惡性淋巴瘤免疫組化

1、惡性淋巴瘤的免疫組化,復(fù)旦大學(xué)腫瘤醫(yī)院病理科,一、常用抗體,,（一）白細(xì)胞1. CD45，CD45RB（LCA）,出現(xiàn)于白細(xì)胞表面的四、五種高分子量糖蛋白家族（180，190，205，220kD）DAKO產(chǎn)抗體由二種單抗組成：2B11(180，190，205，220kD)--CD45抗體PD7/26( 190，205，220kD)--CD45RB抗體,正常組織：標(biāo)記淋巴細(xì)胞。細(xì)胞膜表面陽性最強(qiáng)，胞漿內(nèi)弱陽性也可見。巨噬

2、細(xì)胞和組織細(xì)胞不同程度表達(dá)。多核白細(xì)胞弱陽性漿細(xì)胞陰性非造血細(xì)胞陰性,腫瘤：大部分淋巴瘤（ B和T）陽性漿細(xì)胞及大細(xì)胞淋巴瘤常陰性毛細(xì)胞陽性粒細(xì)胞性或紅細(xì)胞源性腫瘤細(xì)胞陰性非造血組織腫瘤，如癌，惡性黑色素瘤，尤文氏肉瘤陰性可用于脫鈣骨髓活檢組織，鑒別骨腫瘤,2. CD11A/18（LFA-1 α和β）,表達(dá)于大部分淋巴瘤和白血病很多中等和高度惡性B細(xì)胞淋巴瘤LFA-1的α和/或 β鏈可缺失。,3. TdT,屬核酶

3、，參與T細(xì)胞受體產(chǎn)生和抗體分化過程。正常組織：見于小群成人骨髓淋巴細(xì)胞和大部分皮質(zhì)胸腺細(xì)胞。偶見于反應(yīng)性淋巴結(jié)和脾髓質(zhì)胸腺細(xì)胞和正常外周血細(xì)胞不表達(dá),腫瘤：表達(dá)于非成熟淋巴細(xì)胞來源腫瘤。高TdT活性見于:淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤慢性粒細(xì)胞性白血病淋巴母細(xì)胞危象大部分急性淋巴母細(xì)胞性白血病,4. CD30,120kD跨膜糖蛋白CD30基因位于第1號染色體短臂36區(qū)，早先稱為Ki-1，又名Ber-H2冰凍切片：霍奇金細(xì)胞（

4、單核）和R-S細(xì)胞（多核）結(jié)節(jié)型淋巴細(xì)胞為主型：弱陽性或陰性其它HL：強(qiáng)陽性,大部分間變性大細(xì)胞淋巴瘤和所有的淋巴樣丘疹強(qiáng)陽性一些外周多形T細(xì)胞淋巴瘤（HTLV-1+/-），包括血管免疫母細(xì)胞型，Lennert型和極少數(shù)B免疫母細(xì)胞淋巴瘤陽性。其他淋巴瘤陰性。正常淋巴組織中，小群位于B細(xì)胞濾泡和生發(fā)中心邊緣的大細(xì)胞陽性,正常淋巴細(xì)胞經(jīng)菜豆凝集素，HTLV-I/II或EB病毒刺激后，可與CD30抗體反應(yīng)。淋巴組織外，胰腺腺泡細(xì)胞

5、（+），胰腺癌偶（+）。胚胎型癌（+）。其他類型或其他部位的癌，惡性黑色素瘤，橫紋肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（－）石蠟切片：與冰凍切片不同，漿細(xì)胞（+）余同冰凍切片,,（二）B細(xì)胞,1. 免疫球蛋白（Ig）（1）κ免疫球蛋白κ輕鏈（2）λ免疫球蛋白λ輕鏈,2. 全B抗原（1）CD20（L26）,33kD非糖基化蛋白外周血和淋巴組織中大多數(shù)B細(xì)胞陽性在淋巴組織，生發(fā)中心母細(xì)胞和B免疫母細(xì)胞強(qiáng)陽性。其他

