檢驗標本的采集-最終版_第1頁
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文檔簡介

1、檢驗標本的采集,泰安市第一人民醫(yī)院檢驗科,目錄 一、標本質(zhì)量的重要意義 二、實驗前質(zhì)量控制 三、標本采集的基本原則 四、關于實驗室標本拒收規(guī)定 五、異常情況處理流程 六、標本采集方法,一、標本質(zhì)量的重要意義,為保證臨床檢驗質(zhì)量,必須做到全過程質(zhì)量控制,即對實驗室檢查的全過程進行全面的質(zhì)量控制和質(zhì)量管理。這里包括:實驗前(分析前) 、實驗中(分析中) 和實驗后(分析后)三個階段的質(zhì)量控制,

2、其中實驗前質(zhì)量控制是全面質(zhì)量控制的前提?!昂细竦臋z驗標本是取得準確檢驗結果的首要保證”。國內(nèi)外研究報道,檢驗結果誤差中70%左右來自實驗前(分析前),而且實驗前(分析前)誤差是儀器、試劑、質(zhì)控品和標準品等再好也無法解決的。因此,必須注意做好實驗前質(zhì)量管理。,二、實驗前質(zhì)量控制主要包括: (一)患者的準備; (二)標本的采集; (三)標本的儲存和運送; (四)標本送出及簽收; (五)標本的處理; (六)已知的和需考慮的生物

3、因素和干擾因素等。,,(一) 患者準備 1.病人狀態(tài)  一般需在安靜狀態(tài)下采集標本,因運動能影響許多項目的測定結果。激烈運動后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測定值升高,有些恢復較慢,如ALT在停止運動1h后測定,其值仍可偏高30%~50%。有研究指出,患者處于激動、興奮、勞累、熱冷空氣刺激、恐懼狀態(tài)時,可使血紅蛋白、白細胞增高?!?.患者的飲食  進食后一定時間內(nèi)可使血液中許多化學成分發(fā)生變化。因為飲食中的不同成

4、分可直接影響實驗結果。一頓標準餐,可使血中甘油三脂增高50%、血糖增高15%。餐后采血,血清?;鞚?,影響檢驗結果的準確性。靜脈采血前至少要空腹8小時,血脂測定須12-14h后采血。 由于人們飲食的多樣性,生理功能又不完全相同,控制這一因素的唯一辦法是空腹采血,多數(shù)試驗要求空腹12h左右,許多正常參考范圍是以空腹血液測定值為基礎的。,3.藥物   藥物對檢驗的影響非常復雜,在采樣檢查之前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥

5、物不可停用,則應了解可能對檢驗結果產(chǎn)生的影響?! ?. 體位   由臥位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時,應考慮門診和住院病人可能存在的結果差異,故采集標本時要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。劇烈運動對檢驗結果有明顯的影響,如AST、ALT等酶類增高,白細胞增高;部分人會出現(xiàn)血尿、蛋白尿。,5.晝夜生理變化,采樣時間的控制-

6、最佳采樣時間的選擇的基本原則是:最具“代表性”時間,原則上晨起空腹時采集標本。其主要原因有: 1、盡可能減少晝夜節(jié)律帶來的影響。血鉀峰值期比低值期增加5-10%,HB增加8-15%,促甲狀腺素增加5-15%,血管緊張素可增加120-140%。為減少晝夜節(jié)律帶來的影響,使不同患者之間,或同一患者不同時期之間檢驗結果具有可比性,故采血時間應在相同時間進行。 2、病人處于平靜狀態(tài),減少病人由于運動帶來的影響;并減少飲食的影響;

7、 3、易于正常參考范圍作比較; 4、便于組織日常工作。,(二) 標本采集   標本采集是直接關系檢驗結果的基本要素,如果標本采集不當,即使最好的儀器設備也難以彌補在采集標本時引入的誤差和錯誤?! 。保_的采集標本是保證檢驗質(zhì)量的基礎。要注意以下問題: (1)標本采集部位和方法要正確; (2)標本標識一定要清晰無誤; (3)無人為的溶血和混濁因素:如收集標本用力震蕩或用玻璃棒及

8、木棍攪拌會導致溶血;餐后采血會出現(xiàn)脂血而致血清、血漿混濁。 (4)收集區(qū)溫度最好不超過20℃; (5)微生物檢驗標本采集嚴格無菌概念; (6)標本采集后要盡快送至實驗室。,2.標本采集時間: (1)空腹標本:一般指空腹8h后采集的標本。清晨空腹血液標本常用于臨床生化定量測定,受飲食、體力活動、生理活動等的影響較小,易于發(fā)現(xiàn)和觀察病理情況,而且重復性較好。 (2)隨時或急診標本:指無時

