乳腺癌腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞浸潤及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 腫瘤免疫微環(huán)境在乳腺癌的演進(jìn)過程中發(fā)揮著重要作用。瘤內(nèi)浸潤的Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)可以作為乳腺癌不良預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。但腫瘤微環(huán)境中Foxp3+Tregs細(xì)胞的趨化、浸潤及發(fā)揮功能相關(guān)的細(xì)胞因子目前尚未完全明確。且Foxp3+Tregs細(xì)胞在腫瘤組織的分布及密度差異是否與這些腫瘤表達(dá)的細(xì)胞因子有關(guān)也尚未完全了解。本研究旨在聯(lián)合評價(jià)浸潤性乳腺癌腫瘤微環(huán)境中細(xì)胞因子CCL22以及TGF-β1與Foxp

2、3+Tregs細(xì)胞浸潤的關(guān)系，初步探討兩種細(xì)胞因子對于乳腺癌患者的預(yù)后意義;由于前期研究發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞在不同分子分型的乳腺癌中浸潤的數(shù)量及分布均有明顯差異，且Basal-like型乳腺癌中免疫細(xì)胞的浸潤密度最高。因此本研究對不同病理學(xué)類型且預(yù)后迥異的Basal-like型乳腺癌中浸潤的幾種功能性免疫細(xì)胞進(jìn)行對比分析，尋找Basal-like型乳腺癌的免疫治療靶點(diǎn)。
　　 方法：
　　 417例未接受任何術(shù)前抗

3、腫瘤治療的原發(fā)性浸潤性乳腺癌患者的腫瘤組織，采用免疫組織化學(xué)(IHC)的方法檢測Foxp3+Tregs細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表達(dá)的趨化因子CCL22及誘導(dǎo)因子TGF-β1，分析了三者的臨床病理學(xué)特征、與乳腺癌患者的預(yù)后及與分子分型的關(guān)系;同時(shí)，也分析了Foxp3+Tregs細(xì)胞在乳腺癌組織中的密度和分布，以及兩種細(xì)胞因子與腫瘤組織不同部位浸潤Foxp3+Tregs細(xì)胞的關(guān)系。另外選擇了32例不同病理學(xué)類型的Basal-like型乳腺癌，同樣采用

4、免疫組織化學(xué)的方法檢測腫瘤上皮內(nèi)浸潤、腫瘤間質(zhì)浸潤和瘤周浸潤的不同免疫細(xì)胞，初步分析預(yù)后迥異的兩種病理學(xué)類型的Basal-like型乳腺癌中浸潤免疫細(xì)胞的差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、乳腺癌腫瘤微環(huán)境中浸潤的Foxp3+Tregs細(xì)胞在腫瘤瘤內(nèi)和瘤周分布的方式及密度均不相同。
　　 2、腫瘤內(nèi)高密度浸潤的Foxp3+Tregs細(xì)胞與預(yù)示著不良預(yù)后的臨床病理學(xué)特征相關(guān)，包括高組織學(xué)分級(P＜0.0001)，ER、

5、PR陰性表達(dá)(P＜0.0001)， HER-2/neu蛋白的擴(kuò)增(P=0.001)，此外，瘤內(nèi)高密度浸潤浸潤的Foxp3+Tregs細(xì)胞與患者的總生存和無病生存均負(fù)相關(guān)(OS: P=0.013，RFS: P=0.017)。
　　 3、腫瘤細(xì)胞表達(dá)的趨化因子CCL22的高表達(dá)與標(biāo)志患者不良預(yù)后的臨床病理學(xué)特征相關(guān)，包括高組織學(xué)分級(P＜0.0001)，ER陰性表達(dá)(P＜0.0001)，PR陰性表達(dá)(P＜0.001)， HER-2/

6、neu蛋白的過表達(dá)(P=0.028)，且與患者的總生存和無病生存均呈負(fù)相關(guān)(OS: P=0.001，RFS: P=0.002)。
　　 4、多因素分析發(fā)現(xiàn):上述與乳腺癌患者生存相關(guān)的變量，包括Foxp3+Tregs和CCL22均可作為患者生存及無病生存的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)(P＜0.05)。
　　 5、CCL22與乳腺癌瘤內(nèi)浸潤的Foxp3+Tregs細(xì)胞正相關(guān)(P＜0.0001)，但是與瘤周浸潤的Foxp3+Tregs細(xì)胞無明

7、顯相關(guān)。
　　 6、Foxp3+Tregs浸潤和CCL22表達(dá)在不同分子分型之間存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.0001)。并且隨著5種乳腺癌分子分型預(yù)后的差別（由好至差以此為Luminal A型、Luminal B型、Luminal-HER-2型、HER-2-enriched型和Basal-like型）陽性細(xì)胞數(shù)量逐漸增多。
　　 7、TGF-β1的表達(dá)與瘤內(nèi)和瘤周的Foxp3+Tregs均正相關(guān)(P=0.023; P=

8、0.046)，然而與乳腺癌的臨床病理學(xué)特征、分子分型及患者的預(yù)后均無相關(guān)關(guān)系。
　　 8、免疫細(xì)胞在Basal-like型乳腺癌腫瘤組織中的不同部位的浸潤密度不同:GrB+淋巴細(xì)胞在腫瘤上皮內(nèi)和腫瘤間質(zhì)浸潤密度較高，而T-bet+淋巴細(xì)胞和CD68+巨噬細(xì)胞在瘤周組織呈高密度浸潤。
　　 9、在預(yù)后迥異的兩組不同病理類型的Basal-like型乳腺癌，即經(jīng)典型髓樣癌(MC)組和浸潤性導(dǎo)管癌(IDC)組(pTNM分期≥3期

9、)中，對比分析了免疫細(xì)胞的分布和密度:結(jié)果發(fā)現(xiàn)預(yù)后好的MC腫瘤上皮內(nèi)浸潤的GrB+淋巴細(xì)胞、腫瘤上皮內(nèi)和腫瘤間質(zhì)浸潤的T-bet+淋巴細(xì)胞、以及瘤周浸潤的CD68+巨噬細(xì)胞，比IDC對應(yīng)部位免疫細(xì)胞的浸潤密度均高，均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.0001;P=0.001, P=0.002; P=0.006)。
　　 結(jié)論：
　　 乳腺癌瘤內(nèi)浸潤的Foxp3+Tregs是乳腺癌患者總生存及無病生存的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)，與乳腺癌的分

10、子分型及預(yù)后相關(guān)。在激活Foxp3+Tregs細(xì)胞的級聯(lián)過程中，細(xì)胞因子CCL22和TGF-β1可能作為了瘤內(nèi)Foxp3+Tregs細(xì)胞浸潤的候選趨化因子。其中，CCL22可作為乳腺癌患者總生存及無病生存的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)，并有望成為對乳腺癌免疫治療的靶向目標(biāo)。另外，我們選擇了預(yù)后迥異的兩組不同病理學(xué)類型的Basal-like型乳腺癌，即MC組和IDC組。對其浸潤免疫細(xì)胞的密度和分布方式進(jìn)行對比分析，證實(shí)了GrB+淋巴細(xì)胞、T-bet+淋巴