6、造血細(xì)胞陰性。,非淋巴組織陰性。大多數(shù)B細(xì)胞淋巴瘤陽性極少數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤陽性結(jié)節(jié)型淋巴細(xì)胞為主型霍奇金淋巴瘤的R-S細(xì)胞可陽性。,（2）CD19,95kD多肽B細(xì)胞陽性。表達(dá)于B細(xì)胞成熟早期，可能早于前B細(xì)胞期，持續(xù)見于整個(gè)B細(xì)胞成熟期，直至終末漿細(xì)胞期前不久消失。其他造血細(xì)胞和非造血細(xì)胞陰性。只能用于冰凍切片。,（3）CD22,B細(xì)胞分化早期表達(dá)于胞漿，后與Ig幾乎同時(shí)到達(dá)細(xì)胞表面B細(xì)胞淋巴瘤和白血病陽性大多數(shù)漿細(xì)胞腫

7、瘤陰性,（4）CDW75（LN-1）,表達(dá)于SIg＋B細(xì)胞正常細(xì)胞：淋巴結(jié)和脾白髓的生發(fā)中心B細(xì)胞強(qiáng)（+）套區(qū)B細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，脾紅髓紅細(xì)胞陽性更弱濾泡外B細(xì)胞散在陽性漿細(xì)胞陰性外周血B淋巴細(xì)胞陽性,陽性上皮細(xì)胞：腺上皮（子宮內(nèi)膜、前列腺、胃），乳腺導(dǎo)管上皮，腎遠(yuǎn)曲小管，胰腺導(dǎo)管，結(jié)腸表面上皮，支氣管呼吸道纖毛柱狀上皮肝細(xì)胞，甲狀腺濾泡，平滑肌和唾腺腺泡細(xì)胞弱陽性。腫瘤細(xì)胞：B細(xì)胞性白血病（+）：B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞性白

8、血病，毛細(xì)胞白血病,B細(xì)胞淋巴瘤：濾泡中心細(xì)胞淋巴瘤，特別是大裂和大無裂強(qiáng)（+）免疫母細(xì)胞型也（+）T細(xì)胞淋巴瘤（－）上皮性腫瘤：乳腺、卵巢和結(jié)腸腺癌（+）喉鱗癌和睪丸生殖細(xì)胞癌局灶（+）膀胱移行細(xì)胞癌和胃腺癌弱（+）間葉性腫瘤：粘液脂肪肉瘤（+）未分化肉瘤（+）,（5）CD79α(mb-1),與CD79β(B29)共同組成B細(xì)胞抗原受體出現(xiàn)于B細(xì)胞成熟早期，從前B細(xì)胞期到漿細(xì)胞期，為細(xì)胞間成分。用于識別B細(xì)胞種

9、系。前B細(xì)胞性急性白血病，B細(xì)胞株，B細(xì)胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤陽性。 粒細(xì)胞或T細(xì)胞株以及T細(xì)胞瘤陰性。,（6）BLA36,36kD糖蛋白正常細(xì)胞：見于早期和活化B細(xì)胞，但靜止和周圍B細(xì)胞陰性。大多數(shù)小無裂和大無裂細(xì)胞及免疫母細(xì)胞膜強(qiáng)陽性。少數(shù)小裂細(xì)胞陽性，巨噬細(xì)胞陰性。,30%套區(qū)淋巴細(xì)胞膜弱陽性。濾泡間區(qū)散在中等到大淋巴細(xì)胞和免疫母細(xì)胞膜強(qiáng)陽性。T細(xì)胞、粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞陰性，但正常肝的枯否氏細(xì)胞不同程度陽性。腫瘤

10、細(xì)胞：霍奇金淋巴瘤的R-S細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞陽性。一些反應(yīng)性和惡性B淋巴細(xì)胞陽性。,3. B細(xì)胞亞型抗原 （1）CD10（CALLA，急性淋巴母細(xì)胞性白血病共同抗原）,100kD糖蛋白主要用于兒童白血病和B細(xì)胞淋巴瘤：表達(dá)于淋巴母細(xì)胞性，Burkitt和濾泡型淋巴瘤及慢性粒細(xì)胞型白血病,也見于腎小球上皮細(xì)胞、近端腎小管刷狀緣、乳腺肌上皮細(xì)胞、膽小管、中性粒細(xì)胞、小群骨髓細(xì)胞、胚胎小腸上皮和正常纖維母細(xì)胞。,（2）CD21,C

11、3d受體，145kD糖蛋白也具有Epstein-Barr病毒受體的功能冰凍切片：B細(xì)胞中等（＋）濾泡樹突狀細(xì)胞（FDC）強(qiáng)（＋）石蠟切片：B細(xì)胞弱（＋）~（－）FDC強(qiáng)（＋）,正常和增生淋巴結(jié)及扁桃體：生發(fā)中心可見FDC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，致密，清晰。濾泡套區(qū)FDC ＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)疏松，不清晰。非霍奇金淋巴瘤：濾泡型淋巴瘤（cb/cc淋巴瘤）： FDC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)呈結(jié)節(jié)型，致密，清晰。一些彌漫型淋巴瘤（中心細(xì)胞性淋巴瘤）： F

