氮氧自由基對鐵過載引起的A549細胞過氧化的保護作用.pdf

1、近幾年，隨著環(huán)境污染的日益嚴重，霧霾天氣備受人們關注。鐵作為空氣污染中的主要致癌物之一，可通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基(OH)，誘導氧化應激進而引發(fā)DNA損傷和細胞凋亡，最終導致呼吸系統(tǒng)疾病及癌癥的發(fā)生。我們除了要加強環(huán)境的治理外，更需要找到一種有效的防護治療方法。目前，臨床上用于防護作用的藥物與人們所期盼的還存在很大的差距，所以研發(fā)新型的防護藥己然成為科研人員迫切解決的課題。
　　氮氧自由基是一類含有自旋單電子的穩(wěn)定化合物，

2、具有強大的清除體內(nèi)有害自由基的能力。相關研究發(fā)現(xiàn)，很少劑量的氮氧自由基就可以發(fā)揮有效的抗氧化作用。希望通過本論文有關NITR類氮氧自由基對A549細胞的保護性能研究，推進其成為預防和治療肺部疾病的新型抗氧化應激藥物的可行性。
　　本文合成了2，4-二甲氧基苯取代的氮氧自由基(NITR-2，4-(OMe)2，簡稱NITR)，利用紅外光譜(IR)、紫外可見光譜(UV-vis)、X-射線粉末衍射(XRD)、元素分析等方法對其進行了表征。

3、
　　為了探討氮氧自由基的抗氧化能力，實驗選用鐵過載致A549細胞氧化損傷為模型，研究NITR氮氧自由基對細胞氧化損傷的保護作用。將培養(yǎng)的細胞分為四組:①正常對照組:用不含血清的基本培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，與加藥組作對照;②檸檬酸鐵銨(FAC)組:選用含有100μM的FAC培養(yǎng)基培養(yǎng)A549細胞，使其由于鐵過載造成細胞氧化損傷;③NITR組:選用含有0.25μM的NITR培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，研究NITR加入培養(yǎng)基后是否增強細胞活力;④FAC+

4、 NITR組:A549細胞中加入一定量的含有0.25μM的NITR和100μM的FAC培養(yǎng)基培養(yǎng)，研究NITR加入培養(yǎng)基后，是否可以減緩FAC對細胞的損傷達到保護的作用。實驗過程都是分組培養(yǎng)作用24 h后，收集并檢測細胞。采用MTT、DIPA染色、熒光顯微鏡觀察、流式細胞技術及Western Blot等技術，檢測了細胞活力、細胞形態(tài)、細胞內(nèi)氧化還原水平、細胞周期分布、細胞凋亡率及凋亡蛋白的變化。研究結果顯示:
　　1.NITR氮氧

5、自由基可以增強細胞的活力，減輕FAC對A549細胞的損傷，減少凋亡數(shù)目。
　　2.加入NITR氮氧自由基后，細胞內(nèi)氧化還原水平指標SOD增強，MDA含量下降，GSH含量明顯上升，表明氮氧自由基能夠有效地減少FAC對A549細胞的氧化損傷，增強A549細胞的抗氧化能力。
　　3.流式細胞儀檢測A549細胞周期和凋亡發(fā)現(xiàn)氮氧自由基能有效緩解檸檬酸鐵銨對A549細胞產(chǎn)生的G2期阻滯現(xiàn)象，減少細胞的凋亡。
　　4.Wester