一種香魚C-型凝集素受體基因的分子克隆和功能研究.pdf

1、本文對香魚C-型凝集素受體基因的分子克隆和功能進行了研究。C-型凝集素受體（C-type lectin receptors,CLRs）是一類能識別碳水化合物的重要模式識別分子。但是這些受體在魚類免疫系統(tǒng)中的作用卻知之甚少。本研究克隆了香魚的一個CLR基因，暫時命名為PaCD209L。PaCD209LcDNA序列全長1464 nt，編碼一個約31.5kD由281個氨基酸（AA）殘基聚合而成的多肽鏈，對預測的PaCD209L氨基酸序列與其他

2、魚類 CLRs的序列多重比對表明，PaCD209L蛋白質分子內含有CLRs的典型特征，但無Ca2+結合位點。序列同源比對和系統(tǒng)進化樹分析表明，PaCD209L與虹鱒魚的CD209aE基因有最高的氨基酸相似性，相似率高達44％。在健康香魚中，熒光定量（RT-qPCR）檢測表明，PaCD209L基因mRNA主要在腦和心臟組織表達。鰻弧菌感染后，在香魚所有檢測的組織和單核/巨噬細胞（Monocytes/macrophages，MO/MΦ）中，

3、PaCD209LmRNA表達水平都上調。我們用原核表達的方法獲得了PaCD209L的重組蛋白并制備了其抗血清，免疫印跡分析表明，天然的PaCD209L是糖基化的，并且MO/MΦ中PaCD209L蛋白在鰻弧菌感染后也顯著性表達上調。此外，對rPaCD209L的糖結合能力的研究結果表明，rPaCD209L對多糖（肽聚糖和脂多糖）的結合能力明顯強于單糖（D-甘露糖和D-半乳糖）。在缺乏或存在Ca2+時，rPaCD209L均能選擇性地結合G+菌