12、DC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)大小不一，疏松，不清晰。前B細(xì)胞淋巴瘤（淋巴母 細(xì)胞性淋巴瘤），Burkitt淋巴瘤，漿細(xì)胞瘤和毛細(xì)胞白血病FDC－。,T細(xì)胞淋巴瘤FDC＋限于外周T細(xì)胞淋巴瘤的血管免疫母細(xì)胞性淋巴結(jié)?。ˋILD）型和一些多形T細(xì)胞淋巴瘤。與B細(xì)胞淋巴瘤不同， T細(xì)胞淋巴瘤和AILD的FDC網(wǎng)僅含少量B細(xì)胞。T淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤、T-CLL和蕈樣霉菌病FDC－。霍奇金淋巴瘤：僅結(jié)節(jié)型淋巴細(xì)胞為主型FDC＋。 FDC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)致密，清

13、晰，幾乎占據(jù)整個(gè)增大的濾泡。,（3）CD23,正常細(xì)胞：套區(qū)B細(xì)胞（＋）濾泡樹突狀細(xì)胞亞型（＋）腫瘤：小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤/白血病（＋）套細(xì)胞淋巴瘤（－）,（4）CD35,C3b受體，單鏈糖蛋白，220kD正常組織：冰凍切片：人B細(xì)胞濾泡中大部分強(qiáng)陽性細(xì)胞為濾泡樹突狀細(xì)胞（FDC），套細(xì)胞陽性較弱。腎小球上皮細(xì)胞C3b受體強(qiáng)陽性巨噬細(xì)胞和組織細(xì)胞不同程度陽性,石蠟切片（蛋白酶消化后）：FDC強(qiáng)陽性，濾泡中心和套區(qū)的F

14、DC網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)明顯，前者致密，清晰；后者疏松，不清晰。腫瘤細(xì)胞：濾泡型淋巴瘤（cb/cc）：FDC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)呈結(jié)節(jié)狀，致密，清晰彌漫型淋巴瘤（多數(shù)為cc）：FDC＋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)疏松，不清晰,前B細(xì)胞淋巴瘤（淋母），Burkitt淋巴瘤，漿細(xì)胞瘤和毛細(xì)胞性白血病FDC－非霍奇金淋巴瘤，F(xiàn)DC主要限于血管免疫母細(xì)胞性淋巴結(jié)病型T細(xì)胞淋巴瘤,（5）CD38,45kD糖蛋白正常細(xì)胞：漿細(xì)胞、單核細(xì)胞、早期淋巴樣細(xì)胞、和活化的T細(xì)胞（＋）

15、。腫瘤：漿細(xì)胞腫瘤（＋）有些B和T細(xì)胞淋巴瘤（＋） ，特別前驅(qū)細(xì)胞來源者。,（6）VS38c（漿細(xì)胞單抗）,64kD胞漿內(nèi)抗原。表達(dá)于正常和腫瘤性漿細(xì)胞。 上皮細(xì)胞（尤其鱗狀上皮）弱陽性,,（三）T細(xì)胞,1. 全T抗原,（1）CD2,正常細(xì)胞：T細(xì)胞（＋）NK細(xì)胞（＋）腫瘤：大多數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤和白血?。ǎ┥贁?shù)粒細(xì)胞白血病（＋）,（2）CD3,16-28kD, 5條多肽鏈組成抗體與T細(xì)胞表達(dá)的CD3抗原的胞漿內(nèi)

16、部分反應(yīng)。最早見于早期胸腺細(xì)胞在皮質(zhì)胸腺細(xì)胞明顯存在于胞漿至髓質(zhì)胸腺細(xì)胞出現(xiàn)于T細(xì)胞表面為高度特異T細(xì)胞標(biāo)記，除T細(xì)胞外，僅表達(dá)于小腦蒲肯野細(xì)胞。,正常組織：表達(dá)于胸腺皮質(zhì)、髓質(zhì)和周圍淋巴組織的T細(xì)胞。腫瘤：表達(dá)于大多數(shù)T細(xì)胞腫瘤，但高度惡性T細(xì)胞淋巴瘤，如大細(xì)胞間變性淋巴瘤偶見（－）。部分惡性組織細(xì)胞增生癥陽性有些霍奇金淋巴瘤陽性,（3）CD5,表達(dá)于多數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤和白血病。也可表達(dá)于一些腫瘤性B細(xì)胞，如B-CL

