簡(jiǎn)介：LJ王7811577洳≥J～法’碩士學(xué)位論文⑧侵染半夏的病毒檢測(cè)與大豆花葉病毒的分子系統(tǒng)學(xué)研究作者姓名申屠蘇蘇學(xué)科專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)老師陳集雙教授所在學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院提交日期二霉零六年五月中國(guó)杭州BSACMVDSMVSMVBPDDH20符號(hào)及縮寫(xiě)B(tài)OVINESERUMA1BUMINCUCUMBERMOSAICVIL33SDASHEENMOSAICVIRUSSOYBEFLLLMOSAICVIRUSBASEPAIRDOUBLEDISTILLEDWATERDEPCH20DISTILLEDWATEDEPCKBKILOBASEPAIRNTORFPCRRTPCRUTRCPNUELEIOTIDES牛血清白蛋白黃瓜花葉病毒芋花葉病毒大豆花葉病毒堿基對(duì)雙蒸水TREATED麗TLLDEPC處理水OPENREADING矗AMEPOLYMERASECHAINREACTIONREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERSEUNTRANSLATEDREGIONCOATPROTEINV千堿基對(duì)核苷酸開(kāi)放閱讀框聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)非編碼區(qū)外殼蛋白

簡(jiǎn)介：分類號(hào)S852651密級(jí)博士學(xué)位論線粒體自噬與自噬在豬瘟病毒感染中的作用機(jī)制及豬瘟病毒感染的代謝組學(xué)研究勾紅潮指導(dǎo)教指導(dǎo)教師陳金頂教授學(xué)院名學(xué)院名稱獸醫(yī)學(xué)院專業(yè)名專業(yè)名稱預(yù)防獸醫(yī)學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席傅振芳教授中國(guó)廣州2016年6月華南農(nóng)業(yè)大學(xué)華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名日期導(dǎo)師簽名日期學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬華南農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許學(xué)位論文被查閱（除在保密期內(nèi)的保密論文外）；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以允許采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。本學(xué)位論文屬于□保密，在年解密后適用本授權(quán)書(shū)?！醪槐Ｃ?。學(xué)位論文全文電子版提交后□同意在校園網(wǎng)上發(fā)布，供校內(nèi)師生和與學(xué)校有共享協(xié)議的單位瀏覽。請(qǐng)?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打“√”本人簽名日期導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文河南地區(qū)豬圓環(huán)病毒血清學(xué)調(diào)查及F2基因片段的表達(dá)姓名張春霞申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)指導(dǎo)教師劉金華李文剛20060301ABSTRACTPORCINECIRCOVIRUSPCVISASMALL，NONENVELOPEDICOSAHEDRALMAMMALIANVIRUSCONMININGACIRCULARSIN【GLESTRANDEDDNAGENOMEWHICHNOWHASBEENASSIGNEDTOTHECIRCEVIRIDAEFAMILYPCV1WASFIRSTDESCRIBEDIN1974BYTISHER∞APICORNAVHMLIKECONTAMINANTOFTHEPERMANCLRPIGKIDNEYCELLLINEPK15ANDACCEPTEDTOBEANONPATHOGENICVIRUSHOWEVCRPCV2HASBEENASSOCIATEDWLHPOSTWEANINGMULTISYSTEMICWASTINGSYNDROMEPMWS1886BLOODSERUMSAMPLESCOLLECTEDFROMHENANPROVINCEW口ETESTEDWITHPCV2ELISAKIT11”SEROLOGYDATAOFDIFFERENTREGION、DIFFERENTAGEANDDIFFERENTVARIETYSWINEWASANALYSISEDITWASINDICATEDTHATTHEINFECTIONOFPCV2EXISTEDWIDELYINSWINEFARMSILLHEⅢMNPROVINCEAGEANDBREEDAFFECTEDTHESWINERESISTANCETOPCV2THEILLFECLIONOFPCV2CANDISTINCTLYREDUCETHESWINESIMMTMERESPONSETOVACCINETWOLⅪDRSOFSPECIFICPRIMERSWASDESIGNEDACCORDINGTOTHEPUBLISHEDGENOMESOQU如O∞OFPCV2TOAMPLIFYTHEORF2G肌EOFPCV二2FIOMTHREESAMPLESWITLLCLINICALSIGNS0FPMWSBYPCIL1KPCRPRODUCTWASCLONEDINTOPMD1STVECTORAND8EQUENCEDAFTERCOMPARISONOFTHE8EQUANCE謝THWHLOHOFOTHERPCVSTRAINSINOENSANKPHYLOGENEFICTREEANALYSISWASPERFORMED011THEPCVSTRAINSITWASSHOWEDTHATTHEXEWFLS882％一100％NUCLEOFIDEIDENFITYAMONGOTHERPCV2STRAINSORF2GONEMGCZLBANKONECOMPLETEGENOMESOFPCV2WEREAMPLIFIEDANDSE1UENCEDPHYLOGENETIEANALYSISSHOWEDTHEREWASCORRELATIONBETWEENPCV2ISOLATESINGEOGRAPHICREGLONSAFRAGMENT塒出A8I∞OF593BPOFORF2G∞EWASCLONEDINTOPET32AEXPRESSIONVECTORTHERECOMBINANTPET32F2PLASMIDWASTRANSFORMEDINTOBL21RDE3COMPETENTCELLOFESCHERICHIACOLIANDINDUCEDBY邛TGWITHAFINAICONCENTRATIONOFL0MMOL／LTHEMOLECULARWEIGHTOFFILSEDRECOMBINANTPROTEINWAS38KDBYSDSPAGE11LISSTUDYWILL畫(huà)VESOMEHELPONSTUDYINGTHERUCTIONOFORF2PCV2，VACCINEDIAGNOSISANDCONTROLOFPCV2ILLCLLIHAKEYWORDSPORCINECIM州M郎CV；SEROLOGICALEPIDEMIOLOGY；ORF2GIYNO；EXPRESSIONII

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文MASTERTHESISMOLECULAREPIDEMIOLOGYOFPIGEONORIGINNEWCASTLEDISEASEVIRUSESISOLATEDINCHINADURING20112015ANDTHEIMMUNEEFFICACYOFINACTIVATEDVACCINEVIB14MASTERCANDIDATEZHENZHENZHAOADVISERPROFXIUFANLIUMAJORPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEYANGZHOUUNIVERSITYJUNE，2016II揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文替換，并且單抗681與分離株反應(yīng)的HI效價(jià)也比其與LASOTA低6個(gè)滴度。病毒中和試驗(yàn)結(jié)果顯示，分離株NT2311，PI與LASOTA的抗原相似系數(shù)R值為042，證明兩者間存在顯著的抗原性差異。對(duì)分離自不同地區(qū)且毒力有差異的NT2311PI及ZJ0813一PI進(jìn)行全基因組序列測(cè)定，結(jié)果表明兩株病毒基因組全長(zhǎng)為15192NT，遺傳進(jìn)化分析表明兩株病毒處于EU／RE這個(gè)分支。兩株病毒NP、P、M、F、HN、L蛋白氨基酸序列的同源性分別為為99％、97％、995％、986％、995％FN996％，共有25個(gè)氨基酸差異位點(diǎn)涉及到極性及結(jié)構(gòu)的變化，這些位點(diǎn)為VIB亞型NDV毒力分子機(jī)制的研究提供了有益參考。2鴿新城疫滅活疫苗VIB14的免疫效力試驗(yàn)?zāi)壳拔覈?guó)對(duì)新城疫的防控主要依靠免疫接種，但目前我國(guó)尚無(wú)針對(duì)鴿新城疫的疫苗產(chǎn)品。前期，本室利用反向遺技術(shù)成功研制出了專用于鴿新城疫預(yù)防的滅活疫苗VIB14，為了加速該疫苗的產(chǎn)業(yè)化，本文對(duì)其開(kāi)展了鴿新城疫滅活疫苗VIB14免疫效力試驗(yàn)研究。首先將疫苗株VIB14在雞胚上連續(xù)傳15代，測(cè)定第1、5、10、15代次病毒的毒力和F蛋白裂解位點(diǎn)的氨基酸序列，數(shù)據(jù)顯示疫苗株VIB14經(jīng)雞胚連續(xù)傳代后，其毒力測(cè)定指標(biāo)和F蛋白裂解位點(diǎn)序列均符合典型的弱毒特征，表明疫苗株具有良好的遺傳穩(wěn)定性；同時(shí)疫苗毒株在雞胚上具有較強(qiáng)的繁殖性能，疫苗毒尿囊液的HA效價(jià)姜91092，病毒含量高于109一EID50／01ML。在生物學(xué)特性測(cè)定的基礎(chǔ)上，我們選取了4株VIB亞型NDV分離株對(duì)鴿進(jìn)行致病性實(shí)驗(yàn)，并從中篩選獲得了用于疫苗效力試驗(yàn)的檢驗(yàn)強(qiáng)毒株NT2311PI，該毒株以106EID50的劑量攻毒時(shí)可導(dǎo)致非免疫鴿產(chǎn)生80％的死亡率，試驗(yàn)鴿在攻毒后的第15天仍可檢測(cè)到排毒。最小免疫劑量試驗(yàn)結(jié)果表明VIB14滅活疫苗的最小免疫為2009L，以該劑量免疫后5周，免疫鴿ND平均抗體效價(jià)可達(dá)到71092以上，并可有效抵御檢驗(yàn)強(qiáng)毒的攻擊。另外，與傳統(tǒng)疫苗株LASOTA滅活疫苗相比，以VIB一14研制的滅活疫苗免疫鴿后誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生的效價(jià)高，具備更強(qiáng)的免疫保護(hù)效力，因此該滅活疫苗顯示出了廣闊的應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞鴿；新城疫病毒；遺傳進(jìn)化；疫苗；免疫效力

