簡(jiǎn)介：中南大學(xué)博士學(xué)位論文轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1在膀胱癌中的表達(dá)及對(duì)膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名汪盛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師蔣先鎮(zhèn)20070501中南大學(xué)博十學(xué)位論文中文摘要與膀胱癌侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。結(jié)果MTALMRNA在34例膀胱癌標(biāo)本及34例癌旁正常膀胱粘膜均有不同程度的表達(dá)，34例膀胱癌中412％14／34標(biāo)本中MTAL基因過(guò)表達(dá)T／N≥2，結(jié)合臨床病理學(xué)特征發(fā)現(xiàn)MTAL過(guò)表達(dá)與膀胱癌的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)，MTAL蛋白陽(yáng)性染色主要定位在細(xì)胞核，MTAL蛋白在癌組織和癌旁組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為824％及206％，高表達(dá)率分別為412％和59％，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的BTCC組織中MTAL蛋白表達(dá)強(qiáng)度明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。MTAL蛋白高表與BTCC臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，但與病理分級(jí)無(wú)關(guān)。結(jié)論在膀胱癌及癌旁正常膀胱黏膜中均有MTAL基因表達(dá)，MTAL基因過(guò)表達(dá)與膀胱癌侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為評(píng)估膀胱癌惡性潛質(zhì)的指標(biāo)之一。第二章針對(duì)MTAI基因的SIRNA表達(dá)載體的構(gòu)建目的設(shè)計(jì)針對(duì)MTAL基因的SIRNA序列，并構(gòu)建SIRNA真核表達(dá)載體’方法利用計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)軟件，根據(jù)MTAL基因信息，設(shè)計(jì)三條針對(duì)MTAL基因編碼區(qū)的SIRNA序列，針對(duì)編碼區(qū)799817，SIRNA1序列正義鏈5’一GAACATCTACGACATCTCC一37；反義鏈5’一GGAGATGTCGTAGATCTTC一3’；11021120，SIRNA一2序歹0正義鏈57一GGATTTCACGGACATTCAG一3’反義鏈5’一CTG從一TGTCCGTGA從TCC3；20202038，SIRNA一3序列正義鏈5’一GATCCGCAAGCTGCTCTCA37；反義鏈5’TGAGAGCAGCTTGCGGATC3’。合成含有針對(duì)MTAL基因特定序列的寡核苷酸片段，并將其定向克隆入真核表達(dá)載體PRNATU61中，得到重組質(zhì)粒SHMTAII，SHMTAI2，SHMTAL3。結(jié)果利用PCR方法鑒定重組質(zhì)粒，DNA測(cè)序證實(shí)插入序列與設(shè)計(jì)的序列完全一致。‘結(jié)論成功構(gòu)建了特異性針對(duì)MTAI基因的RNA干擾表達(dá)載體。第三章RNA干擾技術(shù)抑制MTAL基因在膀胱癌細(xì)胞株中的表達(dá)目的探討RNA干擾表達(dá)載體SMALLINTERFERENCERNAII

簡(jiǎn)介：胡寶洋博卜學(xué)位論文ANZ基因表達(dá)潛及機(jī)制英文縮略詞英文縮寫(xiě)ADPASEAEC英文縮略詞表全稱(chēng)ADENOSINEDIPHOSPHATEASE3AMINO9ETHYLCARBAZOLEBFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACTOR中文名稱(chēng)腺昔二磷酸酶3氨基9乙烷基咔哇堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子骨髓基質(zhì)細(xì)胞牛血清白蛋白33‘二氨基苯聯(lián)胺DIL十八烷基四甲基AIL垛撥基花青高氯酸鹽E2ERESTFACSFITCGFPGOHRPMSCNGFOIRPBSPCRPEARISCRNAIROPBONEMARROWSTROMALCELLBOVINESERUMALBURMIN33DIAMENOBENZIDINE11DIOCTADECYL3333TETRAMETHYLINDOCARBOCYANINEPERCHLORATEESTRODIALESTROGENRECEPTOREXPRESSEDSEQUENCETAGFLUORESCENTACTIVATEDCELLFLUORESCEINISOTHIOCYANATEGREENFLURENCEINTPROTEINGENEONTOLOGYHORSERADISHPEROXIDASEMECENCYHMALSTEMCELLNERVEGROWTHFACTOROXYGENINDUCEDRETINOPATHYPHOSPHATEBUFFERSALINEPOLYMERASECHAINREACTIONPARAFORMALDEHYDERNAINDUCEDSILENCINGCOMPLEXRNAINTERFERENCERETINOPATHYOFPREMATURITYREVERSERANSCRIPTASEPOLYMERASECHAIN雌二醇雌激素受體表達(dá)序列標(biāo)簽熒光活