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1、目的:探討Ezrin蛋白對(duì)人高低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞亞系中的細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。 方法:利用免疫組化,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),免疫?。╓estern.Blot),放射免疫顯像(RII)方法檢測(cè)Ezrin蛋白在高低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況。采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力及黏附率。 結(jié)果:高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞中Ezrin在基因和蛋白表達(dá)均顯著高于低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-4
2、35s細(xì)胞。高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞增殖能力和粘附率也都高于低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞。131I標(biāo)記的抗Ezrin抗體,在接種高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞裸鼠腫瘤部位放射性濃聚強(qiáng)于接種低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞裸鼠腫瘤部位放射性聚。 (1)免疫組化結(jié)果顯示:在高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞中Ezrin在胞漿胞膜呈強(qiáng)染色,呈強(qiáng)陽(yáng)性,其平均光密度值為0.59±0.04;在低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌
3、細(xì)胞中細(xì)胞膜少量淺黃染色,呈弱陽(yáng)性,其平均光密度值為0.12±0.02。圖像分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表明,低轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞與高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞相比較,染色減弱具有非常顯著性差異(P<0.01)。 (2)RT-PCR分析結(jié)果顯示:Ezrin mRNA在高轉(zhuǎn)潛能移MDA-MB-435s細(xì)胞表達(dá)水平明顯高于低轉(zhuǎn)移潛能的MDA-MB-435s細(xì)胞,Ezrin在高轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞中表達(dá)的平均光密度值為0.69±0.07,在
4、低轉(zhuǎn)移潛能MDA-MB-435s細(xì)胞中表達(dá)的平均光密度值為0.15±0.03,兩者比較,有非常顯著性差異(P<0.01)。 (3)Western.Blot結(jié)果顯示:高轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細(xì)胞中Ezrin蛋白表達(dá)的平均光密度值為0.62±0.10,低轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細(xì)胞中Ezrin蛋白表達(dá)的平均光密度值為0.13±0.04,高轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s細(xì)胞Ezrin蛋白表達(dá)水平亦明顯高于低轉(zhuǎn)移MDA-MB-435s
5、細(xì)胞,有非常顯著性差異(P<0.01)。 (4)31I標(biāo)記抗Ezrin抗體對(duì)荷MDA-MB-435s細(xì)胞的裸鼠SPECT顯像結(jié)果顯示:接種高轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞裸鼠腫瘤部位放射性濃聚較強(qiáng),其平均光密度值為0.53±0.07;接種低轉(zhuǎn)移潛能腫瘤部位放射性濃聚較弱,其平均光密度值為0.12±0.03,有非常顯著性差異(P<0.01)。 結(jié)論:在不同轉(zhuǎn)移潛能的乳腺癌MDA-MB-435s細(xì)胞中,Ezrin在高轉(zhuǎn)移潛能乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)
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