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文檔簡介
1、目的:
研究miR-141對卵巢癌順鉑耐藥株COC1/DDP細胞生長,凋亡等生物學活性的影響。
方法:
1、針對miRNA-141設計相應的反義寡核苷酸(ASO-141)構建載體,向卵巢癌順鉑耐藥細胞COC1/DDP中轉(zhuǎn)染ASO-141,應用流式細胞儀驗證細胞轉(zhuǎn)染率。
2、收集轉(zhuǎn)染前后的細胞,分實驗組、陰性對照組、脂質(zhì)體對照組及空白對照組,MTT法檢測各組細胞生長抑制率;流式細胞儀檢測各組細胞凋亡
2、率;Real-timePCR檢測各組細胞中miR-141表達;Western-Blot檢測各組細胞中PTEN蛋白表達。
結果:
1、驗證ASO-141轉(zhuǎn)染COC1/DDP細胞成功,經(jīng)流式細胞儀驗證轉(zhuǎn)染率約60%。
2、MTT結果顯示:對照組之間細胞生長抑制率差異不顯著(P>0.05);轉(zhuǎn)染ASO-141實驗組細胞生長抑制率較對照組增高(P<0.05);隨著轉(zhuǎn)染ASO-141濃度的增加,細胞生長抑制率也隨之增
3、加,說明具有濃度依賴性。
3、流式細胞技術結果顯示:對照組之間細胞凋亡率差異不顯著(P>0.05);轉(zhuǎn)染ASO-141實驗組細胞凋亡率較對照組明顯增高(P<0.05)。
4、Real-timePCR結果顯示:miR-141在實驗組細胞中較對照組細胞中表達低(P<0.05)。
5、Western-Blot結果顯示:PTEN蛋白在實驗組細胞中較對照組細胞中表達上調(diào)(P<0.05)。
結論:
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