串聯(lián)黃色熒光蛋白在大鼠神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá).pdf

1、神經(jīng)連接組學(xué)是一門新興學(xué)科,是研究和繪制出大腦神經(jīng)細(xì)胞連接(即突觸)的圖譜。神經(jīng)連接組學(xué)要解決的首要問題是神經(jīng)細(xì)胞的高亮度和高精度標(biāo)記,以致于成像設(shè)備能采集到樹突棘和軸突末梢。本課題組探索神經(jīng)細(xì)胞的分子標(biāo)記技術(shù)。為了實(shí)現(xiàn)高亮度標(biāo)記,構(gòu)建了多種串聯(lián)黃色熒光蛋白質(zhì)粒;為了實(shí)現(xiàn)標(biāo)記樹突棘,構(gòu)建了帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒。作者將在培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞中鑒定這些質(zhì)粒是否能實(shí)現(xiàn)目的。
　　人們已經(jīng)建立了胎鼠神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法,作者獲得了多種黃

2、色熒光蛋白質(zhì)粒和帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒。課題的目的是觀察多種熒光蛋白質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá),帶有定位序列的熒光蛋白質(zhì)粒在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)探索是否熒光蛋白的亮度提高,是否熒光蛋白在神經(jīng)纖維中表達(dá)。通過查閱文獻(xiàn)和練習(xí),借鑒本實(shí)驗(yàn)室胎鼠神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法,掌握了神經(jīng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法,培養(yǎng)了神經(jīng)細(xì)胞,獲得了生長(zhǎng)狀態(tài)良好的神經(jīng)細(xì)胞。通過查閱文獻(xiàn),采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染神經(jīng)細(xì)胞的方法,轉(zhuǎn)染了Hela細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞,使用熒光顯微鏡觀察熒光蛋白表