山羊類胚胎干細(xì)胞的分離、克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文對影響山羊類胚胎干細(xì)胞（embryonicstemcell,ES細(xì)胞）和胚胎生殖細(xì)胞（embryonicgermcell,EG細(xì)胞）培養(yǎng)、分離、克隆、傳代效果的影響因素進(jìn)行了研究,方法一：采用昆白小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF）或山羊胚胎成纖維細(xì)胞（GEF）作為飼養(yǎng)層,高糖DMEM+10﹪NBS+20ng/mlLIF+10ng/mlSCF+0.1mMβ-巰基乙醇+100IU/ml青霉素+100IU/ml鏈霉素作為培養(yǎng)基,從5-6d胚胎

2、中分離出山羊類ES細(xì)胞,克隆傳至四代,其中第一代獲得類ES細(xì)胞集落30個（33.3﹪）,第二代獲得類ES細(xì)胞集落8個（8.9﹪）,第三代獲得類ES細(xì)胞集落3個（3.3﹪）,第四代獲得類ES細(xì)胞集落2個（2.2﹪）.該實(shí)驗(yàn)研究了胚齡、生長因子、飼養(yǎng)層對山羊ES細(xì)胞分離和克隆的影響.方法二：采用45-70d山羊胎兒的生殖腺與其同源成纖維細(xì)胞共培養(yǎng),高糖DMEM+7.5﹪NBS+7.5﹪FCS+20ng/mlLIF+10ng/mlSCF+0.

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