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文檔簡介
1、實驗十一 APTT、PT、FDP、D-二聚體測定,APTT,,,,Ca2+腦磷脂,鞣花酸,,Ca2+腦磷脂,部分凝血活酶,PT,,,組織因子,Ca2+ 磷脂,凝血酶,,TT,二、材料 1、半自動血凝儀、水浴箱、塑料試管、 秒表 2、 APTT: 4%鞣花酸-腦磷脂懸液 0.025mol/L氯化鈣溶液 PT
2、 :0.025mol/L氯化鈣凝血活酶溶液 3、正常對照血漿、受檢血漿,三、操作 (一)APTT手工法(平皿法) 血漿0.05ml+APTT試劑0.05ml +CaCl20.05ml (
3、混勻計時) 結果觀察:混勻后,不斷挑動液體,發(fā)現(xiàn)細絲,停止計時 參考值 25~45s,,37℃溫浴,,,,APTT,延長,縮短,因子VIII、IX、XI活性減低,高凝狀態(tài),,,,,,臨床意義,肝素抗凝監(jiān)測,(二)PT(半自動血凝儀法) 血漿0.05ml PT試劑0.1ml (37℃) 參考值 10~14s,,37℃預溫,
4、3min,PT,延長,縮短,因子II、V、VII、X、Fg活性減低,高凝狀態(tài),,,,,臨床意義,口服雙香豆素類抗凝藥物監(jiān)測,五、注意事項 1、標本的采集和處理,標本放置不應超過2h 2、收到后注意觀察標本,分離血漿注意離心 速度和時間 3、操作要準確 4、使用試劑前應仔細閱讀說明書,,,,,37℃試劑位,,室溫試劑孔,,,,,,37℃加樣器孔,37℃帶攪拌試劑孔,室溫加樣器孔,聯(lián)動加樣槍,,D-二聚
5、體檢測,一、原理(膠乳凝集法) 被檢測血漿中加入標記D-二聚體單抗的膠乳顆粒懸液,如果血漿中D-二聚體含量大于0.5mg/L,與膠乳顆粒上的抗體結合,膠乳顆粒則發(fā)生凝集。二、材料綠色膠乳、樣本稀釋液、陰陽性對照、反應板、待測血漿,病例:男性患者,26歲,因拔牙后出血不易止血七天 入院,患者于一周前在口腔醫(yī)院行拔牙手術,術后出血較多,棉球壓迫止血,稍有減輕,但創(chuàng)口一直滲血, PLT,BT,PT,APTT等檢查均正
6、常.患者平時無齦出血,鼻 出血,喀血,便血,血尿等,兒童時期曾有一次拔牙后不易止血和右踝關節(jié)扭傷后出現(xiàn)血腫病歷,曾被懷疑為“輕型血友病”.因而被限制劇烈運動,避免外傷,手術.患者父親曾有拔牙后十天多才止血。其體格檢查正常,實驗室其他檢查如因子活性等正常,其中FDP 6.4g/L(3.0g/L±0.82g/L),D-二聚體陰性。,(一) APTT:手工法(平皿法) 血漿0.05ml+APTT試劑0.05ml
7、 +CaCl20.05ml (混勻計時) 結果觀察:混勻后,不斷挑動液體,發(fā)現(xiàn)細絲, 停止計時(二) PT:半自動血凝儀法 血漿0.05ml + PT試劑0.
8、1ml (37℃),,37℃水浴,5min,37℃溫浴,,,,37℃水浴,,3min,四、注意事項1.標本室溫穩(wěn)定4h,-20 ℃可長期保存,37 ℃快速復融。2、加樣量要精確,標本與膠乳等量。3、膠乳試劑應放在4 ℃保存,勿冰凍,臨用前恢復室溫。4、混勻膠乳試劑時,應旋轉輕輕混勻,切勿劇烈振蕩。5、若標本已出現(xiàn)凝塊,不能用于測定,否則出現(xiàn)假陽性反應。,三、操作1、將試劑從4 ℃冰箱取出后恢復室溫。2、混勻膠乳,精確吸取
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