嗜吞噬細胞無形體及其復(fù)合感染的調(diào)查與實驗研究.pdf

1、蜱媒傳染?。═ick-borne infectious diseases）是一類自然疫源性疾病，且多為新發(fā)傳染病，蜱傳病原體種類繁多，涵蓋病毒、立克次體、螺旋體、原蟲、細菌等。由于傳播媒介、動物宿主分布廣泛，蜱媒傳染病易在自然界流行，當(dāng)人進入疫源地經(jīng)蜱叮咬就會被感染、發(fā)病，因而蜱媒傳染病對從事生產(chǎn)活動、經(jīng)濟建設(shè)以及野營旅游等人群威脅很大，疾病暴發(fā)流行時有發(fā)生。
　　嗜吞噬細胞無形體（Anaplasma phagocytophilu

2、m）是一種經(jīng)蜱叮咬傳播的專性、細胞胞漿內(nèi)寄生菌，能侵染人粒細胞引起人粒細胞無形體?。?Human granulocytic anaplasmosis, HGA）。美國1994年發(fā)現(xiàn)第一例實驗室確診 HGA病例，隨后該病在美國流行逐漸嚴(yán)重，至今報告了約萬例HGA病例。歐洲多個國家也都有HGA病例報道，包括荷蘭、法國、德國、意大利、丹麥、西班牙、波蘭等。2006年，我國安徽省出現(xiàn)了人粒細胞無形體病聚集性暴發(fā)事件，這也是我國關(guān)于人粒細胞無形體

3、病確診病例的首次報道。血清流行病學(xué)調(diào)查表明我國多個地區(qū)人群都可能存在嗜吞噬細胞無形體感染，但由于診斷技術(shù)缺乏及臨床重視程度不夠等原因，臨床確診病例少有報道，其潛在危害亟待加強調(diào)查研究。國外研究通過動物模型初步探討了嗜吞噬細胞無形體的感染及致病特征，但其具體感染機制尚不清楚。然而，不同地域來源的病原體具有不同的遺傳進化背景，可能具有不同的致病特征。我國自然疫源地嗜吞噬細胞無形體流行株的感染及致病特征尚不清楚，亟待研究解決。
　　自然

4、疫源地中一種媒介蜱或宿主動物可攜帶兩種或兩種以上病原體，使得同一疫源地常常存在多種蜱媒傳染病，人群復(fù)合感染時有發(fā)生。在媒介蜱，動物宿主和暴露人群中，最常見的復(fù)合感染是無形體與伯氏疏螺旋體，伯氏疏螺旋體與巴貝西蟲，無形體與巴貝西蟲的復(fù)合感染。本研究團隊前期研究從河南省信陽地區(qū)的褐家鼠中發(fā)現(xiàn)了嗜吞噬細胞無形體和微小巴貝西蟲的復(fù)合感染。本研究利用已有病原體資源，通過動物模型來開展嗜吞噬細胞無形體和微小巴貝西蟲實驗感染研究，探討單獨感染和復(fù)合感

5、染的病原變化規(guī)律以及感染特征。
　　近年來，新型布尼亞病毒感染引起的發(fā)熱伴血小板減少綜合征的暴發(fā)流行給我國國民健康造成了嚴(yán)重危害，目前已蔓延至二十多個省份地區(qū)，其中河南省信陽地區(qū)是該新發(fā)蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)。然而，蜱能攜帶多種病原體，并且一個疫源地往往存在多種蜱媒傳染病，因此國內(nèi)外研究者一直疑惑：該地區(qū)是否存在其它蜱媒傳染病？本研究團隊前期研究從河南省信陽地區(qū)的宿主動物中發(fā)現(xiàn)了嗜吞噬細胞無形體和微小巴貝西蟲復(fù)合感染，證實當(dāng)?shù)卮嬖谄渌?/p>

6、傳染病原體，間接說明當(dāng)?shù)乇┞度巳嚎赡艽嬖谶@些蜱媒傳染病的感染。因此，為進一步了解蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽地區(qū)的具體情況，本研究調(diào)查了當(dāng)?shù)孛浇轵绾捅┞度巳褐?A. phagocytophilum、B. microti、斑點熱群立克次體（Spotted fever group rickettsiae, SFGR）以及新型布尼亞病毒（SFTSV）感染情況。
　　主要研究結(jié)果：
　　1嗜吞噬細胞無形體與微小巴貝西蟲實驗感染研究
　

