含聚肽片段的胰島素遞送體系的合成及二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)糖響應(yīng)行為的研究.pdf

1、針對(duì)目前糖響應(yīng)胰島素遞送體系耐鹽離子強(qiáng)度有限，在生理?xiàng)l件(pH7.4，0.15M PBS)下穩(wěn)定性差的不足，本課題通過引入聚肽采用共自組裝方式形成復(fù)合納米粒子對(duì)原有糖響應(yīng)體系進(jìn)行改善，聚肽自身具有非常好的生物相容性和生物可降解性，同時(shí)人工設(shè)計(jì)合成的特定序列聚肽通過自組裝能形成獨(dú)特的二級(jí)構(gòu)象，二級(jí)構(gòu)象的存在能夠賦予單獨(dú)納米粒子不具有的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，而這為解決糖響應(yīng)體系的不穩(wěn)定帶來(lái)潛在的價(jià)值。本課題將著重研究就引入聚肽聚合物采用共自組裝方式所

2、賦予復(fù)合納米粒子獨(dú)特的結(jié)構(gòu)，進(jìn)而進(jìn)一步闡明不同二級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)納米粒子性質(zhì)的影響，具體如下:
　　1、對(duì)以mPEG-b-PBLG20質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為75％與mPEG-b-PPBDEMA75共自組裝形成的復(fù)合納米粒子在生理?xiàng)l件下(0.15M PBS，pH7.4)能保持穩(wěn)定，從圓二色光譜、FTIR以及DLS多種角度進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)由于聚肽的引入使得復(fù)合納米粒子具有二級(jí)結(jié)構(gòu)，在75％最優(yōu)組裝比例下，其α-helix和β-sheet的總和所占比例超過

3、50％，作為復(fù)合納米粒子的主導(dǎo)構(gòu)像，而作為維持這兩種二級(jí)構(gòu)象的氫鍵作用力使得復(fù)合納米粒子耐鹽極限提升至0.15M;同時(shí)設(shè)計(jì)以PEG-b-PLA和PEG-b-PS兩種不具有二級(jí)構(gòu)象但疏水驅(qū)動(dòng)力強(qiáng)的聚合物做為對(duì)比材料，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)論以何種百分?jǐn)?shù)與mPEG-b-PPBDEMA75比共組裝其形成的復(fù)合納米粒子均在生理鹽濃度下均表現(xiàn)的極其不穩(wěn)定以及糖響應(yīng)行為不可控。另一方面，保持糖響應(yīng)聚合物不變，合成出不同重復(fù)單元的聚肽，在同樣質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為75％情

4、況下共自組裝，納米粒子依然能穩(wěn)定存在而不會(huì)因?yàn)楦啕}離子強(qiáng)度而自身瓦解，同時(shí)能高度識(shí)別不同糖濃度，即正常血糖濃度不發(fā)生響應(yīng)，高血糖濃度所包裹藥物分子穩(wěn)定釋放，從而實(shí)現(xiàn)藥物分子智能可控釋放，達(dá)到治療疾病的目的。
　　2、以mPEG-b-PBLG60為聚合物框架，進(jìn)行不同程度的脫保護(hù)，得到兩個(gè)無(wú)規(guī)嵌段共聚物分別為:mPEG-b-(PBLG20-co-PLG40)60(RCP-1)和mPEG-b-(PBLG48-co-PLG12)60(R

5、CP-2)，利用NMR對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，利用紫外濁度法探究了其組裝條件，包裹芘測(cè)定其臨界膠束濃度，最終按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為75％與mPEG-b-PPBDEMA75共自組裝得到粒徑均一穩(wěn)定的復(fù)合納米粒子，通過圓二色譜表征發(fā)現(xiàn)在pH7.4情況下，RCP-1和RCP-2呈現(xiàn)出random coil和β-sheet占主導(dǎo)的現(xiàn)象，這與mPEG-b-PBLG60形成的α-helix占主導(dǎo)完全不同，研究發(fā)現(xiàn)RCP-1的復(fù)合納米粒子耐鹽極限降至0.05M，R