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1、氨基酸是蛋白質(zhì)的基本單元,是人體完成生理功能的必須物質(zhì)。發(fā)展普適性廣、靈敏度高、分離效能好、重復性優(yōu)良的HPLC分析方法,一直是分析化學領(lǐng)域探索的重要課題。 分別以鄰苯二甲醛(OPA)及2,4-二硝基氟苯(DNFB)為衍生化試劑,發(fā)展氨基酸的柱前衍生HPLC分析方法??疾炝酥鶞?、衍生試劑用量、反應時間及流動相pH值等因素對分析結(jié)果的影響。結(jié)果表明,柱溫對分離選擇性的影響很大,改變柱溫甚至可能影響到氨基酸DNFB衍生產(chǎn)物(DNP-
2、AA)的出峰順序;衍生反應時間對OPA衍生氨基酸的定量分析影響顯著。 為彌補單一色譜填料分離選擇性的不足,通過對DNP-AA在6種不同C18填料上分離行為的考察,發(fā)展了“串聯(lián)”和“混裝”的色譜柱模式。采用C18-B與C18-SA串聯(lián)的操作模式,可以使DNP-AA的分離選擇性得到較大改善。而以C18-B和C18-SA填料混合裝填色譜柱進行DNP-AA的分離,所得峰形、柱效等更佳。 基于發(fā)展的新方法,測定了啤酒、冬蟲夏草等實
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