miR-21在胃癌中的細(xì)胞生物學(xué)作用.pdf

1、背景與目的：胃癌是目前世界上死亡率位列第二的惡性腫瘤，在我國(guó)仍居消化道惡性腫瘤發(fā)病率的首位。目前胃癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制還不清楚，以往的研究主要基于癌基因和抑癌基因在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，但癌基因和抑癌基因受到多種因素調(diào)控，表觀遺傳調(diào)控是重要調(diào)控機(jī)制之一。微小RNA(miRNA）是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一類小分子非編碼RNA，作為生物體內(nèi)源性的小RNA 分子，在生物體內(nèi)不僅僅是代謝產(chǎn)物，更是機(jī)體內(nèi)特異性的重要調(diào)控分子。它們參與了生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老

2、、死亡等各個(gè)生物過(guò)程的調(diào)控，最近的研究發(fā)現(xiàn)它們?cè)谀[瘤的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著重要的作用。在人體多種腫瘤中都存在著miRNA的差異表達(dá)，它們通過(guò)調(diào)節(jié)下游靶基因的表達(dá)，或促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展，或抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展。在這些差異表達(dá)的miRNA中，miR-21 是較為特殊的一個(gè)，它在幾乎所有實(shí)體腫瘤中都高表達(dá)，而且這些高表達(dá)的miR-21 大都發(fā)揮類似原癌基因的作用，通過(guò)調(diào)節(jié)抑癌基因或與分化，凋亡相關(guān)的基因而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。因此，本研究從miR-21

3、 與胃癌的關(guān)系入手，檢測(cè)其在胃癌中的表達(dá)情況并分析其與臨床病理特征之間的相關(guān)性，進(jìn)一步研究miR-21 對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為（增殖，凋亡，侵襲）的影響。 方法：定量real-time PCR 檢測(cè)胃癌病人腫瘤組織及其正常組織中miR-21 表達(dá)情況；胃癌細(xì)胞株BGC-823轉(zhuǎn)染miR-21 前體（pre-miR-21）使其過(guò)表達(dá)miR-21，通過(guò)CCK8法檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-21 對(duì)胃癌細(xì)胞BGC-823 增殖能力的影響；通過(guò)流式

4、細(xì)胞儀檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-21 對(duì)胃癌細(xì)胞BGC-823 凋亡和細(xì)胞周期的影響；通過(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-21 對(duì)胃癌細(xì)胞BGC-823 遷移能力的影響。 結(jié)果：定量real-time PCR 檢測(cè)腫瘤組織及其周圍正常組織miRNA-21 表達(dá)結(jié)果顯示miR-21 在胃癌組織中高表達(dá)，腫瘤組織中miRNA-21 表達(dá)高于其正常組織者有20例，表達(dá)量相仿或低于其正常組織者10例，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腫瘤組織中miR-21 表達(dá)

5、量同胃癌分化程度相關(guān)，與年齡、性別、Borrmann 分型、部位及TNM 分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。過(guò)表達(dá)miR-21后BGC-823細(xì)胞增殖能力提高，與Negative組和Control組對(duì)比差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義流式細(xì)胞儀檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-21后對(duì)BGC-823細(xì)胞凋亡及周期沒(méi)有影響。過(guò)表達(dá)miR-21后BGC-823細(xì)胞在創(chuàng)傷愈合模型中愈合速度較其他兩組快。 結(jié)論：miR-21 在胃癌中高表達(dá)，其表達(dá)量同胃癌分化程度相關(guān)。過(guò)表達(dá)mi