卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究姓名：張珂申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：楊興升20050510山東火學(xué)碩士學(xué)位論文卵巢癌順鉑耐藥靶向逆轉(zhuǎn)的初步研究碩士研究生：張珂導(dǎo)師：楊興升教授山東大掌齊魯醫(yī)院婦產(chǎn)科中文摘要目的：研究順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞系c0C1／DDP中多藥耐藥相關(guān)蛋白2(MRP21基因以及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶兀(GSTa)基因的表達(dá)，探討兩種基因的反義寡核苷酸對(duì)COCl／DDP細(xì)胞鉑類耐藥的逆轉(zhuǎn)作用。方法：

2、將人工合成的反義、錯(cuò)義硫代脫氧寡核苷酸經(jīng)脂質(zhì)體包裹轉(zhuǎn)染COCI／DDP細(xì)胞后，用MTT體外藥敏檢測(cè)法觀察COCI／DDP細(xì)胞耐藥性的變化，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RTPCR)方法檢測(cè)多藥耐藥相關(guān)蛋白基因(MRP2)以及谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶基因(GSh)mRNA水平表達(dá)的改變，同時(shí)通過(guò)Westernblotting的方法檢測(cè)兩種基因蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果：(1)COCl／DDP細(xì)胞中，MRP2與GSTit基因均有表達(dá)，其mRNA相對(duì)表達(dá)值分別為

3、O42e005和078士013。而親代COCI細(xì)胞中兩種基因均無(wú)表達(dá)。(2)將GSh反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染COCl／DDP細(xì)胞后，GST兀的mRNA水平降低(PO05)，其蛋白表達(dá)明顯降低，順鉑對(duì)COCI／DDP細(xì)胞的抑制率明顯提高，具有顯著性差異(Po05)。(3)將MRP2反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染COCl／DDP細(xì)胞后，MRP2基因在mRNA水平(P005)及蛋白水平的表達(dá)均明顯下降，耐藥細(xì)胞的耐藥性降低(耐藥指數(shù))具有顯著差異。(4)轉(zhuǎn)染錯(cuò)義寡