紫花松果菊菊苣酸提取與生物活性研究.pdf

1、I摘要紫花松果菊（EchinaceapurpureaL.）即紫錐菊，為菊科松果菊屬多年生草本植物。由于其具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫、抗氧化、抗病毒等作用，目前在世界各地廣泛種植并用于各種商業(yè)用途。菊苣酸屬于咖啡酸衍生物，是紫花松果菊中含量最豐富的酚類化合物之一，也是其主要特征成分和重要的免疫活性成分之一。本文一方面優(yōu)化了紫花松果菊中菊苣酸的提取、純化工藝；另一方面研究了菊苣酸對(duì)酪氨酸酶的抑制活性及其抗氧化和抗炎活性。具體研究結(jié)果如下：1

2、.采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化了紫花松果菊中菊苣酸的提取工藝，進(jìn)一步通過(guò)樹(shù)脂吸附、乙醇洗脫、萃取等過(guò)程純化菊苣酸，最終確定了最佳提取純化工藝：15倍量的40%乙醇提取溶液，在70℃下提取3次，每次提取1h；合并菊苣酸提取液過(guò)AB8樹(shù)脂柱吸附然后用去離子水洗至流出液無(wú)色再用50%乙醇溶液洗脫；合并樹(shù)脂純化后菊苣酸洗脫液，濃縮至原體積的110，回收乙醇，用3molL鹽酸和5%NaOH調(diào)溶液pH值為3，用醋酸乙酯萃取4次，收集萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮6

3、0℃下真空蒸干得到淺黃色粉末；最終HPLC法檢測(cè)其含量為60.23%。2.研究了菊苣酸提取物對(duì)酪氨酸酶的活性影響，結(jié)果表明菊苣酸提取物對(duì)酪氨酸酶活性有不同程度的抑制作用。隨著濃度的增加，紫花松果菊中菊苣酸對(duì)酪氨酸酶抑制率增大。菊苣酸濃度為20mgmL時(shí)，菊苣酸對(duì)酪氨酸酶單酚酶的抑制作用最大，抑制率為78.25%；菊苣酸濃度為10mgmL時(shí)即可100%抑制酪氨酸酶雙酚酶的活性。3.研究了紫花松果菊中菊苣酸提取物的抗氧化活性，以Vc為對(duì)照，

4、測(cè)定了其對(duì)有機(jī)自由基(DPPH)、羥基自由基清除能力、脂質(zhì)體過(guò)氧化的抑制作用；同時(shí)以BHA、BHT為對(duì)照，測(cè)定了菊苣酸提取物對(duì)菜籽油和豬油的抗氧化作用。結(jié)果表明：紫花松果菊菊苣酸提取物能夠有效地清除DPPH自由基、羥基自由基，同時(shí)能夠抑制脂質(zhì)體過(guò)氧化；菊苣酸提取物能顯著抑制豬油和菜籽油的氧化和酸敗，5gkg的菊苣酸提取物的抗氧化能力比0.2gkg的BHT、BHA略高，且其對(duì)豬油的抗氧化作用較菜籽油作用強(qiáng)；以上實(shí)驗(yàn)中菊苣酸提取物的抗氧化作

5、用均表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。4.采用蛋清至足腫脹、腹腔毛細(xì)血管通透性小鼠急性炎癥及膠原蛋白誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠慢性炎癥模型，研究了紫花松果菊中菊苣酸提取物的抗炎活性。結(jié)果表明：紫花松果菊中菊苣酸提取物能明顯抑制蛋清性小鼠足腫脹，且隨著菊苣酸提取物濃度的增加，抑制作用增強(qiáng)，有明顯的量效關(guān)系；菊苣酸提取物能降低醋酸所致毛細(xì)血管通透性的增加，對(duì)炎癥早期的滲出和水腫有顯著的抑制作用，且隨劑量增大而增強(qiáng)，高劑量組的菊苣酸提取物（40mg∕kg）與陽(yáng)性對(duì)照