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文禽副粘病毒2型的血清學(xué)調(diào)查、M基因序列測(cè)定及中國(guó)分離株的研究姓名張國(guó)中申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師汪明趙繼勛20060601ABSTRACTAVIANPARAMYXOVIRUSSEROTYPE2APMV21ISONEOFFAMILIARPATHOGENSONPOULTRYPRODUCTIONANDBELONGSTOTHEGENUSAVULAVIRUSWITHINTHEFAMILYPARAMYXOVIRIDAEINTHESTUDYWEREPORTEDTHERESULTSOFA3YEARSEROLOGICALSURVEYPERFORMEDINVARIOUSAVIANSPECIESINCHINAANDSEQUENCEDFIRSTMGENEOFAPMV2WEALSOPREPAREDTHEMONOCLONALANTIBODIESOFAPMV2AGAINSTHEMAGGLUTININPROTEINANDSTUDIEDDETAILEDLYONTHEFOURISOLATESOFAPMV2BETWEEN2003AND2005，ATOTALOF9156SERACOLLECTEDWASSCREENEDUSINGTHEHAEMAGGLUTINATIONINHIBITIONHIASSAYTHEAVERAGEDSEROPOSITIVITYOFAPMV2FORCHICKENS，DUCKS，PEACOCKS，OSTRICHESANDPARTRIDGESWAS429％，251％，458％，476％AND800％RESPECTIVELYAMONGTHECHICKENFLOCKSOFDIFFERENTTYPEANDBREEDS，THERATEOFINFECTIONFORAPMV2WAS100％ANDSPFFLOCKSWEREFOUNDTOBENEGATIVETHERESULTSOFSEROLOGICALSURVEYINDICATEDTHATTHEDISTRIBUTIONOFAPMV一2ISEXTREMELYWIDEINCHINAWECLONEDFIRSTMGENEOFAPMV2USINGRAPIDAMPLIFICATIONOFEDNAENDSRACE，ANDTHERESULTSOFSEQUENCESANALYSISSHOWNTHATTHEMGENEOFAPMV2IS1089NUCLEOTIDELONGANDENCODESAPOLYPEPTIDEOF362AMINOACIDSWITHAPREDICTEDMOLECULARWEIGHTMWOF39727KDATHEHOMOLOGYBETWEENYUCAIPAVIRUSANDOTHERAPMVSWASLOWERANDTHEHIGHESTONEWASAPMV6，THEHOMOLOGYFORNUCLEOTIDEANDAMINOACIDWAS4388％AND45％RESPECTIVELYBYFUSINGTHESP2／0MYELOMACELLSWITHTHESPLEENCELLSOFMOUSEIMMUNIZEDWITHPURIFIEDYUCAIPAVIRUS，ONEHYBRIDOMACELLLINESSECRETINGMONOCLONALANTIBODIESMEABAGAINSTAPMV2WEREPREPAREDAFTERSCREENINGBYTHEHEMAGGLUTINATIONINHIBITIONHITESTANDINDIRECTENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYELISATHEIMMUNOGLOBULINSUBCLASSOFTHEMCABWASIGG1ANDTHETYPEOFLIGHTSTRANDWAS1CSTRANDT11EELISATITERANDHITITEROFSCITIESWERE1106AND210RESPECTIVELYTHEMCABDIDNOTCROSSREACTWITHTHENDV、AIV、EDSVSHOWEDGOODSPECIFICITYWESTUDIEDDETAILEDLYONTHEFOURISOLATESOFAPMV2ANDTHEPRIMARYCONTENTSINCLUDEDMORPHOLOGICOBSERVATIONOFTHEPARTICLES，ANALYSISOFSEROLOGICALRELATIONANDANTIGENICITYDIFFERENCES，ASWELLASSEQUENCESCOMPARISONOFFUSIONFANDHAEMAGGLUTININNEURAMINIDASE0INGENESEXAMINEDUNDERELECTRONMICROSCOPE，THEISOLATESWEREFOUNDTOBEROUNDINSHAPEANDDIFFERENTINSIZETHERESULTSOFHIANDINDIRECTELISAUSINGMONOELONALANTIBODIESSHOWEDSOMEDIFFERENCESBETWEENTHEISOLATESANDTHEREFERENCESTRAINYUCAIPAONTHESEROLOGICALRELATIONANDANTIGENICITYTHEISOLATESDERIVEDFROMCHICKENHADACLOSERRELATIONSHIPTOYUCAIPAVIRUSRATHERTHANTHOSEOFBIRDISOLATESSEQUENCECOMPARISONOFFANDHNGENESSHOWEDSIMILARRESULTS，ALTHOUGHTHEVARIATIONSWERELESSERAMONGAPMV2VIRUSESINNUCLEOTIDEANDAMINOACIDSEQUENCEBYSEQUENCECOMPARISON，ITISALSEVEALEDTHATATTHEMOLECULARLEVELTHEFOURVIRUSSTRAINSBELONGTOAPMV2，TWOOFWHICHAREFROMTHESAMEGROUPOFTHEIMPORTEDGOULDIANFINCHINADDITION，THEPATHOGENICITYOFISOLATESF8ANDNKWERESTUDIED，THERESULTSPREVEALEDTHATSTRAINF8MAYLEADHISTOLOGICALDAMAGEONTHETRACHEAS，BUTTHE’4一，’，