9、間限制或無法規(guī)定時間而必須采集的標本,被檢者一般無法進行準備。隨時或急診標本主要用于體內(nèi)代謝比較穩(wěn)定以及受體內(nèi)因素干擾少的物質(zhì)的檢查,或者急診、搶救病人必須做的檢查。 (3)指定時間標本:即指定采集時間的標本,根據(jù)不同的檢測要求有不同的指定時間,如24h尿蛋白定量、葡萄糖耐量試驗、內(nèi)分泌腺的興奮或抑制試驗、腎臟清除率試驗等。,(三) 標本儲存與運送 標本采集后應盡快送至實驗室,若不能及時送檢,已采集的標本要按檢驗規(guī)

10、定的貯存條件,如室溫、冷藏、冰浴、溫浴或防腐貯存,將標本直立置于穩(wěn)定、干燥、避光、密閉的環(huán)境中,避免振搖,以免標本滲漏或溶血影響檢測結果。血液標本采集后應及時分離血清或血漿,否則可發(fā)生紅細胞與血清之間成分的相互轉移,或紅細胞中的某些酶分解待測物等,從而影響檢驗結果。 (1)采樣后須立即送檢的常規(guī)項目:血氨、血沉、血氣分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細菌培養(yǎng),特別是厭氧菌培養(yǎng)?!?(2)采樣后0.5h內(nèi)送檢的常規(guī)項目:血糖、電解質(zhì)、

11、血液細胞學、體液細胞學、涂片找細菌、霉菌等?!?(3)采樣后1~2 h內(nèi)送檢的常規(guī)項目:各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測定等。,,(4)采樣后2 h以上才能送檢者,則常對標本采取必要的保存手段。對血糖或乳酸可直接分離血清后冷凍保存,或用NaF作穩(wěn)定劑2~8℃密封保存;K+ 必須分離血清后密封2~8℃存放;ACP須加穩(wěn)定劑后分離血清冷凍保存;對其他一般項目,可加蓋密封后直接2~8℃存放,但血沉和細胞學檢查不能采用此

12、方法。  (5)標本保存1個月:一般對檢測物分離后,-20℃存放?!?標本需長期保存(3個月以上者):對檢測物分離后(包括菌種) -70℃保存,還應避免反復凍融。,(四)標本送出及簽收 臨床工作人員從病人采集標本并將標本從臨床運送到實驗室及實驗室人員接收臨床標本,均應按標準化要求進行,并且一定要做到認真核對,包括標本來源、標本屬性、檢查項目、標本采集和運送是否合乎要求等,標本送出人員和標本接收人員都要做認真的記錄并簽字

13、存檔。,(五)標本的處理 1、實驗室接收標本后應及時正確地予以處理,否則會影響檢測結果的準確性。 2、如取血后未盡快轉送或分離血清、血漿,血清與血細胞長時間接觸可發(fā)生以下變化: (1)由于血細胞的酵解作用,血糖以每小時5%~15%的速率降低,即使在真空采血管中在較低溫度下每小時也會降低1.9%,糖酵解產(chǎn)物乳酸和丙酮酸升高。 (2)由于紅細胞膜通透性增加和溶血加重,紅細胞內(nèi)化學成分發(fā)生轉移和釋放,酶活性受影響,

14、血清無機磷、鉀、鐵、乳酸脫氫酶、天門冬氨酸轉移酶、肌酸激酶等升高。 (3)由于酯酶作用,膽固醇酯因分解而減少,游離脂肪酸增加。 (4)酸性磷酸酶測定血標本室溫放置1~2h測定結果降低50%。,(5)電解質(zhì)測定血標本未及時分離血清和血漿,可導致血鉀測定結果偏高。 3、實驗室接收標本后的處理應注意以下事項: (1)時間:實驗室接受標本后應盡快給予分類和離心。 ① 促凝標本采血后5~1 5 min盡

15、早處理; ② 抗凝標本可采血后立即離心; ③ 非抗凝(無促凝)標本采血30~60min后離心; ④ 抗凝全血標本(全血細胞分析、ESR、TnT等)不需要離心。 (2)溫度:一般標本為室溫(最好是22~25℃)放置;冷藏標本(對溫度依賴性分析物)應保持2~8℃直到溫度控制離心。 (3)采血管放置:應管口(蓋管塞)向上,保持垂直立位放置。 (4)采血管必須封口:管塞移去后會使

16、血PH改變,影響結果,如可使PH、Ca2+增高,使ACP減低;封口可以減少污染、蒸發(fā)、噴濺和溢出等。,(六)已知的和需考慮的生物因素和干擾因素 分析前的可變因素: 1、生物因素:可引起所檢測物質(zhì)在體內(nèi)的變化,此種變化與檢測方法無關,分為可變的因素和固定的生物因素: (1)可變的生物因素:包括營養(yǎng)、禁食、飲酒、體重、肌肉重量、體力活動、姿勢、氣候、身高、作息規(guī)律、治療藥物; (2)固定的生物因素:包括性別、年齡、種

