龍葵金屬硫蛋白基因的克隆及其功能分析.pdf

1、C l o n i n g a n d f u n c t i o n a l a n a l y s i so fm e t a l l o t h i o n e i ng e n e s f r o m S o l a n u mL ·T h e s i ss u b m i t t e d t oQ i n g d a o A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t yI n F

2、 u l f i l l m e n t o f t h e R e q u i r e m e n tf o r t h e D e g r e e o fM a s t e r o f S c i e n c eC a i L i - j u a n( C o l l e g eo f L i f eS c i e n c e s )S u p e r v i s o r ：P r o f ．F a nZ h o n g —x u

3、eP r o f ．G u oB a o ．t a iQ i n g d a o ．C h i n aJ u n e ，2 0 0 9青島農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文 目錄2 ．1 ．6 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化????????????????????????????????．1 82 ．1 ．7 菌液P C R 鑒定陽性克隆?????????????????????????????1 92 ．1 ．8 測序???????????????????????

4、??????????????????????????．．1 92 ．2S o r M T 2 a 的生物信息學分析????????????????????????????1 92 ．2 ．1 序列的提交及氨基酸序列比對??????????????????????????．1 92 ．2 ．2S o r M T 2 a 核苷酸序列分析????????????????????????????．2 02 ．2 ．3 龍葵S o r M T 2

5、 a 蛋白質(zhì)氨基酸序列的基本分析和功能預測???????????????2 02 ．2 ．4 系統(tǒng)發(fā)育分析?????????????????????????????????．2 02 ．3 轉(zhuǎn)龍葵M T 2 煙草及C d 耐受性分析?????????????????????????2 l2 ．3 ．1 植物表達載體p R O K I I - S o r M T 2 的構(gòu)建??????????????????????．2 l2 ．3 ．2

6、 $ o r M T 2 a 和S o r M T 2 c 轉(zhuǎn)化煙草及C d 耐受性分析??????????????????．2 4結(jié)果與分析?????????????????????????????????????2 81 龍葵M T c D N A 克隆????????????????????????????????．2 81 ．1 龍葵T o t a lR N A 的提取??????????????????????????????

7、2 81 ．2 龍葵M T c D N A 擴增???????????????????????????????．2 81 ．3 茵液D N A 的P C R 擴增檢測????????????????????????????2 91 ．4 重組質(zhì)粒的序列測定???????????????????????????????3 02S o r M T 2 a 生物信息學分析??????????????????????????????3 02 ．

8、1 氨基酸序列比對?????????????????????????????????3 02 ．2 核酸序列基本分析????????????????????????????????3 l2 ．3S o r M T 2 a 蛋白序列的分析結(jié)果???????????????????????????3 l2 ．4 同源性分析???????????????????????????????????3 53 轉(zhuǎn)龍葵M T 2 煙草及C d 耐受性分

9、析?????????????????????????．．3 53 ．1 目的基因M T 2 a 和M T 2 c 的獲得??????????????????????????．3 53 ．2 重組質(zhì)粒p R O K ] I - S o r M T 2 的鑒定?????????????????????????3 63 ．3 轉(zhuǎn)基因植株的P C R 檢測?????????????????????????????．．3 73 ．4 轉(zhuǎn)基因植株C