底棲硅藻誘導(dǎo)仿刺參(Apostichopus japonicus)幼體附著變態(tài)的初步研究.pdf

1、仿刺參的苗種生產(chǎn)中幼體附著變態(tài)率低以及滑板癥等問題都制約了仿刺參養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,因此提高仿刺參育苗的效率是促進(jìn)仿刺參養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。而底棲硅藻含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中可以作為鮑魚、海參、海膽等名貴海洋經(jīng)濟(jì)浮游幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)物,以及附著后幼體生長(zhǎng)所必需的餌料。因此,底棲硅藻的質(zhì)量與密度是海產(chǎn)底棲經(jīng)濟(jì)動(dòng)物育苗成功的關(guān)鍵因素之一,也影響苗種的生長(zhǎng)速率與存活率。然而目前關(guān)于底棲硅藻誘導(dǎo)對(duì)仿刺參—幼體附著變態(tài)影響的報(bào)道較

2、少。
　　本實(shí)驗(yàn)從自然海區(qū)和海參養(yǎng)殖池中分離篩選具有強(qiáng)附著力的底棲硅藻,并鑒定種類和分析生長(zhǎng)規(guī)律。利用單種底棲硅藻附著形成不同密度梯度的底棲硅藻附著基,用于誘導(dǎo)仿刺參幼體的附著變態(tài),通過附著變態(tài)率分析不同底棲硅藻對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果,同時(shí)探討了混合底棲硅藻、底棲硅藻與細(xì)菌混合形成的附著基對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果。最終篩選出具有高誘導(dǎo)活性的底棲硅藻種類,以及分析不同混合方式對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的協(xié)同誘導(dǎo)效果。主要研究

3、結(jié)果如下:
　　1.底棲硅藻的分離與純化
　　本實(shí)驗(yàn)通過單細(xì)胞分離法等方法,共篩選得到底棲硅藻100余株,為12個(gè)種類。利用其中9種底棲硅藻進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并鑒定出其中7種底棲硅藻的種類,分別是:Nitzschia sp.、:Bacillariophyta sp.1、.Bacillariophyta sp.2、Bacillariophyta Sp.3、Bacillariophyta sp.4、Bacillariophyta sp.

4、5、Bacillariophytasp.6。
　　2.9種底棲硅藻誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的效果
　　利用9種底棲硅藻誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài),結(jié)果表明:在幼體移入72小時(shí)后,Nitzschia sp.等4種底棲硅藻附著基的誘導(dǎo)效果明顯優(yōu)于空白組,Bacillariophyta sp.2等2種底棲硅藻附著基誘導(dǎo)效果不明顯,Bacillariophytaspa等3種附著基誘導(dǎo)效果低于空白組。其中,誘導(dǎo)效果最好的底棲硅藻種類是Nit

5、zschia sp.,在其細(xì)胞密度為(3.40±0.60)×103、(9.41±1.36)×104與(2.25±0.06)×105cells/cm2時(shí),幼體附著變態(tài)率分別達(dá)到56.67±5.77％、85±12.91％與67.5±17.08％,顯著高于空白組13.33±5.77％(P＜0.05)。多數(shù)情況下,隨著底棲硅藻的密度增加,幼體的附著變態(tài)率提高,但部分實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)下降趨勢(shì),提示誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)時(shí),底棲硅藻的密度存在一定的適宜范

6、圍。
　　3.底棲硅藻混合誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的效果
　　根據(jù)單種底棲硅藻誘導(dǎo)附著變態(tài)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,將篩選得到的高誘導(dǎo)活性底棲硅藻Nitzschia sp.與BaciUariophyta sp.、低誘導(dǎo)活性底棲硅藻Bacillariophytasp.4與WH14分別按比例混合制成附著基,誘導(dǎo)仿刺參幼體的附著變態(tài),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在幼體移入72小時(shí)后,混合底棲硅藻附著基的誘導(dǎo)效果受硅藻種類與密度影響而有所差異。其中細(xì)胞密度分別在(

7、1.41±0.13)×105與(1.24±0.18)×105 Cell/cm3條件下的底棲硅藻Nitzschia sp.與Bacillariophytasp.1混合,其幼體附著變態(tài)率可由單種底棲硅藻誘導(dǎo)的67.5±17.08％與40.00±20.00％上升到86.67±5.77％,協(xié)同誘導(dǎo)效果不明顯;而低誘導(dǎo)活性的底棲硅藻混合后,其協(xié)同誘導(dǎo)效果明顯(P＜0.05),提示低誘導(dǎo)活性底棲硅藻間混合時(shí),由于細(xì)胞密度增加等原因可顯著提高附著變態(tài)

8、率,具有顯著的協(xié)同效果。
　　4.底棲硅藻、細(xì)菌混合誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)效果
　　根據(jù)單種底棲硅藻誘導(dǎo)附著變態(tài)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分別將有高誘導(dǎo)活性底棲硅藻Bacillariophyta sp.1、低誘導(dǎo)活性Bacillariophyta sp.4.與具有高誘導(dǎo)活性的細(xì)菌Pseudoalteromonas Sp.混合制成附著基,誘導(dǎo)幼體附著變態(tài),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在幼體移入72小時(shí)后,混合底棲硅藻、細(xì)菌混合附著基的誘導(dǎo)效果同樣因底棲硅藻

9、和活性細(xì)菌的種類和密度不同而有所差異,其中在細(xì)胞密度為(2.71±0.49)×105 cell/cm2和(5.39±0.53)×106 cell/cm2條件下的底棲硅藻Bacillariophyta sp.4與活性細(xì)菌Pseudoaheromonas sp混合,其幼體附著變態(tài)率可由單種底棲硅藻的10.00±0.00％和活性細(xì)菌的46.67±15.28％上升到80.00±8.16％,其協(xié)同誘導(dǎo)效果明顯(P＜0.05)。
　　綜上所述