簡(jiǎn)介：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒轉(zhuǎn)錄組學(xué)及免疫抑制機(jī)理的研究TRANSCRIPTOMICSANDIMMUNOSUPPRESSIONMECHANISMOFRETICULOENDOTHELIOSISVIRUSINFECTION研究生繆佶導(dǎo)師秦愛(ài)建教授專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)資助項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金31101814國(guó)家自然科學(xué)基金31201881教育部創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)IRT0978江蘇省優(yōu)勢(shì)學(xué)科項(xiàng)|PAPD江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃CXLX1433江蘇省動(dòng)物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心項(xiàng)目揚(yáng)州大學(xué)2016年6月2揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文2REV感染宿主細(xì)胞CEF的轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究本研究旨在了解該病毒與宿主之間的相互作用關(guān)系，利用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)以及熒光PCR方法，在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)病毒感染宿主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果表明，病毒感染LD、3D、5D以及7D四個(gè)時(shí)間點(diǎn)共鑒定出1785個(gè)差異表達(dá)基因，其中參與免疫反應(yīng)的相關(guān)基因在病毒感染后期呈現(xiàn)顯著的差異性變化。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，差異基因主要參與信號(hào)傳導(dǎo)、免疫反應(yīng)、自噬作用以及細(xì)胞粘附作用等，其中相關(guān)信號(hào)通路有MAPK信號(hào)通路、JAK／STAT信號(hào)通路以及TOLL樣受體信號(hào)通路等。在眾多差異基因中，IL6、STAT1、MYD88、TLRS、NFRD3、IRFS以及ISGS等在病毒感染過(guò)程中可能發(fā)揮著更為重要的作用，但其相關(guān)機(jī)制還需進(jìn)一步研究。本研究首次對(duì)REV感染宿主的轉(zhuǎn)錄組學(xué)進(jìn)行研究，從而為該病毒的致病機(jī)理以及先天免疫途徑等奠定了基礎(chǔ)。3不同細(xì)胞中REV增殖效力研究REV的流行病學(xué)以及分子生物學(xué)研究己取得了一定的進(jìn)展，但是目前用于REV的細(xì)胞培養(yǎng)體系只限于雞成纖維細(xì)胞，而REV的靶向?yàn)槊庖邔?shí)質(zhì)器官，這就限制了對(duì)REV的深刻認(rèn)識(shí)。本研究選取雞成纖維細(xì)胞系DFL、雞巨噬細(xì)胞系HDL1、雞T淋巴細(xì)胞系MSBL以及雞B淋巴細(xì)胞系進(jìn)行病毒感染實(shí)驗(yàn)。通過(guò)建立的REALTIMEPCR方法對(duì)病毒感染水平檢測(cè)。研究發(fā)現(xiàn)，感染后REV拷貝數(shù)在不同的細(xì)胞系中均呈現(xiàn)漸進(jìn)增加趨勢(shì)病毒在成纖維細(xì)胞系中的復(fù)制效率區(qū)別于免疫細(xì)胞系中的復(fù)制效率。間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)可觀察到病毒感染DFL細(xì)胞后在96H可見(jiàn)明顯陽(yáng)性反應(yīng)，而HDL1、MSBL、DT40這三種免疫細(xì)胞系在48H前均可見(jiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。此外，顯微鏡下觀察免疫細(xì)胞系與成纖維細(xì)胞系在形態(tài)學(xué)上存在一定區(qū)別，主要反應(yīng)在免疫細(xì)胞在感染后期出現(xiàn)細(xì)胞碎片增多，細(xì)胞密度降低、體積縮小、折光性減弱等現(xiàn)象。本研究首次進(jìn)行REV體外感染免疫細(xì)胞，提供了相應(yīng)的感染條件和規(guī)律，為進(jìn)一步研究和完善相關(guān)機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。4REV感染引起免疫細(xì)胞凋亡的機(jī)理研究REV感染引起宿主細(xì)胞凋亡并造成免疫器官的實(shí)質(zhì)性損傷，該損傷與免疫細(xì)胞的凋亡有關(guān)。本研究利用REV分別感染DFL細(xì)胞、HDLL細(xì)胞、MSBL細(xì)胞、以及DT40細(xì)胞等不同細(xì)胞系后，利用CCK8法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)活力，然后通過(guò)TUNEL熒光染色法和ANNEXINV／PI流式細(xì)胞術(shù)觀察REV對(duì)免疫細(xì)胞的凋亡影響，并利用REALTIMEPCR檢測(cè)凋亡相關(guān)信號(hào)分子CASPASE3、8、9的表達(dá)，結(jié)果顯示，REV感染后的免疫細(xì)胞生長(zhǎng)活力顯著低于正