17、族和遺傳因素。 2、干擾因素:在收集和分析標本過程中,干擾因素常導致分析結果與被測物真實濃度不符。將內(nèi)在干擾因素即機體內(nèi)自身的因素和外在的干擾因素區(qū)別開來。內(nèi)在干擾因素主要包括: (1)溶血、脂血、膽紅素血; (2)內(nèi)源性物質(zhì)如抗凝藥物、治療藥物及其代謝產(chǎn)物、輸注液等; (3)外源性物質(zhì)與標本混合在一起,如抗凝劑、殘留的洗液、細菌、霉菌。,二、標本采集的基本原則 1、申請單填寫要點 每個檢驗

18、項目或組合檢驗項目送一份標本,每一份標本要在HIS中錄入與該標本有關的患者信息并掃碼確認信息。 (1)病人的病歷信息:申請者必需清楚入錄病人所在臨床科室名稱、病歷號、床號、臨床樣本、樣本的采集日期和時間(年、月、日、時、分)、申請者姓名、申請檢驗日期; (2)申請的檢驗項目:申請者必需清楚入錄檢驗項目名稱,項目名稱應規(guī)范、準確,特別是申請組套項目時,一定要與檢驗科LIS組套內(nèi)容一致,否則需入錄具體單項; (3)項目加做

19、時限:在樣本有效保存期間和檢測結果不受影響的情況下,醫(yī)師可申請加做項目; (4)艾迪康、金域專用的申請項目可參見艾迪康、金域特殊檢驗項目表,備注:有關的臨床和治療信息,藥物可能在體外影響分析方法或在體內(nèi)引起病理變化,在申請單上提供此類信息。 2、采集標本前,首先要核對患者基本信是否屬實;然后核對收集標本用容器、標識與申請信息是否相符合,查對合格后再采集或收集標本。 3、收集足夠的標本于適當?shù)娜萜鲀?nèi)封好口后及時送檢。

20、采集靜脈血時要正確使用真空采血管取血至刻度,在取下采血管的同時立即將該采血管輕輕顛倒混勻5~8次,使試管內(nèi)預置的添加劑與血樣充分混勻,但不可劇烈搖晃以免造成標本溶血。 4、已采集的標本若不能及時送檢,要嚴格按檢驗規(guī)定的貯存條件暫存。未按要求采集、儲存、運送的標本將被視為不合格標本處理。 5、在標本采集、送檢的過程中遇到任何不明或失誤之處,請及時與相應檢驗專業(yè)組聯(lián)系,以避免或減少差錯發(fā)生。 6、禁止利用患者信息送檢

21、其他人標本! 7、不詳之處或新開展項目請預先聯(lián)系!,三、關于實驗室標本拒收規(guī)定 實驗室專業(yè)負責人同意并有項目檢驗人員簽字,及時與臨床溝通,有下列情況時可考慮標本拒收: 1、標本屬性不清、標記錯誤或無標記、標本標識與申請單標識不符; 2、抗凝劑比例錯誤; 3、標本收集管使用錯誤,如若以下項目沒有正確使用收集管,視為不合格標本。 (1)ESR/血漿D-二聚體應使用枸櫞酸鈉(黑帽/藍色)抗凝管;

22、 (2)血醛固酮應使用EDTA(紫帽)抗凝抗凝管; (3)K+、N a+、Ca2+可用非抗凝血,絕對不能使用枸櫞酸鈉(黑帽/藍色)抗凝管或EDTA(紫帽)抗凝抗凝管; (4)全血細胞分析、ABO血型測定必須用EDTA(紫帽)抗凝管。,4、微生物室拒收標本: (1)儲存、運送不當(該冷藏而未冷藏的標本),被污染的微生物標本; (2)痰、便標本已干(痰液標本涂片要求:低倍鏡視野中≤10個鱗狀上皮細胞,以及≥

23、25個白細胞,拒收未達到要求標本); (3)尿標本未用無菌瓶留??; (4)厭氧培養(yǎng)標本未按要求取材及送檢; (5)其他無菌部位取材及送檢時已被污染的標本。 5、其它各種未按標準留取、送檢的標本。,四、異常情況處理流程 1、標本量及性狀異常時的處理流程 (1)標本量少,無法按要求完成所有項目的檢測,檢驗科將優(yōu)先檢測重要項目,敬請諒解。 (2)重度溶血的標本對K、GLU、TP、CK、CK-

24、MB、LDH、HBDH、AST、r-GT、AFU、微量元素等項目的結果影響較大,建議重新送檢。溶血標本對NSE項目檢測結果影響較大,建議重新送血檢測。 溶血引起部分物質(zhì)血清濃度變化,2、復查的處理流程 若臨床對結果有疑問,請在標本的保存期內(nèi)提出(一般在24小時內(nèi)),予以復查。 3、標本補送的處理流程 (1)由于標本量少、標本污染、性狀不符合等原因造成無法完成檢測,檢驗科將通知臨床主管

25、護士補送標本; (2)臨床補送標本時,應在標本容器上或者在申請單上特別寫明患者信息及檢測項目; (3)實驗室根據(jù)相應信息,安排檢測。 4、項目加做的處理流程 (1)臨床要求加做項目,在樣本有效保存期間和檢測結果不受影響的情況下,通知實驗室評估標本量; (2)評估合格后,實驗室通知主管護士 在HIS中入錄患者的信息及加做的項目并利用“空的標本容器”掃碼確認相關信息。 (3)護士將“空的標本容器