17、L，B-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤和套細(xì)胞淋巴瘤。粒細(xì)胞和單核細(xì)胞陰性。,（4）CD7,正常細(xì)胞：大部分T細(xì)胞（＋）NK細(xì)胞（＋）腫瘤：很多T細(xì)胞淋巴瘤和白血?。ǎ┮恍┝＜?xì)胞白血?。ǎ┝馨湍讣?xì)胞性腫瘤最佳T細(xì)胞標(biāo)記之一胸腺后T細(xì)胞惡性腫瘤，尤其在MF中常缺失,（5）CD43（Leu22）,T細(xì)胞和髓系細(xì)胞表達(dá)的膜/漿抗原正常和腫瘤性T細(xì)胞陽性正常扁桃體和淋巴結(jié)的濾泡間區(qū)T細(xì)胞強(qiáng)陽性少數(shù)B細(xì)胞白血病和淋巴瘤也可表達(dá)通常

18、為小細(xì)胞性，如中心細(xì)胞性淋巴瘤,（6）OPD4,200kD，表達(dá)于輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞強(qiáng)陽性：淋巴結(jié)T區(qū)淋巴細(xì)胞（膜）扁桃體*分布同CD4陽性細(xì)胞結(jié)節(jié)病和結(jié)核的類上皮細(xì)胞弱陽性抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞極少陽性,陰性：非造血細(xì)胞B細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞腫瘤：見于50%T細(xì)胞淋巴瘤—輔助/誘導(dǎo)表型的外周T細(xì)胞淋巴瘤少數(shù)B細(xì)胞淋巴瘤陽性,（7）CD45RO（UCHL-1）,180kD，出現(xiàn)于T細(xì)胞分化早期。正常細(xì)胞：大多數(shù)胸腺

19、細(xì)胞（＋）成熟活化T細(xì)胞（＋）少量靜止T細(xì)胞（CD4/CD8亞型）（＋）粒單核細(xì)胞系，如粒細(xì)胞和單核細(xì)胞（＋）多數(shù)正常B細(xì)胞和NK細(xì)胞（－）,腫瘤細(xì)胞：T細(xì)胞淋巴瘤（＋）極少B細(xì)胞淋巴瘤：部分中心母細(xì)胞性和免疫母細(xì)胞性淋巴瘤胞漿弱（＋）組織細(xì)胞性淋巴瘤弱（＋）鑒別naive T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞CD45RO：記憶T細(xì)胞CD45RA： naive T細(xì)胞,2. T細(xì)胞亞型抗原（1）CD1A,正常細(xì)胞：皮質(zhì)胸腺細(xì)胞

20、（＋）郎罕氏細(xì)胞（＋）腫瘤：很多胸腺T淋巴瘤和白血?。ǎ├珊笔霞?xì)胞組織細(xì)胞增生癥（＋）,（2）CD4,55kD，出現(xiàn)于大部分T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞。胸腺皮質(zhì)：胸腺細(xì)胞復(fù)合表達(dá)CD4，CD8，T6胸腺髓質(zhì)：胸腺細(xì)胞丟失T6，分別表達(dá)CD4，CD8。也見于單核/巨噬細(xì)胞,表達(dá)T4抗原的腫瘤：多數(shù)皮膚T細(xì)胞淋巴瘤，包括蕈樣霉菌病HTLV-I相關(guān)成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤部分T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞性白血病/淋巴瘤*在淋巴母細(xì)胞

21、性淋巴瘤中，T8抗原也可存在于腫瘤細(xì)胞。,（3）CD8,33kD，表達(dá)于人抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞周圍淋巴組織中CD8＋T細(xì)胞（濾泡間區(qū)域）僅占T細(xì)胞15-20%骨髓和胃腸道上皮80%T細(xì)胞是CD8＋大部分皮質(zhì)胸腺細(xì)胞和約30%髓質(zhì)胸腺細(xì)胞CD8＋,,（四）NK細(xì)胞1. CD56（NCAM-1）,神經(jīng)細(xì)胞粘附分子（NCAM）表達(dá)于：大部分神經(jīng)外胚層源性細(xì)胞株，組織和腫瘤（視神經(jīng)母細(xì)胞瘤、髓母細(xì)胞瘤、星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤和神經(jīng)母細(xì)胞瘤）