7、　研究基于前期在河南信陽地區(qū)發(fā)現(xiàn)的嚙齒動物中A. phagocytophilum和B. microti復(fù)合感染，建立了A. phagocytophilum與B. microti單獨感染及復(fù)合感染的實驗小鼠模型，探討單獨感染和復(fù)合感染的病原變化規(guī)律以及感染特征。
　　病原體單獨感染實驗發(fā)現(xiàn)，A. phagocytophilum單獨感染Balb/C鼠在第10天病原載量達到感染高峰，隨后病原載量逐漸降低，感染可持續(xù)兩個月至三個月，B.

8、microti單獨感染Balb/C鼠在第20天病原載量達到感染高峰，隨后感染載量快速下降，感染持續(xù)大約三個月；A. phagocytophilum與B. microti感染均可引起B(yǎng)alb/C鼠脾腫大，急性期最為嚴(yán)重，并隨著病原感染載量降低，脾腫大逐漸恢復(fù)；A. phagocytophilum與B. microti感染均可以引起B(yǎng)alb/C鼠的白細胞減少、血小板減少，B. microti感染還可引起紅細胞計數(shù)減少和血紅蛋白降低。A. p

9、hagocytophilum與B. microti感染急性期均可引起B(yǎng)alb/C鼠脾、肺、肝組織的病理輕度改變，之后隨著病原感染載量降低，病理異常改變亦逐漸恢復(fù)。
　　病原體復(fù)合感染實驗發(fā)現(xiàn)，在復(fù)合感染的情況下，A. phagocytophilum感染載量可長時間持續(xù)維持在高位；在先感染A.phagocytophilum的情況下，B. microti的感染高峰會提前，且感染載量可增高兩倍以上；復(fù)合感染也能導(dǎo)致Balb/C出現(xiàn)更為嚴(yán)

10、重的脾腫大、血小板減少、紅細胞減少及血紅蛋白降低等情況；復(fù)合感染Balb/C鼠能同時表現(xiàn)出A.phagocytophilum和B. microti單獨感染導(dǎo)致的組織病理變化。
　　2蜱中嗜吞噬細胞無形體與其它蜱傳病原體感染調(diào)查
　　本研究于2013年至2015年在河南信陽地區(qū)開展了媒介蜱中蜱傳病原體感染的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)貎?yōu)勢蜱種長角血蜱中存在 A. phagocytophilum感染，感染率為3.2％，多個調(diào)查點均

11、存在感染，游離蜱與寄生蜱中 A. phagocytophilum感染率沒有顯著性差異。結(jié)果還發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)亻L角血蜱中存在 B. microti、SFGR感染，感染率分別為2.4%和12.8%。寄生蜱中未發(fā)現(xiàn)B. microti感染，這可能因為B. microti的主要宿主動物是嚙齒類動物，而羊、犬則極少感染B. microti。蜱中SFGR感染率遠高于A. phagocytophilum和B. microti，主要原因可能是SFGR能經(jīng)卵傳播

12、，而A. phagocytophilum和B. microti則無法經(jīng)卵傳播。同時，研究還調(diào)查了SFTSV感染情況，發(fā)現(xiàn)長角血蜱的感染率也相對較高，但感染率在不同調(diào)查點差別較大。
　　本研究還發(fā)現(xiàn)蜱中蜱傳病原體復(fù)合感染情況，包括A. phagocytophilum與B. microti復(fù)合感染、A. phagocytophilum與斑點熱群立克次體復(fù)合感染、斑點熱立克次體與 B. microti復(fù)合感染。
　　3人群中嗜吞噬

13、細胞無形體與其它蜱傳病原體感染調(diào)查
　　本研究以有疫源地暴露史且出現(xiàn)發(fā)熱癥狀病人為研究對象，在排除新型布尼亞病毒感染后，通過血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)17例A. phagocytophilum現(xiàn)癥感染病人，11例B. microti現(xiàn)癥感染病人，以及29例斑點熱群立克次體現(xiàn)癥感染病人，同時，還發(fā)現(xiàn)12例A. phagocytophilum既往感染病人，18例B. microti既往感染病人，以及11例斑點熱群立克次體既往感染病人。進一步核酸

