不同體重和不同鹽度條件下仿刺參(Apostichopus japonicus)免疫活性的研究.pdf

1、仿刺參（Apostichopus japonicus）屬于棘皮動物門海參綱，是一種具有很高營養(yǎng)價值和藥用價值的海參，幾百年來一直被視為一種名貴的海味，有“海中人參”的美譽(yù)，是我國北方重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種。然而，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大，病害問題也日益突出。尋找合適的方法提高仿刺參自身的抗病力，已成為急需要解決的問題。然而，目前對于仿刺參免疫機(jī)制仍不清楚，沒有一套科學(xué)的仿刺參免疫指標(biāo)評價體系的現(xiàn)狀也給這個問題的解決增加了困難。
　　本論文以

2、仿刺參為對象，分別以體重和鹽度為單因素，研究了其不同階段的免疫活性和應(yīng)激反應(yīng)中各個免疫組分的變化，以期為闡明仿刺參的免疫機(jī)制及建立適合的免疫指標(biāo)提供基礎(chǔ)的實驗依據(jù)。
　　本文主要有以下三個方面內(nèi)容：
　?、宸麓虆Ⅲw腔細(xì)胞的分類
　　采用瑞士-姬娒薩混合染色法和活細(xì)胞涂片法觀察了仿刺參體腔細(xì)胞的形態(tài)特征，并將體腔細(xì)胞分為了：淋巴樣細(xì)胞、顆粒細(xì)胞、變形細(xì)胞、透明細(xì)胞、結(jié)晶細(xì)胞和紡錘細(xì)胞六大類。
　?、娌煌w重仿刺參免

3、疫活性的研究
　　以體重為單因素，選取了50g、100g和150g左右的仿刺參，對其體腔細(xì)胞數(shù)量、各類群細(xì)胞比例、吞噬活性、呼吸爆發(fā)活性、抗菌活力、溶菌活力、凝血活性、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）和酚氧化酶（PO）等進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示：體腔細(xì)胞數(shù)量及各細(xì)胞類群比例、蛋白濃度、凝血活性、SOD和POD活性在不同體重仿刺參中存在較大差異，而呼吸爆發(fā)活性、抗菌活力和溶菌活力差異不顯著。體腔細(xì)胞數(shù)量、蛋白濃度、SOD活

4、性以及淋巴樣細(xì)胞、顆粒細(xì)胞和變形細(xì)胞比例在體重150g組最高，透明細(xì)胞比例和POD活性在150g組最低，而100g組中淋巴樣細(xì)胞和變形細(xì)胞比例及凝血活性最低，說明了不同體重仿刺參的免疫活性存在明顯差異，也表明在不同生長階段仿刺參免疫系統(tǒng)中起主要作用的免疫組分不同。本實驗中幾乎檢測不到PO活性，說明其在體腔液中含量很低，對于它的研究需要更為精密的檢測手段。
　　㈢研究了鹽度變化對仿刺參免疫活性的影響
　　以鹽度為單因素，通過改

5、變海水鹽度研究了仿刺參在應(yīng)急狀態(tài)下免疫組分的變化。實驗組將鹽度從30提高到40，然后經(jīng)過35恢復(fù)到30，并在各個鹽度點進(jìn)行免疫活性測定。結(jié)果表明：鹽度變化對仿刺參體腔細(xì)胞數(shù)量、各類群細(xì)胞比例、呼吸爆發(fā)活性、溶菌活力、抗菌活力和過氧化物酶（POD）濃度具有顯著性影響；而對超氧化物歧化酶（SOD）、凝血活性和吞噬活性影響不顯著。在鹽度變化中，體腔細(xì)胞數(shù)量隨鹽度升高而升高，但各組間差異不顯著；而各類群細(xì)胞比例變化明顯，鹽度升高時大淋巴樣細(xì)胞、

6、變形細(xì)胞和透明細(xì)胞比例迅速降低，而顆粒細(xì)胞和小淋巴樣細(xì)胞比例明顯上升，后各細(xì)胞比例隨鹽度下降逐漸恢復(fù)接近初始水平；呼吸爆發(fā)活性在鹽度升到40時，顯著增強(qiáng)（P<0.05），然后隨鹽度逐漸降低；溶菌活力在鹽度變化中雖呈先降低后升高的趨勢，但在鹽度恢復(fù)到30后，溶菌活力大大增強(qiáng)（P<0.05）；抗菌活力在鹽度升高時迅速降低（P<0.05），而后緩慢升高；POD濃度在鹽度變化中迅速降低后逐漸上升，但恢復(fù)到30時濃度仍較低（P<0.05）。研究表