簡(jiǎn)介：密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文表達(dá)豬圓環(huán)病毒表達(dá)豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）CAP蛋白重組蛋白重組偽狂犬病病毒的構(gòu)建及其偽狂犬病病毒的構(gòu)建及其生物學(xué)特性鑒定生物學(xué)特性鑒定CONSTRUCTIONBIOLOGICALACTERIZATIONOFARECOMBINANTPSEUDABIESVIRUSEXPRESSINGCAPSIDPROTEINOFPCINECIRCOVIRUSTYPE2碩士研究碩士研究生杜文娟杜文娟文娟文娟指導(dǎo)教師劉長(zhǎng)明劉長(zhǎng)明研究員研究員劉長(zhǎng)明劉長(zhǎng)明申請(qǐng)學(xué)位類申請(qǐng)學(xué)位類別農(nóng)學(xué)農(nóng)學(xué)碩士碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)培養(yǎng)單位哈爾濱獸醫(yī)研究所哈爾濱獸醫(yī)研究所研究生院研究生院2016年6月

簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)博士后學(xué)位論文家蠶核型多角體病毒（BMNPV）LEF7基因及魚(yú)傳染性胰壞死病病毒（IPNV）VP2基因的分子生物學(xué)研究姓名王芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士后專業(yè)海洋生物學(xué)指導(dǎo)教師楊衛(wèi)軍張傳溪20060601浙江大學(xué)博士后出站報(bào)告ATG密碼子位于BMNPV基因組97014NO上游26BP、假定的翻譯起始密碼子ATG上游20BP處的ATCATTMOTIF開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。2BMNPV印鮒基因的表達(dá)PCR擴(kuò)增出1593BP的印靜基因，并分別克隆至原核表達(dá)載體PET28A和供體質(zhì)粒PFASTBACHTA中，在大腸桿菌ESCHECHIACOLDBL21和桿狀病毒BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)中分別進(jìn)行了表達(dá)。GP64基因在大腸桿菌表達(dá)量約占細(xì)菌總蛋白的10％，表達(dá)產(chǎn)物主要存在于包涵體中，將表達(dá)產(chǎn)物割膠回收后免疫家兔制備了高效價(jià)的多克隆抗體。用該抗體去檢測(cè)昆蟲(chóng)細(xì)胞中印甜基因的表達(dá)產(chǎn)物野生BMNPV感染的家蠶細(xì)胞，均產(chǎn)生與預(yù)期大小相符的特異性條帶，說(shuō)明GP64抗體具有較好的特異性，為以后進(jìn)一步利用PULLDOWN和免疫共沉淀IP技術(shù)從家蠶培養(yǎng)細(xì)胞總蛋白中分離出與BMNPVGP64囊膜糖蛋白相互作用的蛋白提供了重要的研究基礎(chǔ)。3缺失幾丁質(zhì)酶基因的BMNPVBACMID的構(gòu)建及外源基因的表達(dá)將EGFP基因、BMNPV曲“基因上游1550BP及下游1997BP的片段，依次克隆到PSK載體中，構(gòu)建缺失CHIA基因的轉(zhuǎn)移載體PEGFP△CHIA。將轉(zhuǎn)移載體PEGFPA幽以DNA和BMNPVBACMIDDNA共轉(zhuǎn)染，經(jīng)過(guò)兩輪空斑篩選，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌DHL0B菌株，經(jīng)PCR鑒定得到了EGO基因取代了CHIA基因的重組BACMID，其中曲糾基因編碼區(qū)終止密碼子上游497BP的片段被保留。將輔助質(zhì)粒PMON7124轉(zhuǎn)入含重組BACMID的DHL0B菌株中，得到了能進(jìn)行外源基因表達(dá)的缺失曲謝基因的BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)DHIOBMBAC△CHIA。在缺失和未缺失CHIA基因的BACTOBAE表達(dá)系統(tǒng)中對(duì)魚(yú)傳染性胰壞死病病毒IPNVVP2基因的抗原決定區(qū)VP2E分別進(jìn)行了表達(dá)。SDSPAGE電泳結(jié)果顯示RBMBAEVP2E和RBMBACACHIAVP2E感染家蠶細(xì)胞后與對(duì)照相比均無(wú)明顯的特異表達(dá)條帶，但用抗VP2E多克隆抗體及6HIS單克隆抗體對(duì)表達(dá)產(chǎn)物分別進(jìn)行WESTERNBLOT分析表明，在32KDA位置均出現(xiàn)一明顯條帶，比預(yù)期分子量約大了6KDA左右。證明VP2E在重組病毒RBRNBAEVP2E和RBMBAEACHIAVP2E感染的細(xì)胞中均得到了表達(dá)，且表達(dá)量無(wú)明顯的差異。RBMBAEVP2C和RBMBAE△如“VP2E感染的蛹血淋巴均能產(chǎn)生一條約32KDA左右的條帶，與細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)物大小一致，且條帶沒(méi)有明顯的差異。4IPNVVP2抗原決定區(qū)VP2E研究2

簡(jiǎn)介：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文題目地蕙莛吐癌鲞曼曼B噍旦璺L墨堡魚(yú)塑I璺YI盟基璺噬2羹凰緡縫掏丞生物堂掛睦塑窕學(xué)位申請(qǐng)人姓名霎顯蕊導(dǎo)師姓名王箍壁尉熬援整搋鼙亟究雖研究方向僉至撞趣痘理堂中圜鄭州年月致謝本論文是在王振躍副教授和張振臣研究員兩位導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)下完成的，工作中的每一點(diǎn)進(jìn)步無(wú)不凝聚著他們的極大心血，學(xué)生衷心感謝兩位導(dǎo)師三年來(lái)在各方面給予的關(guān)心、教導(dǎo)和幫助兩位導(dǎo)師嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)的工作作風(fēng)和治學(xué)態(tài)度，開(kāi)闊的知識(shí)視野和敏捷的科學(xué)思維，對(duì)事業(yè)孜孜以求的精神為我樹(shù)立了楷模，使我終生受益。