26、”送至實驗室進行掃碼簽收。,五、標本采集方法 (一)、血液檢驗標本采集方法   標本采集是直接關系檢驗結果的基本要素,如果標本采集不當,即使最好的儀器設備也難以彌補在采集標本時引入的誤差和錯誤?!?(一) 標本采集注意事項:   1、止血帶或壓脈器:采集靜脈血時,止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過40秒為宜,否則容易引起淤血、靜脈擴張,并且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升

27、高等。 2、采血時間與部位:大多數(shù)化驗檢查要求清晨、空腹、采集靜脈血應盡可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋,而且對實驗室檢查結果發(fā)生嚴重干擾,特別是血糖和電解質(zhì)。,3、避免溶血、雜質(zhì)污染:采血器具必須無菌、干燥、潔凈.避免特別用力抽吸和推注、避免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同,樣本溶血可使紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。 4、血樣的采集:血樣要求在每一天

28、的同一時間采集,理想的時間是早晨7:00到8:00,尤其是監(jiān)測為目的時,更要保證標本采集時間的統(tǒng)一。最后一次食物和液體攝入應在前一天下午6:00到7:00 (急診檢驗例外)。血樣采集應在不服藥期間,如在早晨服藥前。血樣采集時,患者應仰臥位,采血點應在同一靜脈區(qū),通常為手臂靜脈。 5、標本采集后須立即送檢,放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復穿刺,易導致標本溶血或有小凝塊,影響檢測結果。

29、 6、采集血培養(yǎng)標本時應先注射厭氧瓶,盡量減少接觸空氣時間。 7、微量元素測定采集標本的注射器和容器不能含游離金屬。,,(二)臨床化學/免疫檢驗標本 1、化學項目大多數(shù)需要空腹采靜脈血,多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采一管血; 2、采血量視檢查項目多少不同而異,通常為4.0~5.0 ml; 3、多個組合檢測項目同時采血時應按下列順序采血 血培養(yǎng) 無加劑管

30、凝血管 有添加劑管 有添加劑管的順序為:櫞酸鹽管 肝素管 EDTA管草酸鹽/氟化鈉管 4、不論是抗凝血還是非抗凝血,為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間,血液標本收集后,須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來,避免由此而影響檢驗結果的準確性。從血液標本采集開始,必須在2h內(nèi)將全血處理為血清或血漿。,,,,,,,(1)血清(非抗凝血):采血后標本于22~25℃(室溫)15~30min后可自行(自發(fā))完全

31、凝固,禁用木棍和玻棒等剝離凝塊;冷藏標本凝集較慢,加促凝劑者凝集加快。 (2)血漿(抗凝血):應采用抗凝管采血,采血后立即顛倒混合5~10次,采血后數(shù)分鐘內(nèi)可離心分離血漿。 (3)冷藏標本:用于穩(wěn)定血液中溫度依賴性成分(抑制細胞代謝)的檢測項目,標本于2~8℃冷藏(標本采集后立即置于冰箱中,冷藏必須充分);標本需冷藏的測定項目有:兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血標本一般不冷藏,血鉀測定標本冷

32、藏不得>2h。全血標本切忌冷凍。 (4)代謝抑制劑和防腐劑的應用:用于抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉后,血細胞未分離情況下血標本中Glu,22~25℃穩(wěn)定24h.2~8℃穩(wěn)定48h;氟化鈉不適用于新生兒及兒童的Glu測定(因兒童PCV高,細胞糖酵解難以控制);氟化鈉一麝香草酚混合劑不適合酶學檢測(因氟化鈉一麝香草酚混合劑抑制酶活性));甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適用于血糖測定。,,(三)紅細胞沉降率(血沉,ESR)檢測標本

33、 靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管采血),黑帽管。 采血注意事項: 1、單獨采1管血,準備采血至2ml刻度線(抗凝劑:全血=1:4); 2、采血后立即上下顛倒混合5~10次; 3、采血后應盡快送檢(必須2h內(nèi)檢測)。 (四)血常規(guī)(全血細胞分析)檢驗標本 一般用EDTA 1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。

34、 采血注意事項: 1、采血后立即上下顛倒混勻,5~10次.不可用力震蕩; 2、應按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹; 3、采血后應盡快送檢(需顯微鏡觀察形態(tài)的標本采血后應及時推片固定,因為超過2小時WBC形態(tài)會發(fā)生改變); 4、血型與血常規(guī)可采1管血。,,(五)75克葡萄糖耐量試驗(OGTT)/胰島素釋放試驗/C-肽釋放試驗 1、病人準備:試驗前3日,每日進食碳水化合物量不低于250-30

