MGO-NF-kB-炎癥信號通路在糖尿病痛性神經(jīng)病變中的作用.pdf

1、目的：
　　高血糖通過非酶糖基化途徑生成的晚期糖基化終末產(chǎn)物（advanced glycation products,AGEs）可以直接導致糖尿病周圍神經(jīng)病變，但是AGEs一旦與組織結(jié)合，則可造成神經(jīng)組織的不可逆損傷，且目前抑制AGEs生成的藥物取得的效果不佳，因此對AGEs的前體-甲基乙二醛（methylglyoxal,MGO）進行干預，可能是阻止糖尿病周圍神經(jīng)病變發(fā)生和發(fā)展的一個新靶點。MGO水平的升高可以加速AGEs的合成并

2、產(chǎn)生細胞毒作用，如：對蛋白質(zhì)的不可逆修飾、介導核轉(zhuǎn)錄因子-kB（Nuclear transcription factor-kappaB，NF-kB）信號通路的激活誘發(fā)炎癥反應釋放炎癥細胞因子腫瘤壞死因子-α（tumor nucrosis factor-alpha，TNF-α）等。近年來大量的研究表明，NF-kB及炎性細胞因子TNF-α可以誘導神經(jīng)病理性疼痛，提示MGO-NF-kB-炎癥信號通路可能在糖尿病神經(jīng)痛的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用。

3、但是，此信號通路對糖尿病痛性神經(jīng)病變的影響，目前相關研究仍缺乏。因此，本研究通過觀察2型糖尿病痛性神經(jīng)病變患者血清中MGO和NF-kB水平，并對主要以單核細胞為表達靶細胞的促炎性細胞因子TNF-α的活性變化進行檢測，探討MGO-NF-kB-炎癥信號通路在糖尿病合并神經(jīng)病變，尤其是痛性神經(jīng)病變中的作用機制。
　　方法：
　　本研究中收集2014年2月至2014年12月在第二炮兵總醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的2型糖尿病患者，共篩選出114

4、例，將所有受試者基于不同的診斷標準分成3組：
　　(1)2型糖尿病組（T2DM）：33例，其中男21例，女12例；
　　(2)糖尿病合并周圍神經(jīng)病變組（DPN）：共51例，其中男24例，女27例；
　　(3)糖尿病痛性神經(jīng)病變組（PDN）：共30例，其中男20例，女10例；
　?。?）正常對照組（NC）：來自于第二炮兵總醫(yī)院同一階段體檢健康的人群，既往無何基礎疾病，30例，男12例，女18例。在篩選過程中，各組間

5、無論是性別還是年齡選取上基本均衡，即符合統(tǒng)計學意義的匹配原則。
　　研究指標：
　?。?）身高、體重、血壓值由同一醫(yī)師專門測量，收集數(shù)據(jù)并計算BMI；
　?。?）生化指標：在空腹狀態(tài)下采集靜脈血送檢驗科應用相應儀器檢測肝功、腎功、血脂、血糖等相關數(shù)據(jù)，
　?。?）糖化血紅蛋白（HbA1c）：采用高壓液相法測定；
　?。?）主要觀測指標：空腹采集5ml靜脈血，離心后，分別應用ELISA法及RT-PCR法檢測M

6、GO、NF-kB、TNF-α的水平，利用Pearson分析相關性。應用SPSS軟件建立數(shù)據(jù)庫處理各變量，以P小于0.05具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　一、一般臨床資料比較
　　1．T2DM組、DPN組、PDN組和NC組比較，體重指數(shù)（BMI）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、甘油三酯（TG）、空腹血糖（FPG）以及HbA1c水平明顯增高，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，提示代謝紊亂與 T2DM的

7、發(fā)病相關。而總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、年齡（Age），經(jīng)統(tǒng)計學處理，P>0.05，各組間無明顯差異。
　　2.DPN組、PDN組較T2DM組病程明顯延長，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.05，差異具有統(tǒng)計學意義，提示病程是糖尿病神經(jīng)病變發(fā)生發(fā)展的重要危險因素。T2DM組、DPN組和PDN組三組間，年齡、性別、血脂、血壓、血糖、體重指數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P>0.05，無明顯統(tǒng)計學差異，從而保證了各組間具有可比性。
　　二、