22、中胚層源性腫瘤：橫紋肌肉瘤NK細(xì)胞,2. CD57,110kD表達(dá)于7-35%正常外周血淋巴細(xì)胞：NK細(xì)胞CD8＋外周血抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞也表達(dá)于部分神經(jīng)組織粒細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞和胸腺細(xì)胞陰性。,3. CD16（Leu-11）,正常細(xì)胞：NK細(xì)胞粒細(xì)胞表達(dá)于許多NK細(xì)胞增生性疾病,,（五）粒細(xì)胞和單核吞噬細(xì)胞 1. CD11c（Leu-M5）,正常細(xì)胞：表達(dá)于粒單核細(xì)胞,腫瘤：毛細(xì)胞白血?。ǎ﹩魏?/p>

23、細(xì)胞樣B細(xì)胞淋巴瘤（＋）少數(shù)B-SLL/CLL （＋）少數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤（＋）一些粒細(xì)胞白血病，特別是M4和M5 （＋）郎罕氏細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥（＋）,2. CD15 （Leu-M1）,寡糖外周血：中性粒細(xì)胞陽性單核細(xì)胞弱陽性淋巴細(xì)胞和血小板陰性樹突網(wǎng)狀細(xì)胞陽性單核/巨噬細(xì)胞陰性,霍奇金淋巴瘤R-S細(xì)胞強(qiáng)表達(dá)（除外淋巴細(xì)胞為主型，僅小部分陽性）大部分非霍奇金淋巴瘤陰性。,3. α1-AT， α1-ACT， ly

24、sozyme,單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞（+）粒細(xì)胞（+）,4. CD68,跨膜糖蛋白，110kD多種巨噬細(xì)胞陽性：包括枯否氏細(xì)胞，脾紅髓、胃腸道固有層、肺腺泡和骨髓的巨噬細(xì)胞?？乖蔬f細(xì)胞，如郎罕氏細(xì)胞（－）或弱（＋）。漿細(xì)胞樣T細(xì)胞陽性（見于反應(yīng)性淋巴結(jié)，被認(rèn)為是單核/巨噬細(xì)胞源性）,慢性和急性粒細(xì)胞性白血病：胞漿陽性。少數(shù)真性組織細(xì)胞性腫瘤陽性。正常和腫瘤性肥大細(xì)胞陽性。惡性黑色素瘤：不同數(shù)量細(xì)胞陽性。淋巴細(xì)胞源性腫瘤陰

25、性，但一些B細(xì)胞淋巴瘤（小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤和毛細(xì)胞白血?。┌麧{弱陽性。,5. S-100蛋白,正常細(xì)胞：郎罕氏細(xì)胞（+）交指（IDRC）和有些濾泡樹突狀細(xì)胞（+）造血組織疾病：郎罕氏細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥（+）IDRC腫瘤（+）少數(shù)T細(xì)胞淋巴瘤（+）,6. MAC387,α（12kD）和β（14kD）亞單位組成胞漿抗原，表達(dá)于：粒細(xì)胞血單核細(xì)胞各組織的組織細(xì)胞：如浸潤性或反應(yīng)性組織細(xì)胞，腺泡巨噬細(xì)胞，腫瘤浸潤巨噬細(xì)胞

26、，竇組織細(xì)胞，上皮樣巨細(xì)胞和組織細(xì)胞增生癥X和皮病性淋巴結(jié)病的組織細(xì)胞。,生發(fā)中心巨噬細(xì)胞（－）很多皮膚和扁桃體活檢的鱗狀上皮（＋），但其他上皮（－），包括各類腺上皮。,7. MPO,用于鑒別淋巴細(xì)胞性和粒細(xì)胞性白血病,,（六）其 他1. EMA,漿細(xì)胞陽性造血組織腫瘤：表達(dá)于霍奇金淋巴瘤（主要為NLPHL）漿細(xì)胞腫瘤很多間變性大細(xì)胞淋巴瘤一些其他B和T大細(xì)胞淋巴瘤,2. BNH9,人紅細(xì)胞相關(guān)抗原H（1，2，4

