分子標(biāo)記技術(shù)原理、方法及應(yīng)用

1、分子標(biāo)記技術(shù)原理、方法及應(yīng)用一、遺傳標(biāo)記的類型及發(fā)展遺傳標(biāo)記(geicmarker):指可追蹤染色體、染色體某一節(jié)段、某個(gè)基因座在家系中傳遞的任何一種遺傳特性。它具有兩個(gè)基本特征，即可遺傳性和可識(shí)別性；因此生物的任何有差異表型的基因突變型均可作為遺傳標(biāo)記。包括形態(tài)學(xué)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化標(biāo)記和分子標(biāo)記四種類型。形態(tài)學(xué)標(biāo)記：主要包括肉眼可見(jiàn)的外部形態(tài)特征，如：矮稈、紫鞘、卷葉等；也包括色素、生理特性、生殖特性、抗病蟲(chóng)性等有關(guān)的一些特性。優(yōu)

2、點(diǎn):形態(tài)學(xué)標(biāo)記簡(jiǎn)單直觀、經(jīng)濟(jì)方便。缺點(diǎn):(1)數(shù)量在多數(shù)植物中是很有限的(2)多態(tài)性較差，表現(xiàn)易受環(huán)境影響(3)有一些標(biāo)記與不良性狀連鎖(4)形態(tài)標(biāo)記的獲得需要通過(guò)誘變、分離純合的過(guò)程，周期較長(zhǎng)細(xì)胞學(xué)標(biāo)記：植物細(xì)胞染色體的變異：包括染色體核型（染色體數(shù)目、結(jié)構(gòu)、隨體有無(wú)、著絲粒位置等）和帶型（C帶、N帶、G帶等）的變化。優(yōu)點(diǎn):能進(jìn)行一些重要基因的染色體或染色體區(qū)域定位。缺點(diǎn):(1)材料需要花費(fèi)較大的人力和較長(zhǎng)時(shí)間來(lái)培育，難度很大(2)有

3、些變異難以用細(xì)胞學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)生化標(biāo)記：主要包括同工酶和等位酶標(biāo)記。分析方法是從組織蛋白粗提物中通過(guò)電泳和組織化學(xué)染色法將酶的多種形式轉(zhuǎn)變成肉眼可辯的酶譜帶型。優(yōu)點(diǎn):直接反映了基因產(chǎn)物差異，受環(huán)境影響較小。缺點(diǎn):(1)目前可使用的生化標(biāo)記數(shù)量還相當(dāng)有限(2)有些酶的二、幾種常見(jiàn)分子標(biāo)記的原理及方法1.RFLP2.RAPD3.AFLP4.SSR5.ISSR6.SNP1.RFLP：RestrictionFragmentLengthPolym

4、phismbyBotstein(1980)基本原理：物種的基因組DNA在限制性內(nèi)切酶作用下，產(chǎn)生相當(dāng)多的大小不等的片段，用放射性同位素標(biāo)記的DNA作探針，把與被標(biāo)記DNA相關(guān)的片段檢測(cè)出來(lái)，從而構(gòu)建出多態(tài)性圖譜。用某一種限制性內(nèi)切酶來(lái)切割來(lái)自不同個(gè)體的DNA分子上，內(nèi)切酶的識(shí)別序列有差異，即是由限制性酶切位點(diǎn)上堿基的插入、缺失、重排或點(diǎn)突變所引起的。這種差異反映在酶切片段的長(zhǎng)度和數(shù)目上。優(yōu)點(diǎn):無(wú)表型效應(yīng)，不受環(huán)境條件和發(fā)育階段的影響；共