在論文的選題、設(shè)計(jì)、進(jìn)行過(guò)程中，得到了河南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理教研室李洪連教授、蔣世君副教授、袁紅霞副教授、文才藝副教授、邢小平老師、孫炳劍老師、張猛老師和河南省農(nóng)科院植保所靳秀蘭老師、喬奇老師、劉紅彥老師、王永江老師、張德勝老師的大力幫助，在此表示衷心感謝。感謝河南省農(nóng)科院新品種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郅玉寶老師、陳占寬老師、易明林老師在實(shí)驗(yàn)中所提供的技術(shù)幫助。在試驗(yàn)過(guò)程中得到了中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的于嘉林教授、李大偉教授、韓成貴教授的大力幫助；原學(xué)峰博士以及該實(shí)驗(yàn)室的師兄弟姐妹給了我熱心的指導(dǎo)和幫助，對(duì)他們表示深深的感謝。師兄陳冉以及付振艷、曹云霞、高書(shū)鋒、李坤、王振軍、于巧麗、黃玉娜、劉志剛、司勝偉等同學(xué)和2002級(jí)本科生陳戰(zhàn)偉同學(xué)在實(shí)驗(yàn)中給予的大量幫助和鼓勵(lì)。本實(shí)驗(yàn)的順利完成也離不開(kāi)院領(lǐng)導(dǎo)、研究生處諸位老師的關(guān)心和支持，在此一并表示感謝。感謝我的父母和家人，他們給予我生活上的支持和幫助，正是他們的理解和鼓勵(lì)使我得以戰(zhàn)勝各種困難，順利完成學(xué)業(yè)。最后再次向所有關(guān)心、幫助和支持我的老師、同學(xué)們、家人和朋友們致以最誠(chéng)摯的謝意。

簡(jiǎn)介：廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文我國(guó)部分省區(qū)雞傳染性法氏囊病病毒分離株的分子流行病學(xué)研究姓名陽(yáng)秀英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師韋平20060501獲得的序列與其它WLBDV參考毒株DV86、UK661、OKYM、FIK46、GX、GX8／99、JS3099、SDL97、ZJ2000，CLBDV參考毒株STC，中等毒力株MB、BUR706，弱毒疫苗株B87、CUL以及變異株GLS進(jìn)行核苷酸及其推導(dǎo)的氨基酸序列差異的比較分析，并繪制其遺傳系譜樹(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，根據(jù)病毒VVP2內(nèi)關(guān)鍵位點(diǎn)氨基酸的特征可將22個(gè)分離株分為3類第1類屬于WIBDV，包括BH09、BHLL、JSL、JS7、YYL、YY6、YL051、050222、TSC29、TZ共10株；第2類屬于中等偏強(qiáng)毒力株，包括040124、YL052兩株；第3類屬于弱毒疫苗株，有020180、YLZF2、040131、BHL5、YY2、050045、050057、050258、TSC13、A038共10株；核苷酸同源性的比較發(fā)現(xiàn)，10株WLBDV分離株與日本VVLBDV毒株OKYM、中國(guó)株JS3099和歐洲VVLBDV毒株DV86的同源性高達(dá)965％～991％，而與CIBDV參考毒株STC、弱毒株和變異株GLS的核苷酸同源性分別僅有907％956％、918％943％、878％～897％；2株中等毒力分離株與B87IN、FW2512的同源性高達(dá)100％；10株屬手弱毒的分離株與弱毒疫苗株B87、CUL的同源陛高達(dá)為983％100％；繪制的遺傳系譜樹(shù)顯示，22個(gè)IBDV分離株可明顯分為2群第1群包括屬于VVLBDV的10個(gè)分離株和1株IBDV中等偏強(qiáng)毒力商品疫苗株YSLMB，與JS3099、0KYM、DV86和UK661同在一個(gè)分支上；第2群包括12個(gè)毒力中等及中等偏強(qiáng)毒株以及弱毒株，與CUL、B87、FW2512、BURSINE2則同在另一分支上；所有分離株VP2基因高變區(qū)的核苷酸及其推導(dǎo)的氨基酸缺乏時(shí)間和地域上的明顯差異。研究的結(jié)果表明，近年來(lái)我國(guó)部分省區(qū)IBDV現(xiàn)場(chǎng)流行毒株主要以VVLBDV為主，毒株間VP2基因高變區(qū)序列的同源性比較高，與歐洲、日本分離株的也較高。關(guān)鍵詞流行株RTPCR限制性內(nèi)切酶分析技術(shù)超強(qiáng)毒株經(jīng)典毒株變異株VP2基因高變區(qū)分子流行病學(xué)

簡(jiǎn)介：PCDNA5／TO轉(zhuǎn)染的COS7細(xì)胞沒(méi)有出現(xiàn)棕色，說(shuō)明沒(méi)有相應(yīng)蛋白的表達(dá)用ELISA方法檢測(cè)上述轉(zhuǎn)染細(xì)胞裂解液上清發(fā)現(xiàn)，PCDNA5／TOGAG轉(zhuǎn)染組為陽(yáng)性，而PCDNA5／TO為陰性，表明所克隆的保護(hù)性抗原基因可以在COS7細(xì)胞中表達(dá)RTPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PCDNA5／TOGAG轉(zhuǎn)染組提取細(xì)胞MRNA后，經(jīng)RTPCR擴(kuò)增后出現(xiàn)大小約800BP的目的條帶與GAG基因核心片段大小相符，而PCDNA5／TO和對(duì)照組沒(méi)有檢出相應(yīng)條帶。WESTERNBLOT檢測(cè)可見(jiàn)大小約27KU的目的條帶，與預(yù)期結(jié)果相符。結(jié)論MVV核酸疫苗PCDNA5／TOGAG可以在真核細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá)。