27、型）和Y（2型）正常組織：上皮組織：腺上皮和鱗狀上皮，包括外、中、內(nèi)胚層來源。非上皮組織：紅細(xì)胞、紅母細(xì)胞、巨核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞：50%間變性大細(xì)胞淋巴瘤, 且多數(shù)EMA(+)<5%霍奇金淋巴瘤(除外淋巴細(xì)胞為主型，21%)6%其他類型非霍奇金淋巴瘤（B、T，低度和高度惡性）50%癌軟組織腫瘤：血管肉瘤（包括卡波西肉瘤）和滑膜肉瘤,3. LMP,60kD膜蛋白，由EBV的BNLF1基因編碼。強(qiáng)陽性：E

28、BV（+）的淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞株傳染性單核細(xì)胞增多癥中EBV感染的B免疫母細(xì)胞不典型淋巴細(xì)胞增生免疫缺陷患者發(fā)生的多形性B細(xì)胞感染,其他陽性病變25-50%EBV相關(guān)的鼻咽未分化癌90% EBV相關(guān)的霍奇金淋巴瘤20-30%CD30＋間變性大細(xì)胞淋巴瘤急性傳染性單核細(xì)胞增多癥多種類型外周T細(xì)胞淋巴瘤陰性：EBV（+）的Burkitt淋巴瘤弱陽性平滑肌，包括血管,4. CD99（p30/32mic2）,MIC2基因

29、產(chǎn)物。該基因位于染色體X和Y的短臂上。正常細(xì)胞：一些淋巴細(xì)胞（骨髓、淋巴結(jié)和脾）皮質(zhì)胸腺細(xì)胞卵巢顆粒細(xì)胞大多數(shù)Langerhan胰島細(xì)胞CNS室管膜細(xì)胞,睪丸Sertoli細(xì)胞部分血管內(nèi)皮細(xì)胞腫瘤細(xì)胞：淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤和粒細(xì)胞肉瘤（+）ES/PNET瘤細(xì)胞表面強(qiáng)表達(dá)，用于和其他小圓細(xì)胞腫瘤鑒別。CNS膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和室管膜瘤陽性。胰島細(xì)胞腫瘤陽性。,5. ALK-1,間變性大細(xì)胞淋巴瘤可見若干種染色體易位，幾乎

30、都累及定位于2號染色體的一種酪氨酸激酶—ALK（ALCL kinase）。t(2；5)(p23；q35)易位最常見，涉及的partner gene為NPM（nucleophosmin gene）。該易位產(chǎn)生融合基因NPM-ALK。正常ALK蛋白，表達(dá)限于中樞神經(jīng)系統(tǒng)（散在神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞）；正常淋巴細(xì)胞不表達(dá)。,單抗ALK-1可識別正常ALK蛋白 (200kD）和易位產(chǎn)生的不同融合蛋白，如NPM-ALK蛋白（80kD）。由

31、此用于診斷ALCL。各種易位導(dǎo)致ALK陽性分布不同,目前RT-PCR法所用引物為NPM-ALK特異，故不能檢測其它易位。因而免疫組化方法檢測ALK診斷ALCL更具優(yōu)勢。ALCL好發(fā)于兒童和青年。年長的ALCL病例t（2；5）和ALK常常陰性。ALK陽性的ALCL，預(yù)后佳。,存在問題：有報(bào)道， t（2；5）NPM/ALK可能無ALCL特異性，陽性可見于周圍T細(xì)胞淋巴瘤和T免疫母細(xì)胞性淋巴瘤（RT-PCR法）15-20%T/nul

32、l ALCL見ALK陰性。有人認(rèn)為這些病例更宜歸類為“周圍T細(xì)胞淋巴瘤，非特殊性，間變變異型（anaplastic variant）”,6. TIA-1（T細(xì)胞胞內(nèi)抗原-1）,17kD，一種胞漿顆粒相關(guān)蛋白，表達(dá)于有溶細(xì)胞潛能的細(xì)胞（CTL和NK細(xì)胞），又稱GMP-17。和perforin、granzyme B同屬細(xì)胞毒顆粒蛋白。與FAS（CD95）調(diào)節(jié)的凋亡有關(guān)造血細(xì)胞：90%CD16＋，50-80%CD8＋，<10%

