人乳腺癌腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)及生物學特性之初探.pdf

1、第一部分人乳腺癌腫瘤干細胞的分離培養(yǎng) 目的：在原代分離出的乳腺癌腫瘤細胞中分選出CD44<'+>CD24<'-/LOW>表達的細胞，并計算出CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞，CD44<'+>CD24<'+>細胞和CD44<'->細胞的數(shù)量比例。初步認定CD44<'+>CD24<'-LOW>細胞可能是干細胞。 方法：通過機械分離，酶消化法在乳腺癌腫瘤組織中分離出乳腺癌腫瘤細胞；將其培養(yǎng)后運用免疫磁珠兩步法，分離

2、出CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞，通過細胞計數(shù)，分別計算CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞，CD44<'+>CD24<'+>細胞和CD44<'->細胞的數(shù)量比例。 結(jié)果：在乳腺癌腫瘤原代細胞中分離出了CD44<'+>CD24<'-LOW>細胞。CD44<'+>CD<,24><'-/LOW>細胞數(shù)量約占2.5％，而CD44<'+>CD<,24><'+>細胞約占30％左右，CD<,44><'->細胞混合群約占

3、67.5％左右。 結(jié)論：乳腺癌組織中有CD44<'+>CD24<'-LOW>細胞，且CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞可能是人乳腺癌腫瘤干細胞。 第二部分人乳腺癌腫瘤干細胞(CD44+CD24-/LOW)生物學特性之初探 目的：對比從原代分離出來的乳腺癌腫瘤細胞中分選出的CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞與CD44<'+>CD24<'+>細胞和CD44<'->細胞的生長增殖能力，運用電子顯微鏡

4、觀察3群細胞的形態(tài)特點，并探討三群細胞ER．PR， HER-2的表達情況。 方法：培養(yǎng)剛分選完畢的CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞，CD44<'+>CD24<'+>細胞和CD44<'->細胞，繪制三群細胞的生長曲線；以光學顯微鏡和電子顯微鏡觀察三群細胞的形態(tài)特點。并以免疫組化方法測定三群細胞的ER，PR，HER-2的表達。 結(jié)果：根據(jù)3群細胞的生長曲線發(fā)現(xiàn)，在相同培養(yǎng)條件下，CD44<'+>CD24<'-/L

5、OW>細胞的生長增殖能力最強，CD44<'+>細胞能力最弱；通過透射電子顯微鏡觀察，CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞的細胞核大而圓，核漿比大于1/2．核仁顏色深濃，細胞器少，游離多聚核糖體豐富，細胞微絨毛稀少短小。CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞的ER，PR，HER-2均為陰性，而與腫瘤組織的ER(++)，PR(-)，HER-2(-)表達不同。 結(jié)論：CD44<'+>CD24<'-/LOW>細胞是腫瘤生長