核酸疫苗接種小鼠誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)目的將構(gòu)建的含有MVV核酸疫苗PCDNA5／TOGAG單獨(dú)或用脂質(zhì)體作為佐劑共免疫小鼠，通過(guò)評(píng)價(jià)其誘導(dǎo)的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，探討核酸疫苗的效果及脂質(zhì)體的免疫佐劑作用。方法PCDNA5／TOGAG、PCDNA5／TOGAG和脂質(zhì)體、及PCDNA5／TO分別免疫BALB／C小鼠，通過(guò)MTT比色法檢測(cè)免疫后第2、4和6周小鼠淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化值，用間接ELISA法檢測(cè)免疫小鼠血清MVV抗體產(chǎn)生水平及小鼠淋巴細(xì)胞IL4和IFNY的分泌水平。結(jié)果PCDNA5／TOGAG和脂質(zhì)體免疫組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值晟高，且PCDNA5／TOGAG單獨(dú)免疫組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值與對(duì)照組亦有顯著差異P005；通過(guò)對(duì)免疫小鼠血清的ELSA實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PCDNA5／TOGAG和脂質(zhì)體組的抗體滴度最高，而免疫組與對(duì)照組間有顯著差異PO05；通過(guò)對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞分泌的IL4和1FN|R檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PCDNA5／TOGAG和脂質(zhì)體組的小鼠淋巴細(xì)胞IL4和IFNY分泌水平高于單獨(dú)免疫組，單獨(dú)免疫組與對(duì)照組也有顯著差異P005。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建的含有MVVGAG基因的核酸疫苗免疫小鼠后可誘導(dǎo)特異性體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答，核酸疫苗具有免疫反應(yīng)性。脂質(zhì)體對(duì)MVV核酸疫苗具有明顯的免疫佐劑作用。羊IL2對(duì)MVV核酸疫苗免疫效果的影響目的構(gòu)建含有IL一2基因的真核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞確定其在真核細(xì)胞中能夠瞬時(shí)表達(dá)，與核酸疫苗PCDNA5／TOGAG兆免疫小鼠，檢測(cè)其免疫佐劑效應(yīng)。方法用PCR方法從PBV220／IL2質(zhì)粒中擴(kuò)增IL2基因，并亞克隆至真核表達(dá)載體PCDNA5／TO，構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒PCDNA5／TOIL2。PCDNA5／TOIL2轉(zhuǎn)染COS一7細(xì)胞后48小時(shí)后，用山羊IL2檢測(cè)試劑盒以ELISA方法及RTPCR方法檢測(cè)PCDNA5／TOIL2在COS7細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)情況。將重組質(zhì)粒PCDNA5／TOIL2與PCDNA5／TOGAG同時(shí)免疫BALB／C小鼠后，用MTT比色法檢測(cè)特異性淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值、ELISA方法檢測(cè)抗體滴度及淋巴細(xì)胞的IFNY和IL4的分泌水平。結(jié)果PCDNA5／TOIL2組轉(zhuǎn)染的COS7細(xì)胞裂解物上清ELISA反應(yīng)為陽(yáng)性，PCDNA5／TO組為陰性；經(jīng)RTPCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的MRNA，PCDNA5／TOIL2組有500BP的目的片段出現(xiàn)，而PCDNA5／TO組朱擴(kuò)增出該大小的片段。PCDNA5／TOIL2與PCDNA5／TOGAG聯(lián)合免疫組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值最高，且與對(duì)照組有顯著差異P005；通過(guò)對(duì)免疫小鼠血清的ELISA實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PCDNA5／TOIL2與PCDNA5／TOGAG聯(lián)合免疫組的抗體滴度較PCDNA5／TOGAG單獨(dú)免疫組略有上升，而免疫組與對(duì)照組間有顯著差異P005通過(guò)對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞分泌的IL4和1FNY檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PCDNA5／TOIL2與PCDNA5／TOGAG聯(lián)合免疫組小鼠淋巴細(xì)胞1FN叫分泌水平明顯高于其他組，而IL4水平略高于PCDNA5／TOGAG單獨(dú)免疫組，而單獨(dú)免疫組與對(duì)照組相比有顯著差異P005。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建的重組質(zhì)粒PCDNA5／TOIL2可以在COS7細(xì)胞中表達(dá)，IL2與核酸疫苗PCDNA5／TOGAG共同免疫小鼠可以刺激小鼠脾淋巴細(xì)II

