、動脈粥樣硬化、2型糖尿病等疾病的共同發(fā)病基礎(chǔ)。探討改善胰島素抵抗的機(jī)制及方法具有重要的臨床意義。本研究建立高脂飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗模型,觀察大鼠心肌形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,心肌C/EBPβmRNA及蛋白表達(dá)。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步觀察有氧運(yùn)動訓(xùn)練對胰島素抵抗大鼠空腹血清葡萄糖(FBG)、空腹甘油三酯(FBTG)及血清游離脂肪酸(FFA)濃度影響及心肌形態(tài)結(jié)構(gòu)改變和心肌C/EBPβmRNA及蛋白表達(dá)水平,以及

2、兩者之間的關(guān)系探索其可能機(jī)制,研究結(jié)果可為進(jìn)一步揭示運(yùn)動對胰島素抵抗的防治作用機(jī)制,以及為胰島素抵抗的防治靶點(diǎn)提供新思路。
　　研究對象與方法:SPF級健康雄性SD大鼠85只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后淘汰體重增長緩慢10只,剩余75只隨機(jī)分為正常飲食(A組);高脂飲食組(B組);高脂飲食喂養(yǎng)6周后,B組大鼠隨機(jī)成4組:高脂飼料+安靜對照組(H組)、高脂飼料+運(yùn)動組(HE組)、高脂飼料+repamycin(HR)、高脂飼料+運(yùn)動+repam

3、ycin(HER組)。運(yùn)動干預(yù)方案如下:HE組進(jìn)行4周有氧跑臺運(yùn)動干預(yù),運(yùn)動強(qiáng)度為28m/min,40min(前3天進(jìn)行適應(yīng)性運(yùn)動),6次/周。HR組大鼠腹腔注射repamycin,1mg/kg,每日一次。HER組大鼠干預(yù)模式注射定量mTOR抑制劑1h后運(yùn)動(運(yùn)動干預(yù)和藥物注射同HE組、HR組)。干預(yù)4周后,腹腔麻醉大鼠,取腹主動脈血4ml,測定FBG、FBTG、FFA濃度,另取大鼠左心室心肌分別用于HE染色及Western blot實

4、驗檢測C/EBPβ蛋白表達(dá)和PCR技術(shù)測C/EBPβmRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)體重:H組大鼠體重大于A組,在第7-9周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05),第10周兩者之間有非常顯著性差異(P﹤0.01)。H組大鼠體重大于HE組大鼠,第9、10周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05)。HR組大鼠體重大于HER組大鼠體重,第10周兩者之間有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(2)葡萄糖耐量實驗:第3周,B組大鼠注射定量葡萄

5、糖后血糖急劇上升,且在120min后沒恢復(fù)到正常空腹血糖水平,表現(xiàn)出糖耐量下降現(xiàn)象;第6周,B組各個時間點(diǎn)血糖濃度大于A組;第10周,H組各時間點(diǎn)血糖濃度大于A組,差異具顯著性(P﹤0.05), HE組0min血糖濃度低于H組,差異非常顯著(P﹤0.01);HR組各時間點(diǎn)血糖濃度與 H組都有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組60min血糖濃度高于HE組,差異顯著(P﹤0.05),120min血糖濃度高于HE組,差異非常顯著(P﹤0

6、.01)。
　　(3)胰島素耐量實驗:第3、6周B組大鼠注射定量胰島素后血糖值下降遲緩,各個時間點(diǎn)血糖濃度高于A組,第6周第30min血糖濃度與A組有顯著性差異(P﹤0.05),第60min血糖濃度與A組有非常顯著性差異(P﹤0.01)。H組各個時間點(diǎn)血糖濃度大于A組,第30minH組與A組有顯著性差異(P﹤0.05);HE組各個時間血糖濃度低于H組,在第30min、60min有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組各個時間點(diǎn)血

7、糖濃度低于HR組,第30min、60min有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(4)FBG:H組FBG濃度大于A組、HE組,差異不顯著;HR組濃度大于HER組,差異不顯著。
　　(5)FBTG:A組大鼠FBTG含量較低,與高脂飲食大鼠各組之間都存在顯著性差異(P﹤0.05);H組濃度比HE組高,但無顯著性差異;HR組濃度大于HER組,無顯著性差異。
　　(6)FFA:H組大鼠血清FFA濃度大于A組,差異顯著(P﹤0.0

8、5);H組大于HE組,但無顯著性差異;HR組大于H組,差異顯著(P﹤0.05);HR大于HER組,但無顯著性差異。
　　(7)心重計數(shù):A組大鼠心重計數(shù)小于H組大鼠心重計數(shù),差異顯著(P﹤0.05);HE組大鼠心重計數(shù)小于H組大鼠心重計數(shù),具顯著性差異(P﹤0.05);HER組大鼠心重計數(shù)小于HR組大鼠心重計數(shù),但無顯著性差異。HE染色切片觀察:A組心肌細(xì)胞形態(tài)完整,結(jié)構(gòu)正常,排列規(guī)則,輪廓清晰,呈細(xì)長圓柱狀,核呈橢圓形,位于細(xì)胞

9、中央;H組、HR組、HER大鼠心肌細(xì)胞排列不太規(guī)則,比較肥大,部分呈波浪狀,橫紋排列不規(guī)則,變性明顯,細(xì)胞核完整性破壞;HE組大鼠心肌細(xì)胞大致排列規(guī)則,形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,染色均勻。
　　(8)C/EBPβ蛋白表達(dá):A組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達(dá)量最少,與H組、HER組具顯著性差異(P﹤0.05),與HR組有非常顯著性差異(P﹤0.01)。高脂飲食大鼠心肌C/EBPβ蛋白含量排列順序為:HR組﹥HER組﹥H組﹥HE組;H組大鼠心肌C/

10、EBPβ蛋白表達(dá)量與HE組、HR組具有差異顯著(P﹤0.05);HR組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達(dá)量與HE組有非常顯著性差異(P﹤0.01);HER組大鼠心肌C/EBPβ蛋白表達(dá)與HE組有顯著性差異(P﹤0.05)。
　　(9)C/EBPβmRNA表達(dá):C/EBPβmRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)大體上相一致,A組大鼠心肌C/EBPβmRNA表達(dá)最少,與H組、HE組、HER組具有顯著性差異(P﹤0.05),與HR組有非常顯著性差異(P﹤0.