14、篩查和序列分析發(fā)現(xiàn)了人群中存在多種斑點熱群立克次體感染，基于ompA和gltA的序列分析提示可能存在兩個斑點熱群立克次體新種：Rickettsia sp. XY99和Rickettsia sp. XY118。
　　通過臨床資料分析發(fā)現(xiàn)A. phagocytophilum、B. microti、以及SFGR感染病人的臨床表現(xiàn)較為相似，稍有不同之處是少部分斑點熱群立克次體感染病人會出現(xiàn)斑疹、焦痂癥狀。臨床表現(xiàn)相似性可能與病人納入存在偏

15、倚相關(guān)。本研究的哨點醫(yī)院為信陽154醫(yī)院，該醫(yī)院感染科診治病人多為發(fā)熱伴血小板減少綜合征病人，雖然本研究排除了新型布尼亞病毒感染病人，但病人均為疑似發(fā)熱伴血小板減少綜合征，因而在臨床表現(xiàn)上會有相似性。本研究還詳細描述了兩種新發(fā)現(xiàn)斑點熱群立克次體Rickettsia sp. XY99和Rickettsia sp. XY118感染的臨床特征。
　　主要結(jié)論：
　　通過實驗感染研究揭示了嗜吞噬細胞無形體與微小巴貝西蟲感染的病原變化

16、規(guī)律以及感染致病特征，同時通過構(gòu)建復(fù)合感染動物模型，探討了復(fù)合感染的病原變化規(guī)律以及感染致病特征，研究結(jié)果表明復(fù)合感染可以造成疾病進展復(fù)雜化，并可能產(chǎn)生更為嚴(yán)重的疾病表現(xiàn)，進一步提示臨床上應(yīng)重視蜱傳病原體復(fù)合感染。
　　通過流行病學(xué)現(xiàn)場調(diào)查，初步弄清楚了我國蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽地區(qū)的媒介蜱中蜱傳病原體感染情況，一是確認當(dāng)?shù)卮嬖谑韧淌杉毎麩o形體以及微小巴貝西蟲、斑點熱群立克次體，二是發(fā)現(xiàn)媒介蜱中存在蜱傳病原體復(fù)合感染，研究結(jié)果提示當(dāng)

17、地蜱暴露人群或發(fā)熱伴血小板減少綜合征疑似病例可能會感染這些蜱媒傳染病，臨床上必須加強重視并開展鑒別診斷及針對治療。
　　通過血清流行學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)信陽地區(qū)存在嗜吞噬細胞無形體感染病例，也發(fā)現(xiàn)存在微小巴貝西蟲及斑點熱群立克次體感染病例，并且當(dāng)?shù)剡@三種疾病的臨床表現(xiàn)較為相似。研究結(jié)果表明，在蜱媒傳染病重災(zāi)區(qū)信陽地區(qū)，除已知的新型布尼亞病毒外，還存在多種蜱媒傳染?。喝肆＜毎麩o形體病、人巴貝西蟲病及斑點熱。由于臨床上這些蜱媒傳染病的臨床表現(xiàn)

18、較為相似且有效治療策略不同，因而有必要對病人進行鑒別診斷，開展針對性治療，提高療效及預(yù)后。此外，血清學(xué)調(diào)查還發(fā)現(xiàn)了蜱媒傳染病復(fù)合感染情況，包括嗜吞噬細胞無形體與微小巴貝西蟲復(fù)合感染、嗜吞噬細胞無形體與斑點熱群立克次體復(fù)合感染、斑點熱立克次體與微小巴貝西蟲復(fù)合感染。其中1例病人為嗜吞噬細胞無形體與微小巴貝西蟲的急性期復(fù)合感染，研究描述展示了其疾病進展情況。由于前期研究提示這兩種病原體的復(fù)合感染會使病情復(fù)雜化，因而，臨床上需重視嗜吞噬細胞無