TSOL18基因的克隆及其表達(dá)產(chǎn)物的抗原性與毒性研究.pdf

1、豬囊蟲?。–ysticercosis cellulosae）是由豬帶絳蟲（Taenia solium）的幼蟲——豬囊尾蚴（Cysticercus cellulosae）感染豬或人而引起的人畜共患寄生蟲病。是公認(rèn)的經(jīng)濟(jì)病之一。該病在我國流行廣泛，嚴(yán)重危害人體健康，并制約著養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展，因此有效預(yù)防控制和診斷豬囊蟲病是世界各國普遍關(guān)注的焦點(diǎn)。 本研究從孵化并激活的豬帶絳蟲六鉤蚴提取總RNA，利用RT-PCR技術(shù)成功克隆到豬帶絳蟲六鉤蚴

2、疫苗侯選基因Tso118基因，構(gòu)建原核表達(dá)載體。為明確Tso118重組抗原免疫小鼠后的抗體消長情況，將構(gòu)建的原核表達(dá)載體pGEX-4T-Tso118進(jìn)行了大量誘導(dǎo)表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠FF柱進(jìn)行了純化，采用SDS-PAGE和Western blot分別進(jìn)行了GST-Tso118重組蛋白的純度和活性分析；純化后的重組蛋白經(jīng)皮下接種免疫BALB/c小鼠，用ELISA法對免疫后不同時間的小鼠血清進(jìn)行了測定。結(jié)果顯示，GST-Tso118重

3、組蛋白主要以可溶性形式表達(dá)；可以被豬囊尾蚴陽性血清識別，ELISA檢測結(jié)果顯示在免疫后第7d能夠檢測到相應(yīng)的抗體，由于免疫劑量不同，在免疫后各組抗體水平的峰值出現(xiàn)的時間不同，但都集中在第28～49d，表明GST-Tso118重組蛋白具有良好的免疫原性和反應(yīng)原性。 對接種免疫的BALB/c小鼠進(jìn)行臨床觀察，并在不同時間采集小鼠的的內(nèi)臟器官和接種部位的肌肉組織，通過HE染色鏡檢，除接種部位肌肉組織在接種初期出現(xiàn)少量炎癥外，未發(fā)現(xiàn)明顯