毛冬青活性成分及其藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、毛冬青(MDQ)為冬青科冬青屬植物毛冬青(Ilex pubescens Hook.et Arn)的干燥根，臨床上廣泛用于治療心血管疾病和高膽固醇癥等，有較好的療效。毛冬青中含有多種活性成分，如已報(bào)道的毛冬青甲素，Pubescenoside A1和Pubescenoside A2等，均具有心血管方面的活性，但關(guān)于毛冬青提取物及其活性成分的藥物代謝及動(dòng)力學(xué)的報(bào)道不多。
　　 一、毛冬青中活性成分的分離
　　 本研究采用硅膠柱

2、層析，葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）柱層析以及制備薄層等分離方法對(duì)毛冬青藥材中的主要活性成分橄欖苦苷和反式丁香苷進(jìn)行分離純化，并采用核磁共振和質(zhì)譜對(duì)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，其中反式丁香苷首次從毛冬青中分離得到。
　　 二、橄欖苦苷的體內(nèi)代謝研究
　　 大鼠口服給予橄欖苦苷100 mg/kg后，收集給藥后大鼠尿液及糞便。通過(guò)液液萃取法處理樣品，運(yùn)用LC-MS/MS方法檢測(cè)尿液和糞便中的代謝物。在糞便中發(fā)現(xiàn)橄欖苦苷及

3、其5個(gè)代謝產(chǎn)物，其中橄欖酸，橄欖酸的葡萄糖苷為主要的代謝產(chǎn)物。在尿液中發(fā)現(xiàn)橄欖苦苷及其4個(gè)代謝物，橄欖苦苷苷元以及橄欖酸的氧化產(chǎn)物為主要的代謝物，說(shuō)明水解反應(yīng)及水解后氧化反應(yīng)是橄欖苦苷在體內(nèi)的主要的生物轉(zhuǎn)化途徑。橄欖苦苷的苷元及其甲基化脫氫產(chǎn)物，橄欖酸的葡萄糖苷以及橄欖酸的單氧化產(chǎn)物為大鼠排泄物中首次發(fā)現(xiàn)。
　　 三、毛冬青提取物大鼠給藥后橄欖苦苷的藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　 建立測(cè)定大鼠血漿中橄欖苦苷濃度的LC-MS/MS方

4、法，并成功應(yīng)用于毛冬青乙酸乙酯提取物通過(guò)口服和靜脈給藥后，橄欖苦苷在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。大鼠給予毛冬青乙酸乙酯提取物后，于不同時(shí)間點(diǎn)采集血液。樣品加甲醇沉淀蛋白后，直接采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法(LC-MS/MS)對(duì)血樣進(jìn)行含量測(cè)定。然后，采用WinNonlin數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件分析其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示，大鼠靜脈給予乙酸乙酯提取物200 mg/kg后，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為:t1/2=0.133 h，Cmax=5.44 ng/μl，AU

5、C0-t=1.84ng·h/μl。然而在大鼠口服給乙酸乙酯提取物1g/kg后，僅在給藥6小時(shí)時(shí)檢測(cè)到橄欖苦苷(Cmax=137 ng/ml)。
　　 四、橄欖苦苷在大鼠體內(nèi)的排泄研究
　　 建立了尿樣及糞樣中橄欖苦苷的定量分析方法，首次對(duì)大鼠靜脈和口服給藥后，尿樣及糞樣中橄欖苦苷的累積排泄量進(jìn)行研究。大鼠靜脈給予乙酸乙酯提取物(200mg/kg)后36h，尿中的橄欖苦苷累積排泄量很低，為2.86士4.10μg，占給藥劑量

6、的0.072±0.102％，靜脈給藥后，原型藥可能被廣泛的代謝轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致尿樣中檢測(cè)到的橄欖苦苷原型藥量很少。
　　 大鼠口服給予乙酸乙酯提取物(1g/kg)36 h后，尿中的橄欖苦苷累積排泄量很低，為0.70±0.48μg，占給藥劑量的0.003±0.002％。糞中的橄欖苦苷累積排泄量也很低，為2.20±1.31μg，占給藥劑量的0.011±0.007％。上述結(jié)果說(shuō)明，口服給藥后，一方面橄欖苦苷在肝臟可能存在強(qiáng)烈的首過(guò)效應(yīng)，另一