化細(xì)胞分類(lèi)器綠色熒光素綠色熒光蛋白基因本體學(xué)辣根過(guò)氧化物酶間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)生長(zhǎng)因子氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變磷酸鹽緩沖液聚合酶鏈反應(yīng)多聚甲醛RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物RNA千擾早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病RTPCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)SHRNASIRNASOMVEGFREACTIONSMALLHAIRPINRNASMALLINTERFERINGRNASSELFORGANIZINGMAPVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR小發(fā)夾樣RNA小分子千擾RNA片段自組織分類(lèi)圖血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子胡寶洋博】學(xué)位論文OIR攀IM表達(dá)譜及IN制摘V后的BMSC培養(yǎng)上7R3對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞作用的變化。進(jìn)一步將轉(zhuǎn)染后的BMSC移植入O工R模型小鼠眼的玻璃體內(nèi)，研究其抗血管新生的機(jī)制。研究的主要結(jié)果有LADP酶法能使內(nèi)皮細(xì)胞著色，呈黑色或棕褐色。正常小鼠剛出生時(shí)，結(jié)合鋪片和切片觀察，發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜中暫無(wú)血管分布，但可見(jiàn)散在分布的ADP酶陽(yáng)性細(xì)胞。此時(shí)，在視網(wǎng)膜表面可見(jiàn)密集的玻璃體血管網(wǎng)。之后，視網(wǎng)膜血管以自中心向周邊和自?xún)?nèi)層向外層的規(guī)律逐漸發(fā)生。在血管從視網(wǎng)膜內(nèi)層向外層發(fā)生的過(guò)程中，約在P12，先從內(nèi)層向外發(fā)出較大的螺旋形血管，再進(jìn)一步形成外層血管網(wǎng)。至P18，視網(wǎng)膜血管發(fā)育基本成熟，而玻璃體血管則退化。2從P7開(kāi)始，將C57BL6J小鼠置于75的高氧環(huán)境中飼養(yǎng)5天后，至P18可見(jiàn)異常新生的血管突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜進(jìn)入玻璃體，表明小鼠OIR模型制備成功。3基因芯片雜交結(jié)果顯示，1402個(gè)基因至少一個(gè)時(shí)間點(diǎn)呈差異表達(dá)?；驑?shù)聚類(lèi)、條件聚類(lèi)將基因良好的聚為四個(gè)區(qū)兩大類(lèi)。SOM聚類(lèi)顯示12類(lèi)不同的表達(dá)差異改變模式。基因本體學(xué)GO分析顯示發(fā)育相關(guān)基因及G蛋白信號(hào)通路相關(guān)基因改變明顯。4RTPCR顯示視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞株RF6A有ERNGF及TRKA等表達(dá)。一定劑量的E2NGF均可促進(jìn)RF6A細(xì)胞的增殖及劃痕修復(fù)，且呈劑量一效應(yīng)關(guān)系。EZNGF處理的細(xì)胞有相似的凋亡率。應(yīng)用K252ANGF受體TRKA的拮抗劑既可阻斷NGF的作用，也可部分抑制E的作用。對(duì)于內(nèi)皮細(xì)胞的管腔化形成實(shí)驗(yàn)，E和NGF的作用則不一致。5免疫組化與ELISA顯示，體外培養(yǎng)的BMSC表達(dá)多種生長(zhǎng)因子，如VEGFIGF及NGF等。BMSC的培養(yǎng)上清可促進(jìn)RF6A細(xì)胞的增殖、遷移及管腔化形成。6CMDIL可有效的標(biāo)記BMSC。將標(biāo)記的BMSC注移植入OIR小鼠的玻璃體腔內(nèi)，發(fā)現(xiàn)部分BMSC可遷移至視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層，并表達(dá)GFAP。根據(jù)視網(wǎng)膜鋪片ADP酶染色觀察及連續(xù)切片視網(wǎng)膜前內(nèi)皮細(xì)胞核計(jì)數(shù)，均顯示BMSC可抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜的血管新生。7成功構(gòu)建大鼠VEGF的千擾質(zhì)粒PSUPERNEGFI，經(jīng)BLASTN檢索具有特異性。經(jīng)重組質(zhì)粒酶切、測(cè)序鑒定正確后，抽提超純質(zhì)粒轉(zhuǎn)染第5代左右的BMSC轉(zhuǎn)染效率為25。轉(zhuǎn)染后BMSC培養(yǎng)上清中的VEGF也較對(duì)照組下降相似比例。干擾VEGF的表達(dá)后，其上清對(duì)RF6A細(xì)胞的作用較對(duì)照減低。將轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的BMSC注入OIR模型小鼠的玻璃體腔內(nèi)，其作用也較未轉(zhuǎn)染制質(zhì)粒的BMSC有所下降。