8、血清MGO的變化
　　1．NC組、T2DM組、DPN組、PDN組各組間兩兩進行MGO水平的比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，均存在統(tǒng)計學意義且差異性顯著（P<0.01）。
　　2.DPN組（62.7±9.7pg/ml）與T2DM（44.0±4.6pg/ml）組比較：MGO顯著升高，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.01，具有顯著的統(tǒng)計學意義，提示在DPN的發(fā)病機制中MGO可能發(fā)揮一定作用。
　　3.PDN組（102.4±7.7pg/ml）血清M

9、GO水平較DPN組（62.7±9.7pg/ml）明顯升高，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.01，具有顯著的統(tǒng)計學差異，提示MGO也可能參與了糖尿病痛性神經(jīng)病變的發(fā)生。
　　三、TNF-α的基因表達與血清NF-kB的變化
　　1.NC組、T2DM組、DPN組、PDN組四組間兩兩比較，TNF-α活性和血清NF-kB水平，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.01，具有顯著的統(tǒng)計學差異。
　　2.DPN組（5.9±0.7倍）（487.2±146.0p

10、g/ml）與T2DM組（388.7±133.8倍）（26.2±3.3pg/ml）比較：TNF-α活性和血清NF-kB水平顯著升高，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.01，差異具有統(tǒng)計學意義，提示在DPN的發(fā)病機制中炎癥反應可能有一定作用。
　　3.PDN組（7.9±0.8倍）（64.2±9.3pg/ml）TNF-α活性和血清NF-kB水平明顯高于DPN組（807.3±163.3倍）（487.2±146.0pg/ml），經(jīng)統(tǒng)計學處理，P<0.0

11、1，具有顯著的統(tǒng)計學差異，提示炎癥反應也可能參與了糖尿病痛性神經(jīng)病變的發(fā)生。
　　四、相關性分析
　　1．MGO相關性分析：MGO與BMI、SBP、病程、TG、FPG、HbA1c、存在正相關性，r值分別為0.155、0.248、0.437、0.544、0.264、0.481，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均<0.05；與高密度脂蛋白（HDL）呈負相關，經(jīng)統(tǒng)計學處理，r=-0.329，P<0.01；與年齡、DBP、TC等不相關，經(jīng)統(tǒng)計學處

12、理，P值均>0.05。
　　2.TNF-α相關性分析：TNF-α與BMI、SBP、病程、TG、FPG、HbA1c存在正相關性，r值分別為0.141、0.216、0.488、0.553、0.289、0.518，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均<0.05；與高密度脂蛋白（HDL）存在負相關性，經(jīng)統(tǒng)計學處理，r=-0.344，P<0.01；與年齡、LDL、DBP、TC等不相關，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均>0.05。
　　3.NF-kB相關性分析：N

13、F-kB與TG、空腹血糖、HbA1c、SBP、病程存在正相關性，r值分別為0.514、0.193、0.405、0.246、0.364，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均<0.05；與高密度脂蛋白（HDL）呈負相關，經(jīng)統(tǒng)計學處理，r=-0.314，p<0.01；與年齡、LDL、DBP、TC等不相關，經(jīng)統(tǒng)計學處理，P值均>0.05。
　　4.MGO與NF-κB(r=0.913,P=0.001)、TNF-α(r=0.924,P=0.001)之間的關系

14、呈線性趨勢，存在正相關性；NF-kB水平與TNF-α間呈線性關系，存在正相關性(r=0.917,P<0.01)；MGO、NF-kB、TNF-α三者變化趨勢一致，互為正相關?？刂芓G、空腹血糖、HbA1c、BMI、SBP、病程等相關因素后，TNF-α仍然是MGO的獨立相關因素，經(jīng)統(tǒng)計學處理r=0.859,P<0.01。
　　結(jié)論：
　　1.MGO在PDN組明顯升高，提示MGO可能參與了糖尿病痛性神經(jīng)病變的發(fā)病機制。