B-類清道夫受體和C-型凝集素在日本囊對蝦先天免疫中的功能研究.pdf

1、模式識別受體（PRRs）在先天免疫中起著不可替代的作用，通過識別各種“自己”和“非己”成分，把這種信息傳導(dǎo)給下游的效應(yīng)分子，有的模式識別受體可以直接發(fā)揮功能，清除異己成分。清道夫受體(SRs)和C-型凝集素(CTLs)都是模式識別受體中非常重要的成員，本研究選取日本囊對蝦(Marsupenaeusjaponicus)為實驗動物，研究了一種B類清道夫受體MjSR-B1和一個含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域的C-型凝集素MjcLec在先天免疫中的作用。<

2、br>　　1.日本囊對蝦B類清道夫受體MjSR-B1的功能研究
　　清道夫受體通過識別病原相關(guān)分子模式(PAMPs)參與先天免疫，同時通過識別損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）參與疾病的發(fā)生。雖然在脊椎動物中清道夫受體已經(jīng)得到深入研究，但是它們在無脊椎動物先天免疫中的作用仍需要進一步闡明。我們從日本囊對蝦中鑒定出一種B類清道夫受體，命名為MjSR-B1。MjSR-B1主要分布在血細胞、心臟、肝胰腺中，在受到鰻弧菌和金黃色葡萄球菌刺激以

3、后，對蝦血細胞中的MjSR-B1的mRNA表達水平上調(diào)。MjSR-B1胞外結(jié)構(gòu)域的重組蛋白rMjSR-B1可以凝集革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌，凝集作用依賴于鈣離子，同時rMjSR-B1可以結(jié)合脂多糖和脂磷壁酸。RNA干擾敲降MjSR-B1以后，日本囊對蝦對鰻弧菌和金黃色葡萄球菌的清除作用和吞噬作用都顯著下降，幾個吞噬相關(guān)基因的表達水平也下調(diào)，包括肌球蛋白Myosin，小GTP酶Rab5(Ras related protein)，溶酶體相

4、關(guān)膜蛋白Lampl(Lysosomal-associatedmembrane protein1)和肌動蛋白相關(guān)蛋白Arp(Actin-related protein)。同時抗菌肽的表達水平也下調(diào)，包括甲殼肽和抗脂多糖因子。過表達MjSR-B1以后，細菌清除能力增強，吞噬率上升，吞噬相關(guān)基因和抗菌肽的表達量都上調(diào)。然而，過表達缺少碳末端胞內(nèi)片段的突變體MjSR-B1ΔC卻沒有上述結(jié)果。我們的結(jié)果表明，MjSR-B1可以通過促進吞噬和增強抗

5、菌肽的表達參與對蝦的抗細菌免疫。
　　2.含有螺旋卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域的C-型凝集素MjcLec參與日本囊對蝦的先天免疫
　　C-型凝集素家族是一類模式識別受體，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用，然而它在無脊椎動物先天免疫中的作用還需要進一步研究。我們從日本囊對蝦中鑒定出一種新型的C-型凝集素，命名為MjcLec。MjcLec包括一個信號肽、一個螺旋卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域和一個糖識別結(jié)構(gòu)域。組織分布實驗顯示MjcLec在所有組織中都有表達，W