腹瀉性貝毒軟海錦酸快速免疫檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、腹瀉性貝毒（Diarrlletic shellfish Poisoning,DSP）是由有毒赤潮藻鰭藻屬和原甲藻屬產(chǎn)生的一類脂溶性多環(huán)醚類生物活性物質(zhì)，主要成分是軟海綿酸(Okadaic Acid,OA)及其衍生物。腹瀉性貝毒可在貝類等濾食性動(dòng)物體內(nèi)富集，因而危害食用者健康。近年來(lái)關(guān)于腹瀉性貝毒的事件在我國(guó)均有報(bào)道。腹瀉性貝毒的主要檢測(cè)分析方法有生物毒性法、液相色譜法以及免疫化學(xué)法。本研究采用碳二亞胺方法合成了軟海綿酸與蛋白載體的偶聯(lián)物

2、，分別用作免疫抗原和包被抗原。通過(guò)免疫Balb/c小鼠，利用細(xì)胞融合技術(shù)，制備了抗軟海綿酸的單克隆抗體,建立了軟海綿酸的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)和膠體金標(biāo)記免疫層析檢測(cè)技術(shù)。結(jié)果表明：用抗OA單克隆抗體建立的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法，最低檢出限為0.45ng/ml，靈敏度為2.59ng/ml，平均回收率為92.04％，平均變異系數(shù)為3.52％。用抗OA單克隆抗體建立的膠體金標(biāo)記免疫層析快速檢測(cè)方法，檢測(cè)時(shí)間為3-5min，檢出限為25n