牡丹籽油中脂肪酸的超高效液相色譜新分析方法研究.pdf

1、牡丹籽是一種非常理想的油料資源，它的含油量十分豐富。由牡丹籽提取出的植物油——牡丹籽油是我國特有的木本堅果油，它營養(yǎng)豐富而獨特，且具有良好的醫(yī)療保健功效，因而被有關專家稱為“世界上最好的油”。牡丹籽油是植物油中的珍品，其于2011年3月22日正式獲批成為我國新資源食品。本研究以牡丹籽油作為脂肪酸新分析方法研究的對象，通過一系列的方法學考察、優(yōu)化、驗證以及對比實驗的實施從而最終建立起了一整套準確而可靠的脂肪酸新分析測定方法（超高效液相色譜

2、-蒸發(fā)光散射檢測法，也即UPLC-ELSD法），并緊接著通過使用該方法對幾個不同品種的油樣進行檢測從而很好地對該方法進行了應用。
　　首先對超高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法（UPLC-ELSD法）的色譜條件及檢測器的工作參數(shù)進行了優(yōu)化，色譜條件為:采用Welch Ultimate(R) UHPLCXB-C18色譜柱（2.1mm×100mm，1.8μm）;流動相A為0.2％乙酸甲醇溶液，流動相B為0.2％乙酸水溶液，A∶B=85∶1

3、5，流速為0.40 mL/min;色譜柱溫度為30℃;進樣量為1μL;蒸發(fā)光散射檢測器的漂移管溫度為95℃;載氣流速2.8L/min。
　　接著對該方法進行了方法學考察實驗，實驗結果表明:亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、油酸以及硬脂酸各脂肪酸的線性關系良好，它們的線性相關系數(shù)(R)分別達到了:0.9932、0.9996、0.9955、0.9952和0.9915。使用該方法測定油樣中亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、油酸以及硬脂酸的實驗穩(wěn)定性高（各脂

4、肪酸的RSD值分別為:1.79％、1.44％、0.76％、1.38％和2.12％），重現(xiàn)性好（各脂肪酸的RSD值分別為:1.75％、2.38％、1.56％、2.27％和2.16％），靈敏度高（各脂肪酸的最低檢出限分別為:0.01、0.01、0.02、0.02和0.02 mg/mL），回收率高（各脂肪酸的平均回收率分別為:98.8％、98.6％、98.6％、97.1％和98.2％）。
　　樣品的皂化條件經(jīng)過優(yōu)化后為:KOH-甲醇溶液

5、濃度0.70 mol/L，皂化時間70min，皂化溫度62.2℃;通過驗證試驗最終測得總脂肪酸的含量為700.26mg/g，與理論值（693.82mg/g）之間的誤差僅為0.93％，不足1％。
　　對皂化樣品中殘存的甘三酯進行測定后發(fā)現(xiàn):牡丹籽油樣在經(jīng)過皂化以后原本甘三酯類物質(zhì)的色譜峰完全消失了，這也就更加證明最佳皂化工藝參數(shù)確實是十分可靠的。另外，通過與氣相色譜法進行比較后發(fā)現(xiàn)，使用該方法(UPLC-ELSD法)和氣相色譜法進行

6、檢測的實驗穩(wěn)定性和重現(xiàn)性并無太大差異，但使用UPLC-ELSD法所測定出來的脂肪酸總量（700.26 mg/g）要比酯交換甲酯化法和三氟化硼甲酯化法測定出來的結果（分別為540.02 mg/g和568.96 mg/g）都要高，其原因有可能是由于酯交換法反應不完全所致。
　　通過使用UPLC-ELSD法對幾種食用油脂進行比較發(fā)現(xiàn)，牡丹籽油中所含有的亞麻酸的量(336.04 mg/g)非常的高，僅次于亞麻籽油(490.01 mg/g)

7、，遠遠超過了常見的茶油（126.18 mg/g）、米糠油（95.76 mg/g）以及我們?nèi)粘Ｋ秤玫慕瘕堲~調(diào)和油（192.83 mg/g）;其次，牡丹籽油中還含有豐富的油酸(148.75mg/g)及亞油酸（163.21 mg/g），而且它的飽和脂肪酸（即棕櫚酸和硬脂酸）的含有量最低，即其所含有的不飽和脂肪酸的比例最高。此外，實驗結果還顯示牡丹籽油中脂肪酸總量為700.26 mg/g，這也就更加充分的說明了牡丹籽油具有著巨大的開發(fā)利用價值