35、0 克,且維持正?;顒?,影響試驗的藥物(如:咖啡因、口服避孕藥、水楊酸鹽等)應在3日前停用,試驗前病人應10~16小時不進食。 2、標本采集:臨床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75克葡萄糖,再于給糖后1、2、3小時各采血2ml/L(共4次)。 3、標本保存:采血后1小時內(nèi)分離血清并及時冷藏送檢或采用血糖專用抗凝管采血,于2~8℃保存。 4、注意事項:胰島素測定受溶血影響較大,采血時應避免溶血。,,(六)高

36、血壓系列檢驗標本 1、高血壓三項(腎素、血管緊張素I、II) (1)病人準備:β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般要在停藥后2周測定腎素活性(PRA),利血平等代謝慢的藥物應在停藥3周測定。不宜停藥的病人改服胍乙啶等影響PRA較小的降壓藥。鈉攝入量影響機體PRA水平,故病人測定PRA前3天應適當減少食鹽攝入量,最好同時測定取血前24小時尿鈉含量,以供分析PRA結果時參考; (2

37、)標本采集:靜脈取血4~5ml,拔除針頭后緩慢注入到專用抗凝管中,蓋好管塞后上下顛倒5次,混勻后2500轉/分,離心5~10分鐘,分離血漿,將血漿裝入專用血漿管后低溫送檢。如不能立即送檢,需盡快冰凍保存(-15℃)。溶血標本不能檢測; (3)標本類型、標本量:專用抗凝管采血,分離血漿,取2ml送檢;,,(4)標本保存:低溫冰箱保存(-15℃以下),可保存2個月; (5)注意事項:申請單上應注明抽血時的體位(臥位:病人在早

38、上6-8時起床前,取靜脈血;立位:病人起床后活動3小時,取靜脈血。)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);標本未及時分離血漿、反復凍融、溶血、保存不當、使用過期抗凝管等均可使結果受到影響。 2、醛固酮 (1)病人準備:留樣前應停服利尿劑至少3周,停服抗高血壓藥物1周; (2)標本采集:血漿醛固酮測定應采用肝素抗凝,采集后立即分離血漿,置-20℃保存待測;尿液標本則留取24小時尿量,用10~15mL濃鹽酸防腐;

39、 (3)申請單上注明:抽血時的體位(臥位、立位)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);尿液標本要準確記錄24小時尿量。,,(七)皮質(zhì)醇標促腎上腺皮質(zhì)激素本采集及注意事項 正常人皮質(zhì)醇、促腎上腺皮質(zhì)激素的分泌存在晝夜節(jié)律,一般為早上8點、下午4點采血及24點,送檢時請務必在申請單上注明采血時間。采血后立即送檢或將血樣試管放置冰水中保存。 注意事項: 1、檢測8點:采血時間在8點至10點,不要在8點以前采血,

40、采血后立即放入冰盒送檢驗科。 2、檢測16點:采血后立即放入冰盒送檢驗科。 3、檢測24點:采血后立即放到冰盒中,放到冰箱冷藏室,第二天送檢驗科。,,(八)微量元素檢測標本采集要求 1、采血人員應戴乳膠或聚乙烯手套,若手套涂粉,需用靜脈采血皮膚清潔法處理手套后進行操作。 2、橡皮塞對鋅有污染,故普通采血管不可使用,請使用本中心提供的專用管。 3、采集方法:用肝素抗凝真空管(綠帽),采集靜脈

41、血1.0~2.0mL,采集后馬上輕輕顛倒混勻。 4、標本凝固或含凝塊,不能檢測。(九)骨髓檢查的要求和注意事項 1、涂片要求:二張血片,六張骨髓片,懷疑白血病則需八張骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”,以示區(qū)別。 2、申請單注意事項: (1)病例摘要:應填寫全面,尤其是肝、脾、淋巴結、出血狀況等與血液病相關的癥狀以及藥物的應用等均應填寫清楚;,,(2)化驗結果:血常規(guī)結果一定不能缺,如果可能,MCV

42、、MCH、MCHC及分類也一并填上; (3)采取骨髓部位也應填上,如果采取骨髓時不順,應重抽,以免耽誤病人。 (十)流式細胞術檢測項目的標本采集及注意事項 1、淋巴細胞亞群系列 標本要求:EDTA或肝素抗凝全血2ml(推薦EDTA抗凝)。 注意事項:該系列項目在不同年齡段的細胞數(shù)參考值不 盡相同,所以送檢時請務必在申請單上注明病人年齡。 2、白血病免疫分型 標本要求:肝素抗凝骨髓或

43、全血2ml。 注意事項:請使用白血病免疫分型專用申請單。 3、人類白細胞抗原B27檢測(HLA-B27)/ 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)檢測 標本要求:EDTA或肝素抗凝全血2ml。 備注:保證新鮮標本,流式細胞術檢測項目需要24小時內(nèi)送檢。,,(十一)遺傳學檢測標本采集要求 1、標本采集:外周血標本可使用艾迪康或金域配送的肝素抗凝管(遺傳專用)進行采集,采集后立即將試管輕輕顛倒混勻,以免

