葡萄籽原花青素對人卵巢癌耐藥細胞COC1-DDP增殖抑制作用及機制研究.pdf

1、目的：觀察葡萄籽來源的原花青素(GSPE)對人卵巢癌耐藥細胞COC1/DDP的增殖抑制作用,并初步探討其機制。
　　 方法：(1)在第一部分實驗中,細胞培養(yǎng)細胞形態(tài)觀察,HE染色觀察細胞形態(tài)變化,MTT法檢測不同濃度葡萄籽來源的原花青素(0、20、40、80、160、320μg/ml)不同時間(24、48、72h)對COC1/DDP的增殖抑制作用,測定抑制率。(2)在第二部分實驗中,流式細胞儀和 TUNEL檢測各濃度GSPE作用

2、后細胞凋亡情況,Western-blot和RT-PCR檢測細胞內(nèi)Caspase-3,bcl-2,bax基因的表達情況。
　　 結(jié)果：經(jīng)GSPE作用后,COC1/DDP細胞體積變小,邊緣皺縮,胞漿內(nèi)顆粒物質(zhì)增多；HE染色觀察發(fā)現(xiàn)GSPE能引起明顯的細胞凋亡形態(tài)改變,在相同作用時間下,藥物濃度越高,形態(tài)改變越明顯；經(jīng)MTT試驗和細胞生長抑制率測定,GSPE對COC1/DDP有明顯的增殖抑制作用,而且這種抑制作用隨著其濃度的增大和作用

3、時間的延長而增強,。流式細胞術(shù)和TUNEL表明GSPE可以誘導(dǎo)細胞凋亡,且隨著藥物濃度增加,凋亡率升高。Western blot和RT-PCR檢測顯示隨著藥物濃度增加,Caspase-3和bax蛋白表達增加,bcl-2的表達下降。
　　 結(jié)論：葡萄籽原花青素在體外對人卵巢癌耐藥細胞COC1/DDP有明顯的增殖抑制作用,并能誘導(dǎo)其調(diào)亡,增加Caspase-3和bax蛋白表達,降低bcl-2的表達。GSPE誘導(dǎo)人卵巢癌耐藥細胞COC