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)R7256R7256密級(jí)公開(kāi)密級(jí)公開(kāi)ＵＤＣＵＤＣ6166160303編號(hào)編號(hào)2011213044碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文人羊膜細(xì)胞生物學(xué)特性及人羊膜上皮細(xì)胞對(duì)高氧所致肺損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究研究生甘文婷導(dǎo)師孫新教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別醫(yī)學(xué)碩士年級(jí)二零一一級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)兒科學(xué)研究方向造血干細(xì)胞移植論文提交日期二0一四年四月論文答辯日期二0一四年五月學(xué)位類(lèi)型專(zhuān)業(yè)型學(xué)位授予單位廣州醫(yī)科大學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席評(píng)議人人二零一四年五月目錄縮略詞表縮略詞表1中文摘要中文摘要2英文摘要英文摘要4前言7第一部分第一部分人羊膜細(xì)胞人羊膜細(xì)胞生物學(xué)特性生物學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)研究的實(shí)驗(yàn)研究9材料和方法材料和方法9結(jié)果結(jié)果15討論討論20第二部分第二部分人羊膜上皮細(xì)胞對(duì)高氧所致肺損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究人羊膜上皮細(xì)胞對(duì)高氧所致肺損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究23材料與方法材料與方法23結(jié)果結(jié)果29討論35全文總結(jié)全文總結(jié)40參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)41附圖47綜述52攻讀學(xué)位期間取得的研究成果攻讀學(xué)位期間取得的研究成果60致謝61

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文三維培養(yǎng)條件下大鼠三維培養(yǎng)條件下大鼠成釉器成釉器細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)生物學(xué)特性特性的研究的研究研究生李萍學(xué)科專(zhuān)業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（口腔內(nèi)科）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院牙體病科導(dǎo)師吳補(bǔ)領(lǐng)教授主任醫(yī)師王常勇研究員輔導(dǎo)教師余擎副教授副主任醫(yī)師資助基金項(xiàng)資助基金項(xiàng)關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞大鼠、三維立體培養(yǎng)、旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)、成釉細(xì)胞分化、細(xì)胞生物學(xué)行為、原代細(xì)胞培養(yǎng)中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2008年05月第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文1縮略語(yǔ)表縮略語(yǔ)表縮略詞縮略詞英文全稱(chēng)英文全稱(chēng)中文全稱(chēng)中文全稱(chēng)ALPALKALINEPHOSPHATASE堿性磷酸酶AMBNAMELOBLASTIN成釉蛋白AMELAMELOGENIN釉原蛋白AOACRIDINEANGE吖啶橙BMPBONEMPHOGEICPROTEINCELLS骨形成蛋白BPBASEPAIR堿基對(duì)CDNACOMPLEMENTARYDNA互補(bǔ)DNACK14CYTOKERATIN14角蛋白14DEPCDIETHYLPYROCARBONATE焦碳酸二乙酯DMEMF12DULBECCOMODIFIEDEAGLEMEDIUMNUTRIENTMIXTUREF12DMEMF12培養(yǎng)基DNTPDEOXYNUCLEOSIDETRIPHOSPHATE脫氧三核苷酸DSPPDENTINESIALOPHOSPHOPROTEIN牙本質(zhì)涎磷蛋白ECMEXTRACELLULARMATRIX細(xì)胞外基質(zhì)EDTAETHYLENEDIAMINETETRACETICACID乙二胺四乙酸二鈉ENENAMELIN釉蛋白EOEENAMELGANEPITHELIUM成釉器上皮細(xì)胞FBSFETALCALFSERUM胎牛血清HEHEMATOXYLINEOSINSTAINING蘇木素伊紅染色MRNAMESSENGERRIBONUCLEICACID信使核糖核酸PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液RCCSROTARYCELLCULTURESYSTEM旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)RTPCRREVERSTRANSPLANTPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)TGFΒTRANSFMINGGROWTHFACTΒ轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Β

