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文檔簡介
1、目的:
(1)建立大鼠頸動脈內(nèi)膜損傷模型,并用不同劑量二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)進行干預,觀察對頸動脈術后再狹窄的影響。
(2)研究大鼠頸動脈內(nèi)膜球囊損傷后局部核轉錄因子-κB(NF-κB)及其抑制因子-κB(I-κB)的表達變化、誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)的表達對球囊損傷后血管再狹窄進程中的作用,以及PDTC干預后,在其中所起的作用。
方法:
(1)將大鼠兩側頸動脈分別作為一側研究組
2、(球囊損傷)和對側為對照組(假手術),并以不同劑量PDTC進行干預,分別在頸總動脈球囊損傷后不同時間段(6h,1d,3d,7d,14d,28d)處死大鼠,留取兩側頸總動脈標本,應用組織形態(tài)學方法檢測內(nèi)膜增生并進行圖像分析;免疫組化分析增殖細胞核抗原(PCNA)在血管壁中的表達。
(2)應用凝膠電泳遷移率實驗(EMSA)和蛋白印跡雜交法檢測不同組別NF-κB的活性和 I-κBα的蛋白表達,RT-PCR檢測 iNOS mRNA表達
3、,通過對不同組別間NF-κB、I-κBα及iNOSmRNA的對比觀察,了解NF-κB/I-κBα及NF-κB/iNOSmRNA的關系。
結果:
(1)球囊損傷后,內(nèi)膜面積在3d開始增生,7、14、28天明顯增厚,與未損傷側血管相比有顯著性差異(P<0.05)。免疫組化分析發(fā)現(xiàn)PDTC干預組PCNA及VSMC的表達顯著低于單純球囊損傷組(P<0.05),隨著劑量的增大而減少。形態(tài)學研究發(fā)現(xiàn)PDTC干預對球囊損傷后內(nèi)膜面
4、積(Intima Area)、增生程度(IA/MA)有顯著的抑制作用(P<0.05),也隨劑量的增大而增強;PDTC對血管的擴張性重塑沒有影響,但對于收縮性重塑有一定的抑制作用(P<0.05)。
(2)球囊損傷后NF-κB活性和iNOS mRNA表達增強,I-κBα的蛋白表達減弱;PDTC可以減少I-κBα降解,對內(nèi)膜剝脫后NF-κB活性和iNOS mRNA表達有抑制作用。
結論:
(1)球囊損傷后損傷血管
5、彈性回縮、新生內(nèi)膜形成及負性重塑(慢性縮窄)是再狹窄發(fā)生的主要機制。而平滑肌細胞遷移、增殖是新生內(nèi)膜形成的關鍵因素。PDTC可以有效抑制平滑肌細胞的增殖和收縮性重塑,對再狹窄產(chǎn)生有益治療作用。并具有劑量依賴性。
(2)NF-κB和iNOS在球囊損傷后對血管平滑肌的增殖和遷移及再狹窄起著推動作用,而I-κBα在此過程中起著保護作用。PDTC可以通過減少I-κBα降解,從而抑制NF-κB活性和iNOS mRNA表達,防治再狹窄的進
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