簡(jiǎn)介：分類號(hào)UDC密級(jí)編號(hào)專業(yè)碩士專業(yè)碩士學(xué)位論文學(xué)位論文犬冠狀病毒和犬細(xì)小病毒混感腸炎患犬血液學(xué)及組織學(xué)研究THESTUDIESOFHEMATOLOGYHISTOLOGYINDOGSWITHCOINFECTEDCCVCPVENTERITIS2016年05月學(xué)位申學(xué)位申請(qǐng)人請(qǐng)人付曉森付曉森指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師劉鳳軍劉鳳軍副教授副教授合作教師合作教師李學(xué)伍李學(xué)伍研究員研究員專業(yè)領(lǐng)域?qū)I(yè)領(lǐng)域獸醫(yī)獸醫(yī)學(xué)位類別學(xué)位類別獸醫(yī)碩士獸醫(yī)碩士獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得河南科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的其他學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名日期關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解河南科技大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校擁有對(duì)所有學(xué)位論文的復(fù)制權(quán)、傳播權(quán)、匯編權(quán)及其它使用權(quán)（特殊情況需要保密的論文應(yīng)提前說(shuō)明，但在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定）。需要保密的論文請(qǐng)?zhí)顚?xiě)本學(xué)位論文在年月至年月期間需要保密，解密后適用本授權(quán)書(shū)。（需要保密的學(xué)位論文無(wú)須向圖書(shū)館提供論文的電子文檔）研究生簽名導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：分類號(hào)S8553單位代碼10364密級(jí)學(xué)號(hào)14720768安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文安徽地區(qū)豬場(chǎng)豬流感和甲型H1N12009流感病毒的血清學(xué)調(diào)查SEROLOGICALSURVEYOFSWINEINFLUENZA2009H1N1PEMICINFLUENZAVIRUSONPIGFARMSINANHUIAREA研究生王海洋指導(dǎo)教師孫裴副教授合作指導(dǎo)教師高亞飛申請(qǐng)學(xué)位類別獸醫(yī)碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱獸醫(yī)研究方向家畜傳染病學(xué)2016年6月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡(jiǎn)介：IIIIIIIIIIIIIILLLLLIY3292058密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文馬傳染性貧血病毒EIAVYN的全基因組分析及囊膜蛋白免疫學(xué)特性分析GENOMESEQUENCEANDENVIMMUNITYCHARACTELIIZ文TIONOFEQUINEINFECTIOUSANEMIAVIRUSEIAVVN碩士研究生；劉影指導(dǎo)教師馬建副研究員申請(qǐng)學(xué)位類別；農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向；獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)培養(yǎng)單位哈爾濱獸醫(yī)研究所中圖農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院2017年6月SECRECYCHINESEACADEMYOFNOAGRICULTURALSCIENCESDISSERTATIONGENOMESEQUENCEANDENVIMMUNITYCHARACTERIZATIONOFEQUINEINFECTIOUSANEMIAVIRUSEIAVYNMSCANDIDATELIUYINGSUPERVISORJIANMAMAJORMASTEROFPREVENTIVEVETERINARYMEDICINESPECIALTYPREVENTIVEVETERINARYMEDICINEJUNE2017

簡(jiǎn)介：IIILLLIJIIJILLJIIIY3292317密級(jí)論文編號(hào)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文偽狂犬病病毒高溫傳代毒株生物學(xué)特性改變的分子基礎(chǔ)MOLECULARBASISFORTHECHANGESOFBIOLOGICALCHARACTERISTICOFHIGHTEMPERATUREPASSAGINGPSEUDORABIESVIRUS碩士研究生武吉強(qiáng)指導(dǎo)教師李國(guó)新研究員申請(qǐng)學(xué)位類別獸醫(yī)碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱獸醫(yī)培養(yǎng)單位上海獸醫(yī)研究所研究生院2017年5月SECRECYNOCHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESDISSERTATIONMOLECULARBASISFORTHECHANGESOFBIOLOGICALCHARACTERISTICOFHIGHTEMPERATUREPASSAGINGPSEUDORABIESVIRUSMSCANDIDATEJIQIANGWUSUPERVISORPROFGUOXINLIDEGREEMASTEROFVETERINARYSCIENCESPECIALTYVETERINARYMEDICINEMAY2017