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文SURVIVIN基因在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及SURVIVIN反義寡核苷酸對(duì)786O細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名高曉康申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)（泌尿外科）指導(dǎo)教師邵國(guó)興20050501第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文縮略語(yǔ)AKT／PKBANGIASODNBFGFBIRCDKCDNACHRDABDEPCDMSOEDTAEGFEPIEPR．1FCMIAPKBKDMDRMTTPBS縮略語(yǔ)表英文全稱(chēng)PROTEINKINASEBANGIOPOIETIN1ANTISENSEOLIGONUCLEOTIDEFIBROBLASTGROWTHFACTORBACULOVIRUSLAPREPEATCYELINDEPENDENTKINASECOMPLEMENTARYDEOXYRIBONUCLEICACIDCELLCYCLEGENESHOMOLOGYREGION．DIAMINOBENZIDINEDIETHYLPYROCARBONATEDIMATHYLSULFOXIDEETHYLENEDIAMINETETRAACETICAEIDEPIDERMALGROWTHFACTOREPIRUBICINEFFECTORCELLPROTEASERECEPTORLFLOWCYTOMETRYINHIBITOROFAPOPTOSISPROTEINKILOB船EKILODALTONMULTIDRUGRESISTANCE3一4，5DIMETHYLTHIAZOL一2一Y1一2，PHOSPHATEBUFFEREDSALINE中文全稱(chēng)蛋白激酶B血管形成素．1反義寡核苷酸堿性纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子桿狀病毒IAP重復(fù)區(qū)序列細(xì)胞周期依賴(lài)性蛋白激酶互補(bǔ)脫氧核糖核酸細(xì)胞周期調(diào)控基因同源區(qū)二氨基聯(lián)苯胺焦碳酸乙二脂二甲基亞砜乙二胺四乙酸表皮生長(zhǎng)因子表阿霉素效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體．1流式細(xì)胞術(shù)凋亡抑制蛋白千堿基對(duì)千道爾頓多藥耐藥噻唑藍(lán)磷酸鹽緩沖液

簡(jiǎn)介：Y7626S9分類(lèi)號(hào)R7302碩士研究生學(xué)位論文單位代碼11904學(xué)號(hào)20022004溴化乙錠誘導(dǎo)無(wú)線(xiàn)粒體DNA乳腺癌T47D細(xì)胞系的建立及其細(xì)胞生物學(xué)特征和超微結(jié)構(gòu)的改變甜1EEFFECTSOFETHIDIUMBROMIDEINDUCEDLOSSOFMITOEHONDRIALDNAOLLCEUULARFUNCTIONANDULTRASTRUCTUREINHUMANBREASTCANCERCELLLINET47D專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究生于滿(mǎn)導(dǎo)師牛瑞芳研究員天津醫(yī)科大學(xué)二零零五年五月并不能大幅度引起細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生。透視電鏡檢測(cè)還發(fā)現(xiàn)，T47DPO細(xì)胞的線(xiàn)粒體超微結(jié)構(gòu)有明顯變化，主要表現(xiàn)為正常嵴及內(nèi)外膜結(jié)構(gòu)部分或大范圍的溶解，線(xiàn)粒體自身的腫脹或髓磷體樣改變以及基質(zhì)的電子密度提高。此外，T47DPO細(xì)胞還具有體內(nèi)成瘤性，經(jīng)皮下接種SCID小鼠后可以成瘤，但與對(duì)照組相比，在生長(zhǎng)速度、潛伏期均滯后，體外成瘤的體積和重量更小。總之，各種致癌因素既然能有效地作用于MTDNA，引起與腫瘤相關(guān)的遺傳結(jié)構(gòu)的改變，其在腫瘤研究中的生物學(xué)意義就應(yīng)該得到重視。本次實(shí)驗(yàn)成功地建立了MTDNA缺失的乳腺癌T47DPO細(xì)胞株，并證明MTDNA的缺失會(huì)對(duì)細(xì)胞的體內(nèi)、外的生長(zhǎng)特性，細(xì)胞周期和超微結(jié)構(gòu)等方面產(chǎn)生影響。該細(xì)胞系的存在為進(jìn)一步研究MTDNA缺失對(duì)細(xì)胞生化代謝、能量代謝和電子傳遞等的影響提供了便利，并為最終建立轉(zhuǎn)線(xiàn)粒體細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線(xiàn)粒體小鼠模型，進(jìn)而分析線(xiàn)粒體相關(guān)的遺傳性疾病的病岡學(xué)機(jī)制奠定了?定的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。2

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)學(xué)位論文葡萄籽提取物對(duì)人骨肉瘤葡萄籽提取物對(duì)人骨肉瘤U2OSU2OS細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)行為的影響生物學(xué)行為的影響THEEFFECTSOFGRAPESEEDEXTRACTONBIOLOGICALBEHAVISOFHUMANOSTEOSARCOMAU2OSCELLS張慶指導(dǎo)教師姓名尹宗生教授安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)外科學(xué)骨外提交論文日期20140315論文答辯日期20140510學(xué)位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學(xué)答辯委員會(huì)主席魏偉評(píng)閱人雙盲評(píng)閱2014年5月18日學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門(mén)或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期日期

