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文檔簡介
1、華南理工大學碩士學位論文殼聚糖用作基因治療載體研究姓名:陳鄖東申請學位級別:碩士專業(yè):制糖工程指導教師:蔡妙顏鄭文嶺20030501華南理工大學工學碩士學位論文Abstract21stcenturyistheeraofbiotechnologyAndthemedicalrevolutionin21stcenturywouldrestwiththeSuccessofgenetherapyFormanyyears,ithasbeenthou
2、ghtthatthediseasescouldbetreatedwithtaking“genepills”orallybydigestivetractasagenetherapyChitosanisonekindofpolysaccharideswithsafeandbiocompatibleaswellaslowimmunogenicityandnon—toxicityItcanbeprotonatedinacidsolutionan
3、dformpolyelectrolytecomplexwithDNAThepurposeofthisstudyistofindanefficientgenedeliveryvectorofdigestivetractgenetherapyThepreparation,purification,releasing,conformationalvariationandthemechanismofformationofChitosan/pEG
4、FPC3complexwereinvestigatedUnderasimulativegastrointestinalcondition,theanti—acid,antidigestionandreleasinginintestinaljuiceofthechitosan/DNAcomplexwerealsostudiedThetransfectionsofChitosan—pEGFPC3inCOS一7ceilsandHelacell
5、swereconductedtoverifythecapabilityofchitosanasatransfectionenhancingmaterialItwasdemonstratedbyexperimentsthatchitosanCallbeusedasaneffectiveDNAprotectivesubstanceaswellasanenhancerforinvitrogenetransfectionThemainresul
6、tsareasfollows:(1)Characteristicinvestigationofchitosan/DNA(pEGFPC3)ThepEGFPC3canbeprecipitatedcompletelybychitosanatthechargeratio(/一)of2:1ormore,andthecomplexcallbecollectedbyethanolwhenthevolumeofethanolismorethantwot
7、imesofthecomplexItcallalsobedigestedbychitosanaseandlysozymefor2hoursat379C,andDNAbereleasedfromthecomplexTheeffectsofmolecularweightofchitosanontheformationofchitosan/pEGFPC3complexanditssizewereobservedbyatransmissione
8、lectronmicroscope(TEM)Thechitosan/DNAcomplexshowedsomeirregularshapesatthechargeratio(/)of2/1ormoreAregressionbetweencompetitivebindingandchargeratio(/)wasobserved,therewasaplateauforthecompetitivebindingofchitosanandeth
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