44、凝血;臍帶血標本、骨髓標本可以在穿刺成功后,打開艾迪康或金域配送的肝素抗凝管蓋,將臍帶血或骨髓注入采集管中,立即將試管輕輕顛倒混勻,以免凝血,請注意無菌操作,不要污染管蓋。請避免使用注射器采集標本后直接注入采集管的方式進行標本采集,以免引起溶血;請勿使用EDTA等抗凝管采集標本。 2、標本量:外周血、臍帶血、骨髓各4ml; 3、標本送檢:合格標本須于采血后上午10點之前送至檢驗科,標本采集后及時通知艾迪康或金域工作人員

45、接收標本;標本有溶血、凝血現(xiàn)象,也視為不合格標本。 4、標本保存:標本采集后置于18~25℃保存,不可冷凍,不可放置于高溫環(huán)境中。 5、申請單填寫:請完整填寫申請單,尤其是標本采集時間 、性別、病史、臨床診斷等。,,(十二)基因檢測標本采集要求 1、所有用于基因診斷的標本必須用無菌試管或容器留取,嚴禁使用肝素抗凝管,采集標本時注意無菌操作。 2、為避免污染,送檢基因診斷標本項目需單人單項目單管。

46、 3、采集方法: (1)血液標本 抽取病人靜脈血,置無菌試管中室溫自然凝固或2000轉/分離心,取分離出的EDTA抗凝血漿/血清送檢; (2)女性分泌物標本 分泌物標本采樣應在非月經(jīng)期進行;采樣前3天內(nèi)不使用陰道內(nèi)藥物,不沖洗陰道;24小時內(nèi)不應有性行為; 采集時先用棉簽將宮頸口或尿道口過多的分泌物輕輕擦去,更換棉拭子,將棉拭子伸入宮頸,通過上皮交界處,旋轉3~5周,以保證取得較多的柱狀上皮標

47、本,對于懷疑HPV感染的患者,盡量采集病變部位標本,可提高HPV的檢出率。將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋;,,(3)男性分泌物標本先清潔尿道口,將棉拭子伸入男性尿道1cm,旋轉3~5次獲得標本,將取樣后的棉拭子放入配套的軟管中,旋緊管蓋; (4)皰疹液或疣體標本 對于生殖器或肛周有疣狀體增生,懷疑為尖銳濕疣者,宜直接采集疣體組織置于標本管中送檢。備注:疣體標本時,需要在申請單上的標本類型欄處寫上“疣體”。4 標本

48、保存:檢測靶核酸為DNA的標本,可在2~8℃下保存3天;檢測靶核酸為RNA的標本,應保存在-20℃下。,,(二)、尿液標本   根據(jù)采集時間可分為清晨空腹尿、隨機尿、計時尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、癥狀典型時尿等?!?1、晨尿:最好,安靜狀態(tài)下留取清晨第一次尿,該標本為濃縮尿.其細胞和管型等形態(tài)完整,適合做各種有形成分的檢查和尿蛋白、尿糖等項目的測定。 2、隨機尿:較常用,適用于門診和急診病人常

49、規(guī)檢驗.結果易受多種因素影響?!?3、空腹或餐后尿:適用于糖尿病、尿膽原、尿蛋白等的檢查?!?4、計時尿應于計時開始時排空尿液,然后于規(guī)定時間內(nèi)至截止時間留尿,計時尿多用于腎功能和有形成分排出率的評估,亦用于計算淀粉酶或肌酐的排出率?!?5、24h尿多用于化學組分的測定,亦用于泌尿道抗酸桿菌的檢查。,尿液原則上以不用防腐劑為好,如需12h或24h尿,首選以冷藏為妥,根據(jù)不同的檢驗目的加用合適的防腐劑,例如加40%甲醛1滴于尿

50、液30ml中,適用于細胞及管型等有形成分的檢查;激素檢驗常以鹽酸10ml作為24h尿的防腐劑或硼酸1g加于尿液100ml,麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸桿菌濃集檢查。 24h尿采集方法:留尿當日早晨8時排空膀胱內(nèi)尿液(注意:不管有沒有尿,都要排空),之后每次排尿均收集于一大容器內(nèi).至次日早晨8時最后一次尿液(注意:不管有沒有尿,都要排空膀胱內(nèi)尿液到大容器中)共24小時之間的所有尿液全部收集于潔凈容器內(nèi)。在收集期內(nèi)每

51、次尿液標本均應放冰箱(2℃~8℃)或陰涼處保存.全部收集完畢后送檢驗科。 6、特殊實驗尿(如3h、8h、12h等計時尿和餐后尿等),則應按醫(yī)囑要求進行留尿,并注明用藥時間,便于分析比對。 7、清潔尿(中段尿、導管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物學培養(yǎng)、鑒定和藥敏。,,尿液采集注意事項: 1、尿液標本必須新鮮,并按要求留取。從排出到檢測應在2h內(nèi)完成,否則會影響尿化學成分及有形物質(zhì)的改變。如不能及時分析,應