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)R6557密級(jí)學(xué)位類(lèi)別科學(xué)學(xué)位口專(zhuān)業(yè)學(xué)位團(tuán)學(xué)校代碼10062學(xué)號(hào)2011602298學(xué)科門(mén)類(lèi)醫(yī)學(xué)又坪魯斜袁號(hào)碩士學(xué)位論文論文題目人胸腺瘤細(xì)胞系THY0517的生物學(xué)特征TITLECHARACTERIZATIONOFAHUMANTHYMOMACELLLINE一級(jí)學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科外科學(xué)胸心外科論文作者郭峰指導(dǎo)教師張鵬教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要胸腺瘤THYMOMA是前縱隔最常見(jiàn)的原發(fā)性腫瘤，起源于胸腺上皮細(xì)胞，生長(zhǎng)較緩慢，其發(fā)病率約占成人縱隔腫瘤的20％，占前縱隔腫瘤的50％，人群的總發(fā)病率為015／100，000，其病因?qū)W尚不十分明確，且生物學(xué)行為復(fù)雜。深入研究胸腺瘤，揭示其發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制將不僅為胸腺瘤的早期診斷提供特異性生物學(xué)標(biāo)志，亦將為治療開(kāi)辟新的途徑，最終達(dá)到提高胸腺瘤病人生存率的目的。深J入研究胸腺瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制不能直接在人體內(nèi)進(jìn)行，而胸腺瘤細(xì)胞系是胸腺瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移分子機(jī)制研究的重要實(shí)驗(yàn)材料，其應(yīng)用使離體研究胸腺瘤細(xì)胞的特征、解析癌變機(jī)制成為可能，因此我們需要對(duì)已建立的胸腺瘤細(xì)胞系進(jìn)行其特性研究，為進(jìn)一步研究胸腺瘤發(fā)病機(jī)制提供良好的實(shí)驗(yàn)材料。目的通趕實(shí)驗(yàn)研究，分析已建立的人胸腺瘤細(xì)胞系THY0517的生物學(xué)特性，為胸腺瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制和新的臨床治療途徑研究提供良好的實(shí)驗(yàn)材料。方法手術(shù)切除患者胸腺及胸腺瘤組織，從切除的胸腺瘤中取腫瘤組織采用組織塊貼壁法進(jìn)行培養(yǎng)；采用機(jī)械刮除和酶消化兩種方法進(jìn)行上皮細(xì)胞的純化；分離瘤細(xì)胞進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)；胰酶消化法傳代培養(yǎng)細(xì)胞；采用慢凍和快融方法進(jìn)行細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇；相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)；采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)；裸鼠皮下接種培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞懸液觀察裸鼠致瘤情況；免疫組化法測(cè)定細(xì)胞系分子標(biāo)志物CK7、CK8、CKL9、EGFR、EMA、CD20、CD99、TDT、KI67、P63的表達(dá)情況及常規(guī)制備染色體標(biāo)本分析核型。結(jié)果經(jīng)組織塊貼壁法體外培養(yǎng)，機(jī)械刮除和酶消化法純化獲得了胸腺瘤原代細(xì)胞，已在體外持續(xù)培養(yǎng)1年，傳至120代，傳代時(shí)間為23天，培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)良好；細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞核大，核漿比例倒置，核仁清晰，核仁增大增多，可見(jiàn)巨核、雙核或多核細(xì)胞；細(xì)胞呈鋪路石樣生長(zhǎng)，長(zhǎng)滿(mǎn)瓶底后有重疊和堆積生長(zhǎng)現(xiàn)象，【無(wú)接觸抑制；細(xì)胞生長(zhǎng)經(jīng)過(guò)潛伏期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期及平臺(tái)期，群體倍增時(shí)間為37小時(shí)；細(xì)胞經(jīng)反復(fù)慢凍和快融的凍存與復(fù)蘇后生長(zhǎng)穩(wěn)定，凍存復(fù)蘇后