33、CD4＋正常外周血淋巴細(xì)胞（+）,幾乎所有單核細(xì)胞和粒細(xì)胞（+） CD4＋活化T細(xì)胞株（＋）活化NK細(xì)胞株（＋） Con A活化的胸腺細(xì)胞（＋）B淋巴細(xì)胞和B細(xì)胞株（－）腫瘤：表達(dá)于細(xì)胞毒相關(guān)T細(xì)胞腫瘤和NK細(xì)胞腫瘤皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤（＋）腸病型腸道T細(xì)胞淋巴瘤（＋）,肝脾γδT細(xì)胞淋巴瘤（＋）很多γδ周圍T細(xì)胞腫瘤和NK細(xì)胞腫瘤都表達(dá)細(xì)胞毒顆粒蛋白TIA-1、perforin、和granzyme B，但肝脾γδT

34、細(xì)胞淋巴瘤僅有TIA-1 （＋）。間變性大細(xì)胞淋巴瘤（ ＋）有助于同霍奇金淋巴瘤的鑒別鼻及鼻型NK/T細(xì)胞淋巴瘤也有表達(dá),7. Perforin（穿孔素）,66kD或70kD，產(chǎn)生于溶細(xì)胞性淋巴細(xì)胞，并儲(chǔ)存于這些細(xì)胞的胞漿顆粒中。在靶細(xì)胞膜上形成跨膜孔道，導(dǎo)致膜完整性喪失，細(xì)胞裂解。其釋放過程和裂解功能依賴Ca2＋。參與細(xì)胞毒T細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡機(jī)制。人和鼠perforin基因定位于10號染色體。,表達(dá)具殺傷細(xì)胞特異性。大多數(shù)

35、NK細(xì)胞株，CD8＋CTL株（＋）人CD3－，CD56＋的NK細(xì)胞，CD3＋的大顆粒淋巴細(xì)胞和γδT細(xì)胞（＋）腫瘤皮下脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤（＋）肝脾γδT細(xì)胞淋巴瘤（－）表明瘤細(xì)胞功能上屬非成熟性γδT細(xì)胞，不能誘導(dǎo)凋亡和壞死，不能釋放細(xì)胞毒蛋白。間變性大細(xì)胞淋巴瘤（ ＋）有助于同霍奇金淋巴瘤的鑒別鼻及鼻型NK/T細(xì)胞淋巴瘤可有表達(dá),8. HLA-DR,人組織相容性復(fù)合物ClassII基因至少有四個(gè)區(qū)域：HLA-DP，

36、-DO，-DR一條α鏈，一條β鏈主要標(biāo)記B細(xì)胞，指狀突網(wǎng)狀細(xì)胞，郎罕氏細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。少數(shù)上皮細(xì)胞，活化T細(xì)胞和纖維母細(xì)胞樣細(xì)胞（可能相當(dāng)于樹狀突細(xì)胞）也有反應(yīng)。,胸腺：整個(gè)皮質(zhì)的上皮細(xì)胞網(wǎng)（＋）B和T非霍奇金淋巴瘤（＋）周圍血：B細(xì)胞和大部分單核細(xì)胞（＋）正常T細(xì)胞（－）活化T細(xì)胞（＋）,9. bcl-2,正常細(xì)胞：表達(dá)于非生發(fā)中心B細(xì)胞大多數(shù)T細(xì)胞漿細(xì)胞腫瘤：過度表達(dá)于大多數(shù)濾泡性淋巴瘤和一些彌漫性大B細(xì)

37、胞淋巴瘤也表達(dá)于很多其他淋巴瘤和白血病,10. Ki-67,表達(dá)于細(xì)胞周期G0期外的細(xì)胞與淋巴瘤分級有關(guān),11. CyclinD1,分D1、D2和D3亞型，有組織特異性，相互間同源性達(dá)53.1-63.5%,絕大多數(shù)套細(xì)胞淋巴瘤發(fā)生t（11；14）（q13；q32）易位，導(dǎo)致CCND1（bcl-1或PRAD1）基因過度表達(dá)，從而使cyclinD1蛋白表達(dá)過度。故套細(xì)胞淋巴瘤cyclinD1（＋），并可同陰性的濾泡性淋巴瘤和小淋巴細(xì)

38、胞性淋巴瘤/白血病鑒別。,12. CD25,T細(xì)胞生長因子受體或IL-2，單多肽鏈，分子量55kD，有時(shí)也稱為Tac抗原。該受體在活化的T細(xì)胞，HTLV-1＋和HTLV-2＋T細(xì)胞株強(qiáng)表達(dá)，活化B細(xì)胞弱表達(dá)。周圍淋巴組織T區(qū)和生發(fā)中心亮區(qū)淋巴細(xì)胞不同程度陽性。,生發(fā)中心巨噬細(xì)胞弱陽性，竇區(qū)巨噬細(xì)胞強(qiáng)陽性。胸腺：僅在髓質(zhì)見散在陽性細(xì)胞，皮質(zhì)陰性。正常周圍血CD25＋細(xì)胞<5%。,13. CD34,正常細(xì)胞：Progen