52、置4℃下冷藏保存,但冷藏時間最長不得超過8h。有時冷藏后一些結晶析出會影響結果,因此從冰箱取出的尿標本應在室溫中放置一定時間,使尿標本溫度平衡到室溫后再進行混勻,然后取樣檢測。尿標本不能冰凍,否則會影響某些成分的檢測。 如無特殊要求,均應采集清晨起床后的第一次尿,即晨尿檢查。對于門診和急診的患者,可采集隨機尿,易受食物、體位、活動等的影響。 2、標本留取后應及時送檢,以免細菌繁殖、細胞溶解

53、或被污染等。送檢標本時要置于有蓋容器內(nèi),以免尿液蒸發(fā)影響檢測結果。 3、常規(guī)檢驗留取中段尿送檢。,,4、特殊檢驗項目標本留取請隨時與相應檢驗科室聯(lián)系。 5、尿總蛋白(UPR)測定注意避免血紅蛋白的污染,否則會使尿總蛋白假性升高;尿液中如含有免疫球蛋白輕鏈(如本一周蛋白)會使蛋白假性降低;應用多肽類藥物治療的病人,血液中的多肽會排泄入尿,可導致尿蛋白假性升高,如懷疑尿中有此成分,建議將尿液濃縮后作蛋

54、白電泳。,,(三)、 糞便標本  1、采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別,一般檢驗留取新鮮的自然排出的糞便3~5g,必要時可肛拭子采取,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi),貼好標識送檢。標本容器最好用內(nèi)層涂蠟的硬紙盒,便于檢查后焚毀。細菌檢查的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及其它化學藥品。 2、盛糞便標本的容器必須有蓋,有明顯標記。要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進行檢查,表面無異常時應從糞

55、便表面、深處及糞端多處取材;采取標本后及時送檢,否則可因PH及消化酶等影響,而使糞便中細胞成分破壞分解。 3、不應留取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液,可導致某些項目檢測結果出現(xiàn)錯誤。糞便標本中也不可混入植物、泥土、污水等異物,易混淆實驗結果。不應該從衛(wèi)生紙或衣褲、紙尿褲等物品上留取標本,不能用棉簽有棉絮端挑取標本。,,4、做大便隱血試驗時,應囑患者于檢查前3d內(nèi)禁食肉類、含動物血的食物、某些蔬菜,禁服鐵劑和維生素C

56、等對實驗有干擾作用的藥物。選取外表及內(nèi)層糞便收集于合格容器內(nèi)及時送檢,長時間放置可使反應的敏感度降低。 5、檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前,于肛門周圍皺襞處拭取標本,并立即送檢。 6、檢查血吸蟲卵時應取黏液、膿、血部分,如須孵化毛蚴應留取不少于30g的糞便,并盡快送檢.必要時留取整份糞便送檢。 7、檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時,應床邊留取新排出的糞便,從膿血和稀軟部分取材,并立即保溫送

57、實驗室,并且實驗室接受標本后應立即進行檢查。 8、細菌檢驗用標本應全部用無菌操作收集于滅菌封口的容器內(nèi)。特殊檢驗項目留取標本時請預先聯(lián)系。,,(四)、漿膜腔積液檢驗標本采集 (一)、漿膜腔積液檢查標本 1、漿膜腔積液標本一般由臨床醫(yī)生行無菌穿刺術采集標本。 2、送檢標本量:理學檢查、化學檢查、細胞學檢查各留取2ml;細菌學檢查用無菌管采集標本,厭氧茵培養(yǎng)留取1 ml,結核菌檢查留取10ml。

58、 3、標本采集后必須立即送檢(否則可出現(xiàn)細胞變性,標本凝集,細菌溶解)。 4、用于細胞學檢查時,可在標本中加適量EDTA-2K鹽抗凝。但還需留取1管不加抗凝劑的標本用于觀察積液的凝固性;化學檢查標本宜用肝素抗凝。,(二)、腦脊液標本采集   1、由臨床醫(yī)師行腰椎穿刺術采集標本。 2、采集后的腦脊液分別收集于3個無菌試管中,每管1—2 ml,第一管作細菌培養(yǎng),第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查(腦

59、脊液常規(guī))。 3、標本必須立即送檢,放置過久影響結果,如細胞破壞、變性或細胞包裹于纖維蛋白凝塊中,使細胞計數(shù)降低,分類不準確等;存放的腦脊液葡萄糖會分解,使檢測結果降低。(三)、胸、腹水標本采集 1、由臨床醫(yī)師行無菌穿刺術,最好留取中段液體于消毒容器內(nèi),立即送檢。 2、為防止出現(xiàn)凝塊、細胞變性、細菌破壞自溶等,標本中應加入抗凝劑。常規(guī)及細胞學檢查宜用EDTA-2K抗凝,生化檢查標本宜用肝素抗凝。 3、 胸、腹水常規(guī)檢測

60、需采集兩管各10ml.,一管抗凝,另一管不抗凝。,,(四)、關節(jié)腔穿刺液  標本采集后第1管作微生物及一般性狀檢查,第2管用肝素抗凝作細胞學及化學檢查。(五)、痰液標本  采集晨間第一口痰,多用于細胞學及微生物學檢查。采樣前應先反復漱口,經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應在抗生素等藥物治療開始之前,如已用藥,則應選血液藥物濃度最低水平時采樣。(六)、陰道分泌物  由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時送檢,如不能及時送檢,