簡(jiǎn)介：背景最近研究發(fā)現(xiàn)AOPP可能與動(dòng)脈粥樣硬化AS的發(fā)生有關(guān)動(dòng)脈粥樣硬化患者血漿AOPP水平明顯高于正常人血液透析的CRF病人頸動(dòng)脈內(nèi)膜厚度與血漿AOPP水平呈正相關(guān)靜脈反復(fù)注射AOPP可加速喂高膽固醇飼料兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成上述研究提示AOPP可能參與了AS的形成但其機(jī)制目前還不清楚該文旨在研究AOPP對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響及其機(jī)制以探討AOPP參與AS發(fā)生的可能機(jī)制方法我們以?xún)?nèi)皮細(xì)胞株HUECV304為靶細(xì)胞觀察AOPPBSA對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞ROS生成和細(xì)胞活性的影響一、無(wú)內(nèi)毒素AOPPBSA的制備AOPPBSA的制備采用WITKOSARSAT等介紹的方法將無(wú)內(nèi)毒素BSA溶液與次氯酸HOCL分別以170和1140的摩爾比混合室溫放置30MIN制備出兩種氧化修飾程度不同的AOPPBSA170、1140制備的AOPPBSA在4℃無(wú)菌PBS中透析以除去游離次氯酸AOPP含量測(cè)定以氯胺T為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)定酸性條件下340NM的吸光度值制備的所有AOPPBSA經(jīng)鱟試驗(yàn)法測(cè)定內(nèi)毒素二、細(xì)胞內(nèi)要ROS生成量的測(cè)定1、定性觀察將細(xì)胞接種于鋪有蓋玻片的24孔板并用對(duì)ROS敏感的熒光探針27二氫二氯熒光素DCFH標(biāo)記分別與兩種氧化修飾程度的AOPPBSA170、1140孵育同時(shí)設(shè)PBS和BSA細(xì)胞對(duì)照1H后固定細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察照像2、定量測(cè)定用DCFH標(biāo)記細(xì)胞將標(biāo)記細(xì)胞以2105孔加入96孔板與不同濃度和不同氧化修飾程度的AOPPBSA作用不同時(shí)間用VICTWALLAC1420多標(biāo)記分析系統(tǒng)美國(guó)PE公司在激發(fā)光485±10NM、發(fā)射光535±10NM37℃條件下動(dòng)態(tài)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)氧化DCFH產(chǎn)生的熒光量的變化以此反映ROS的產(chǎn)生量3、抗氧化劑對(duì)AOPPBSA作用的影響抗氧化劑PDTC20ΜMOLL、硒谷胱甘肽過(guò)氧化物酶小分子模擬物EBSELEN1ΜMOLL、5ΜMOLL、NADPH氧化酶抑制劑APOCYNIN500ΜMOLL及NOS抑制劑NWNITROLARGININELNNA5ΜMOLL預(yù)孵育1HDCFH標(biāo)記細(xì)胞然后用BSAHOCL摩爾比為1140的AOPPBSA400ΜGML刺激細(xì)胞1H測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生量觀察其對(duì)AOPPBSA誘導(dǎo)ROS產(chǎn)生的影響三、AOPP對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性影響的測(cè)定1、AOPP對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響的測(cè)定將細(xì)胞按1104孔接種于96孔板貼壁后在無(wú)血清培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)12H以達(dá)到同步與不同濃度或不同氧化修飾程度的AOPPBSA共同培養(yǎng)24H用MTT法測(cè)定細(xì)胞活性以PBS代替AOPP作為刺激劑培養(yǎng)的對(duì)照細(xì)胞活性為100％計(jì)算AOPPBSA作用下細(xì)胞活性的百分率2、抗氧化劑對(duì)AOPPBSA作用的影響將細(xì)胞與EBSELEN預(yù)孵育1H然后再用AOPPBSA1140、800ΜGML刺激24H用MTT法測(cè)定細(xì)胞活性觀察EBSELEN對(duì)細(xì)胞活性降低的影響四、統(tǒng)計(jì)方法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示采用SPSS100統(tǒng)計(jì)軟件中的重復(fù)測(cè)量REPEATEDMEASURES、隨機(jī)方差分析ONEWAYANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)論1、AOPPBSA使內(nèi)皮細(xì)胞ROS生成增加激活NADPH氧化酶、NOS可能是其機(jī)制之一而抗氧化劑可有效清除AOPPBSA生成的ROS2、AOPPBSA通過(guò)氧化應(yīng)激引起血管內(nèi)皮細(xì)胞活性下降

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文脫氫表雄酮對(duì)子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名羅曼申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師滕銀成20080501上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文V國(guó)家自然基金（30801230）和蛋白含量，但對(duì)ERΑ、PAX2沒(méi)有明顯影響；2DHEA可抑制子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的增殖，并可以增加子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞由ETOPOSIDE誘發(fā)的凋亡。關(guān)鍵詞脫氫表雄酮子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞激素補(bǔ)充療法雌激素受體Α雌激素受體ΒPAX2凋亡增殖

簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的鑒定及其生物學(xué)特性的研究姓名沈方申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師劉偉國(guó)20080515浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文達(dá)；利用單細(xì)胞克隆培養(yǎng)的方法檢測(cè)孵育后C6細(xì)胞的自我更新與無(wú)限增殖能力。結(jié)果1C6細(xì)胞系中有60％的細(xì)胞能在無(wú)血清培養(yǎng)基中形成懸浮腫瘤克隆球；腫瘤克隆球細(xì)胞中，80％的單細(xì)胞克隆具有自我更新能力能在血清誘導(dǎo)下產(chǎn)生表達(dá)神經(jīng)元與膠質(zhì)細(xì)胞分化標(biāo)記的子代腫瘤細(xì)胞，并且含血清培養(yǎng)基中的貼壁C6細(xì)胞具有共表達(dá)CDL33與GFAP／NSE的現(xiàn)象，而在無(wú)血清培養(yǎng)基中的克隆球中該現(xiàn)象很少見(jiàn)在裸鼠皮下種植后則顯示出連續(xù)致瘤性。2無(wú)血清中形成的C6懸浮腫瘤克隆球被轉(zhuǎn)移到血清培養(yǎng)基后，能夠再次貼壁生長(zhǎng)，而隨后的血清／無(wú)血清交替培養(yǎng)并不影響C6系中能夠在無(wú)血清培養(yǎng)基中形成懸浮腫瘤克隆球的細(xì)胞比例流式細(xì)胞儀與免疫組織化學(xué)顯示血清培養(yǎng)基中貼壁C6細(xì)胞的CDL33陽(yáng)性率為30％左右，而在無(wú)血清克隆球中該比例上升到85％。3CDL33陽(yáng)性與陰性C6細(xì)胞中均含有腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞，但是前者在細(xì)胞增殖能力與致瘤速度等方面顯著強(qiáng)于后者，而且兩者的克隆球生長(zhǎng)方式也存在差異。4長(zhǎng)時(shí)間HOECLLST33342染色對(duì)于大部分C6細(xì)胞具有毒性作用，使其喪失自我更新能力等CSC特性但是同時(shí)也發(fā)現(xiàn)存在L％左右的HOECHST33342陰性、ABCG2陽(yáng)性的側(cè)群細(xì)胞，其仍然保留有CSC的特征。結(jié)論1大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中存在腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞，具有與人類(lèi)原發(fā)腦腫瘤中BTSC相似的生物學(xué)特點(diǎn)。2利用無(wú)血清懸浮克隆球培養(yǎng)方法所發(fā)現(xiàn)的C6細(xì)胞中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的比例遠(yuǎn)高于依賴(lài)CDL33作為CSC表面標(biāo)記的鑒定方法60％W30％，而且CDL33陰性亞群中同樣存在腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞；H|0ECLLST33342的毒性會(huì)使無(wú)法排出HOECHST33342的非側(cè)群細(xì)胞喪失CSC的特性。3雖然今后仍然需要努力尋找到一種更為全面而可靠的BTSC鑒定方法，但是考慮到C6系中大部分細(xì)胞符合目前對(duì)CSC的定義，因此其仍不失為一種用來(lái)研究BTSC的經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便的體外腫瘤模型。關(guān)鍵詞大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系腦腫瘤干細(xì)胞；懸浮腫瘤克隆球CDL33；側(cè)群細(xì)胞‘一LL

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)R392密級(jí)單位代碼學(xué)號(hào)10422201013107⑧∥菇辦孚碩士學(xué)位論文論文題目腫瘤相關(guān)基因TIPE及CUL4A在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及生物學(xué)作用研究THEINVOLVEMENTOFTIPEANDCUL4AINTHEDEVELOPMENTOFHEPATOCELLULARCARINOMAANDTHEBIOLOGICALFUNCTIONS作者姓名學(xué)院名稱(chēng)專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)指導(dǎo)教師潘英芳醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)梁曉紅副教授2013年5月12日目錄第一部分TIPE在肝細(xì)胞肝癌發(fā)生中的生物學(xué)作用及分子機(jī)制的研究中文摘要1英文摘要7符號(hào)說(shuō)明13第一章前言此部分含文獻(xiàn)綜述15第二章材料19第三章方法24第四章結(jié)果33第五章討論此部分含文獻(xiàn)綜述44第二部分CUL4A在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及其生物學(xué)作用研究中文摘要48英文摘要52第一章前言此部分含文獻(xiàn)綜述56第二章材料59第三章方法61第四章結(jié)果64第五章討論70參考文獻(xiàn)72致謝76攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄和成果78

