鮑曼不動(dòng)桿菌碳青霉烯酶和16SrRNA甲基化酶基因及流行分布.pdf

1、目的：
　　1.了解溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2011～2013年來(lái)臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥情況;
　　2.分析鮑曼不動(dòng)桿菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶的基因分布及特征;
　　3.探究碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶的基因陽(yáng)性菌株的同源性，為院內(nèi)感染管理與控制提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.回顧性分析2011～2013年間溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床分離鮑曼不動(dòng)桿菌的感染分布和耐藥情況;<

2、br>　　2.測(cè)定鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類藥物和氨基糖苷類藥物的MIC; PCR方法篩查鮑曼不動(dòng)桿菌碳青霉烯酶耐藥基因和16S rRNA甲基化酶的基因。
　　3.通過(guò)手工和試劑盒方法提取鮑曼不動(dòng)桿菌的質(zhì)粒，并通過(guò)PFGE和S1-PFGESouthern雜交的方法確定基因染色體或質(zhì)粒的位置。
　　4.通過(guò)脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)和多位點(diǎn)序列分析(MLST)的技術(shù)對(duì)blaOXA-23和armA基因陽(yáng)性的菌株進(jìn)行同源性研究，了解

3、其流行特點(diǎn)。
　　結(jié)果：
　　1.2011～2013年溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床分離的376株鮑曼不動(dòng)桿菌標(biāo)本來(lái)源主要為痰液，占89.1％(335/376)，其次為創(chuàng)面，占2.7％(10/376)，血液，占1.9％(7/376)，其他標(biāo)本如腹水、尿液、腦脊液、導(dǎo)管引流等占6.3％(15/376)。病區(qū)的分布主要以ICU科室為主占52％(196/376)，其次為神經(jīng)外科和腦外科占14.1％(53/376)，燒傷科占8.1％(

4、30/376)。
　　2.鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥現(xiàn)象非常嚴(yán)重，除左氧氟沙星和頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率在65％以下外，其它藥物的耐藥率都達(dá)到了很高的水平，碳青霉烯類如亞胺培南和氨基糖苷類藥物如阿米卡星耐藥率都接近80％。
　　3.PCR擴(kuò)增B類碳青霉烯類金屬酶基因（blaIMP，blaVIM，blaNDM，blaSIM，blaGIM）及D類碳青霉烯酶基因(blaOXA-51，blaOXA-23，blaOXA-48，blaOXA-58

5、)和16S rRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA)，其中blaOXA-51、 blaOXA-23、blaIMParmA基因的陽(yáng)性率分別為100％、80.8％(84/104)、9.6％(10/104)和82.7％(86/104)。并且通過(guò)Southern雜交表明blaOXA-23和armA基因可能定位于細(xì)菌染色體上。
　　4.攜帶blaOXA-23基因和armA基因陽(yáng)性的菌株對(duì)碳

6、青霉烯類藥物和氨基糖苷類藥物的耐藥達(dá)到了很高的水平，對(duì)碳青霉烯類藥物的MIC50和MIC90分別為16μg/ml和32μg/ml，對(duì)氨基糖苷類藥物（阿米卡星、慶大霉素和妥布霉素）的MIC50和MIC90都＞256μg/ml，耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。
　　5.84株同時(shí)攜帶blaOXA-23和armA基因的鮑曼不動(dòng)桿菌有A、B、C三個(gè)主要克隆群。其中A克隆為46株，B克隆為20株，C克隆為7株，A克隆為最主要的克隆群。選取A、B、C三個(gè)主要克

7、隆菌株通過(guò)PCR擴(kuò)增7個(gè)管家基因，MLST有5個(gè)ST型分別是ST191、ST381、ST426、ST208、ST373，其中ST191和ST381是最主要的ST型。
　　結(jié)論：
　　1.本院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌標(biāo)本來(lái)源主要來(lái)自于痰液，主要分離的科室是ICU，對(duì)多種藥物耐藥情況嚴(yán)重，多重耐藥菌的比例居高不下。
　　2.本院鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類藥物和氨基糖苷類藥物的耐藥水平比較高，耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，blaOXA-23和a

8、rmA基因分別是碳青霉烯類藥物和氨基糖苷類藥物耐藥的主要原因，其中armA基因介導(dǎo)氨基糖苷類藥物的高水平耐藥。
　　3.本研究通過(guò)Southern雜交實(shí)驗(yàn)表明blaOXA-23和armA這兩個(gè)基因可能位于染色體上，它們通過(guò)垂直傳播的方式傳播其耐藥性。
　　4.本研究通過(guò)PFGE和MLST對(duì)blaOXA-23和armA基因陽(yáng)性的菌株的流行病學(xué)分析結(jié)果表明這種菌株在院內(nèi)存在著克隆播散現(xiàn)象，其中ST191和ST381為主要流行的S