61、可在37℃加溫數(shù)分鐘后檢查,否則影響滴蟲動力,易于漏檢。,,(七)、精液和前列腺液  前列腺液標本應由臨床醫(yī)師進行前列腺按摩術采集,可直接滴在玻片上;若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液。疑為前列腺結核、膿腫或腫瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失敗或檢查結果陰性,而明確有臨床指征者,可隔3~5天后重新復查。 精液采集最好在實驗室附近,室溫應控制在20~35℃,采集標本前禁欲3~7天.采集精液前排凈尿液??捎檬忠ɑ蚱渌椒?,

62、將一次射出的全部精液直接排入潔凈、干燥的容器內(nèi)。因精子生成日間變動較大,不能僅憑一次檢查結果做診斷。一般應間隔1~2周檢查一次,連續(xù)檢查2~3次。,(八)、細菌培養(yǎng)之腦脊液、胸腹水穿刺液、關節(jié)腔穿刺液標本采集 1、應在用藥前采集,由臨床醫(yī)生以無菌條件下進行腰椎穿刺采集腦脊液3~5ml,因腦膜炎球菌易自溶,流感嗜血桿菌也易死亡,故盛于無菌試管或小瓶中保溫立即送檢?;驅⒛X脊液5ml直接注射于血培養(yǎng)兒童瓶中送檢即可。 2、穿刺液包

63、括胸水、腹水、心包液、關節(jié)液及鞘膜液。一般由臨床醫(yī)生穿刺抽取。標本的采集應在患者用藥之前,或停藥1~2天后進行。胸水、腹水可抽取5~10m1,心包液、關節(jié)可抽取2~5ml,將所得穿刺液分別盛于含有和不含有抗凝劑的無菌試管或小瓶中,充分混勻后,立即送檢。(九)、其他標本  根據(jù)具體檢驗項目而定,臨床醫(yī)師在開申請單前,應同檢驗科相關部門聯(lián)系,(五)、微生物學檢驗標本采集和處理(一)、尿液標本采集和處理 通常留取晨起第一次尿液(

64、此時尿液在膀胱內(nèi)儲存4h以上);尿液采集后要及時送檢,并保證2h內(nèi)接種;不能及時送檢和接種時,尿液應置4~8℃冰箱保存;冷藏標本應于8h內(nèi)接種;懷疑沙門氏菌感染時,應于發(fā)病2w左右采集尿液,懷疑鉤端螺旋體感染時,應于發(fā)病后2w采集尿液,上述時間此時陽性率高。尿液微生物學檢驗標本采集方法如下:(1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用滅菌水沖洗尿道口,無菌生理鹽水沖去消毒液,然后排

65、尿棄去前段尿液,收集中段尿5~10ml盛于帶蓋的無菌容器內(nèi)送檢。,(2)導尿法:用導尿管導取10~15ml尿液,置滅菌容器中送檢;長期留置導尿管者應更換新導尿管留尿;留置導尿時,用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口,用無菌注射器通過導尿管抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢) 。(3)集尿法:懷疑結核分枝桿菌感染時,于清潔容器中留取24h尿液,取其沉渣10~15ml送檢。(4)恥骨上膀胱穿刺法:培養(yǎng)結果與臨床病情矛盾時可采用

66、此法,一般較少應用。(5)腎盂尿采集法:必須由臨床醫(yī)生采集。注意事項:正常人的尿液是無菌的,除外尿道有正常菌群外,還有條件致病菌,而這些細菌又是尿路感染中常見的致病菌,故應該注意無菌采集。,(二)、糞便標本采集和處理(1)采集時間: ① 腹瀉患者于急性期,盡量在用藥前采集糞便; ② 傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便; ③ 懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。(2)采集方法: ① 自然排便法:取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物

67、等有意義成分,2~3g或1~2 m1,盛無菌容器內(nèi)或置于保存液或增茵液內(nèi)送檢;若疑似霍亂者應置于堿性蛋白胨水中(pH8.6)。 ② 直腸拭子法:難以獲得糞便或排便困難患者及幼兒可采用此法,將拭子前端用無菌甘油或生理鹽水濕潤,然后插入肛門約4~5cm(幼兒2~3cm),輕輕在直腸內(nèi)旋轉。擦取直腸表面粘液后取出,盛于無菌試管中或保存液中送檢。,(三)、痰及下呼吸道標本采集和處理 (1)自然咳痰法:①晨痰為佳;②先冷開水洗漱、清潔、口腔

68、和牙齒;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至無菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困難時可先霧化吸入NaCI溶液(100g/L,加溫到45℃)使痰容易咳出。查結核分枝桿菌,應留取24小時痰。 (2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。 (3)支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法,此采集方法必須由醫(yī)生操作。,① 氣管導管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。

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