簡(jiǎn)介：安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文以兔淺層角膜基質(zhì)為載體體外培養(yǎng)角膜緣上皮細(xì)胞深低溫保存后生物學(xué)活性研究姓名沈培清申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)眼科學(xué)指導(dǎo)教師廖榮豐朱美玲20080501學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文使用授權(quán)聲明彬、R，B本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門(mén)或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版，有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱，有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者馘弛∥以日期礦形’莎汐導(dǎo)師簽名日期、1琢衩I

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文第二部分重組CH50多肽的表達(dá)對(duì)膀胱癌細(xì)胞系BIU87的生物學(xué)影響摘要目的研究PCH510質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞系BIU87后，重組CH50多肽的表達(dá)對(duì)BIU一87細(xì)胞粘附性、侵襲性等生物屬性的影響。方法以體外轉(zhuǎn)染72H后的BIU一87細(xì)胞為檢測(cè)細(xì)胞，以BIU一87細(xì)胞為靶細(xì)胞，采用VLODAVSKY機(jī)械法觀察轉(zhuǎn)染的細(xì)胞黏附性的變化，未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作對(duì)照，比較二者的黏附細(xì)胞百分比。采用CELLINVASIONASSAYKIT系統(tǒng)模擬基底膜，以穿過(guò)人工基底膜的細(xì)胞數(shù)量來(lái)評(píng)估轉(zhuǎn)染72H后的BIU一87細(xì)胞的侵襲能力，設(shè)未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞為對(duì)照，兩種細(xì)胞在侵襲小室孵育24H、48H和72H后穿過(guò)人工基底膜的數(shù)目進(jìn)行比較。結(jié)果VLODAVSKY方法觀察兩組細(xì)胞黏附性的比較上，除了10分鐘的2組比較無(wú)差異外，其余各組的細(xì)胞黏附百分比兩兩比較均有差異性PO05，且隨著接觸時(shí)間的延長(zhǎng)差異性更明顯PO01。CELLINVASIONASSAYKIT系統(tǒng)評(píng)估細(xì)胞的侵襲能力上，轉(zhuǎn)染的BIU87細(xì)胞比未轉(zhuǎn)染的均明顯下降PO05。結(jié)論P(yáng)CH510質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞系BIU一87，由于細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)CH50多肽，增加了膀胱癌細(xì)胞BIU一87的黏附屬性，進(jìn)而抑制其侵襲能力，為臨床上治療膀胱癌提供了新的途徑。關(guān)鍵詞重組CH50多肽；膀胱癌細(xì)胞系犁U一87；轉(zhuǎn)攀；黏附性；侵襲性2

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文MIR21在胃癌中的細(xì)胞生物學(xué)作用姓名張磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師燕敏20090401上海交通大學(xué)碩士學(xué)位畢業(yè)論文結(jié)果定量REALTIMEPCR檢測(cè)腫瘤組織及其周?chē)＝M織MIRNA21表達(dá)結(jié)果顯示MIR21在胃癌組織中高表達(dá)，腫瘤組織中MIRNA21表達(dá)高于其正常組織者有20例，表達(dá)量相仿或低于其正常組織者10例，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜001）。腫瘤組織中MIR21表達(dá)量同胃癌分化程度相關(guān)（P0004），與年齡、性別、BORRMANN分型、部位及TNM分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)P0．05。過(guò)表達(dá)MIR21后BGC823細(xì)胞增殖能力提高，與NEGATIVE組和CONTROL組對(duì)比差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。過(guò)表達(dá)MIR21后BGC823細(xì)胞在創(chuàng)傷愈合模型中愈合速度較其他兩組快。結(jié)論MIR21在胃癌中高表達(dá)，其表達(dá)量同胃癌分化程度相關(guān)。過(guò)表達(dá)MIR21可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞BGC823增殖能力和遷移能力,而對(duì)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期無(wú)影響。關(guān)鍵詞胃癌；MIR21；增殖；遷移