39、itor cell內(nèi)皮細(xì)胞腫瘤：一些粒細(xì)胞白血病一些淋巴母細(xì)胞性白血病,Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--RED,Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--DAB(1),Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--DAB(2),Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--DAB(3),Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--DAB(4),Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用

40、--DAB(5),Ventana自動(dòng)染色系統(tǒng)在淋巴瘤診斷中的應(yīng)用--DAB(6),Antibodies Used In The JCML Lab (1),Antibodies Used In The JCML Lab (2),Antibodies Used In The JCML Lab (3),Antibodies Used In The JCML Lab (4),Antibodies Used In The JCML Lab (5)

41、,Antibodies Used In The JCML Lab (6),Antibodies Used In The JCML Lab (7),Antibodies Used In The JCML Lab (8),Antibodies Used In The JCML Lab (9),二、淋巴瘤與反應(yīng)性增生的鑒別診斷及淋巴瘤的分類,,（一）淋巴瘤與反應(yīng)性增生的鑒別診斷,淋巴組織增生是良性還是惡性，可以非常容易也可以非常困難通過免疫

42、組化發(fā)現(xiàn)不成熟的免疫表型、失常的免疫表型或異常的免疫結(jié)構(gòu)可以幫助我們區(qū)分,1 濾泡性淋巴瘤和反應(yīng)性濾泡增生,免疫球蛋白輕鏈的多克隆型或單克隆型表達(dá)bcl-2為最有用的免疫染色，正常除濾泡中心細(xì)胞外，T和B細(xì)胞均陰性，在濾泡中心過表達(dá)則支持淋巴瘤的診斷。,,注意的是：有些反應(yīng)性增生濾泡內(nèi)有許多反應(yīng)性小 T細(xì)胞表達(dá)bcl-2,但可用CD3免疫染色對比；bcl-2陰性并不能完全排除濾泡性淋巴瘤（僅80～85%陽性）,,Ki-67

43、 低Ki-67指數(shù)常傾向于濾泡性淋巴瘤的診斷，但高Ki-67指數(shù)則不能做結(jié)論。,2 套細(xì)胞淋巴瘤和套區(qū)增生,CD5和CD43 增生套區(qū)CD20陽性外，同時(shí)表達(dá)CD5和CD43常提示為套細(xì)胞淋巴瘤 濾泡間大量CD20+B細(xì)胞提示濾泡間侵犯 CyclinD1支持套細(xì)胞淋巴瘤最有價(jià)值的標(biāo)記,3 邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤和單核樣B細(xì)胞增生,CD20/CD3 聚合或彌漫成片的B細(xì)胞傾向于淋巴瘤診斷 bcl-2蛋白 反應(yīng)

44、性單核樣B細(xì)胞常呈bcl陰性，而邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤呈陽性 免疫球蛋白輕鏈 多克隆型（增生）或單克隆型（淋巴瘤）,4 副皮質(zhì)區(qū)增生性質(zhì),CD20/CD3 如果副皮質(zhì)區(qū)有非常顯著的B細(xì)胞成分，則應(yīng)懷疑B細(xì)胞淋巴瘤 如懷疑霍奇金淋巴瘤和間變性大細(xì)胞淋巴瘤，可加用CD30、CD15和ALK,（二）淋巴瘤分類,淋巴瘤中只有少數(shù)類型，包括濾泡性淋巴瘤、邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤、粘膜相關(guān)淋巴組織型、小細(xì)胞性淋巴瘤，可單根據(jù)形態(tài)即可診

45、斷，而大多數(shù)其它類型淋巴瘤需要免疫組化才能正確診斷。,1 需用一組抗體,對鑒定正常細(xì)胞類型及其相關(guān)腫瘤最常用的抗體：B系 CD20T系 CD3，CD45RO， CD4， CD8NK系 CD56髓系 MPO濾泡中心細(xì)胞 CD10， bcl-6,,套區(qū)細(xì)胞 IgD不成熟前體細(xì)胞 Tdt漿細(xì)胞 CD138組織細(xì)胞 CD68濾泡性樹突狀細(xì)胞 CD21, CD35朗罕氏細(xì)胞 S-100， CD1a,2