甲殼類水產(chǎn)品中呋喃西林代謝物—氨基脲的研究.pdf

1、氨基脲是一種聯(lián)胺類小分子化合物,被認為是禁用藥物呋喃西林的代謝產(chǎn)物。動物源性食品中氨基脲的殘留通常是由于在動物養(yǎng)殖過程中使用了呋喃西林后代謝產(chǎn)生的。目前,很多國家都以檢測呋喃西林代謝產(chǎn)物—氨基脲判斷是否在養(yǎng)殖過程中非法使用了呋喃西林,以達到對呋喃西林原藥監(jiān)控的目的。歐盟、日本及中國先后規(guī)定呋喃西林及代謝物在動物源性食品中不得檢出。然而,從近年來我國日本沼蝦監(jiān)督抽查和蝦蟹苗種抽檢過程中發(fā)現(xiàn),氨基脲超標(biāo)現(xiàn)象比較嚴(yán)重,尤其是日本沼蝦產(chǎn)品,陽性

2、率高達50％以上,使水產(chǎn)品的質(zhì)量備受質(zhì)疑,給養(yǎng)殖企業(yè)帶來經(jīng)濟損失。在一些非動物源性食品(如嬰兒食品、果汁、果醬、冰淇淋、布丁、酸奶及玻璃瓶包裝的食品)和甲殼類水產(chǎn)品(蝦和蟹)中均已檢出氨基脲。非動物源性食品中的氨基脲主要來源于發(fā)泡劑偶氮酰胺和食品添加劑卡拉膠的使用,而鮮活甲殼類水產(chǎn)品中的氨基脲則作為內(nèi)源性物質(zhì)存在于甲殼類水產(chǎn)動物體中,呋喃西林并非是氨基脲的唯一來源。
　　為了弄清甲殼類水產(chǎn)品中氨基脲本底特征,分布規(guī)律,定性方法準(zhǔn)確

3、性及來源,本實驗對典型甲殼類生物體中氨基脲進行測定,建立了高分辨質(zhì)譜的確證方法,并調(diào)查了氨基脲的外源性來源(呋喃西林用藥及環(huán)境污染),同時通過室內(nèi)養(yǎng)殖試驗初步研究了甲殼類水產(chǎn)生物—日本沼蝦自身產(chǎn)生氨基脲情況,此為重新評價水產(chǎn)品中氨基脲的殘留提供了技術(shù)支撐。
　　實驗研究結(jié)果如下:
　　1、采用液相串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜法,依照農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006的方法測定了11種甲殼類水產(chǎn)品中總氨基脲含量,該方法檢出限為0.25μg

4、/k g,定量限為0.μg/k g。加標(biāo)回收率在90.6%-99.8%之間,精密度小于10.00%。實驗結(jié)果表明,所有甲殼類水產(chǎn)品甲殼中的氨基脲含量在1.36-315.3μg/k g范圍內(nèi);肌肉中氨基脲含量在未檢出至11.87μg/k g范圍內(nèi),氨基脲含量在各甲殼類水產(chǎn)品中均呈現(xiàn)甲殼>頭部組織>肌肉的特點;以日本沼蝦為代表,研究不同環(huán)節(jié)的日本沼蝦生物體中氨基脲的分布特點及存在形態(tài)的差異,結(jié)果表明:日本沼蝦苗種中氨基脲含量在58.2-18

5、5.5μg/k g范圍內(nèi);養(yǎng)殖日本沼蝦氨基脲含量范圍為:肌肉:3.1-16.7μg/k g,頭部組織:5.0-124.4μg/k g,甲殼:232.6-370.4μg/k g;流通流通市場日本沼蝦中氨基脲含量范圍為:肌肉:3.4-6.6μg/k g,頭部組織:28.5-93.6μg/k g,甲殼:47.3-223.7μg/k g,天然水域野生日本沼蝦肌肉:3.1-15.3μg/k g,頭部組織:53.5-113.6μg/k g,甲殼:5

6、8.6-259.0μg/k g,氨基脲含量分布特征與流通環(huán)節(jié)無顯著差異;通過對比分析羅氏沼蝦和日本沼蝦組織中氨基脲的存在形態(tài)發(fā)現(xiàn)肌肉組織中氨基脲主要以游離態(tài)形式存在,結(jié)合態(tài)氨基脲比例低于50%,而甲殼組織中主要以結(jié)合態(tài)形式存在,比例大于70%。
　　2、運用高分辨質(zhì)譜技術(shù)-液相串聯(lián)靜電場軌道阱質(zhì)譜對典型的樣品進行了再定性研究。建立了對甲殼類水產(chǎn)品中氨基脲的高分辨定性研究方法,實驗結(jié)果表明,氨基脲的精確分子質(zhì)量數(shù)為:母離子:209.

7、06714Da,碎片離子:166.06110 Da和192.04036 Da,質(zhì)量精度2 pp m,斑節(jié)對蝦殼,鱟殼,日本沼蝦和殼,南美白對蝦,羅氏沼蝦肉等甲殼類水產(chǎn)品組織樣品中氨基脲的母離子和碎片子離子的質(zhì)量數(shù)在氨基脲標(biāo)準(zhǔn)品確信質(zhì)量精度范圍內(nèi),離子比例和保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品一致,再定性結(jié)果為陽性。
　　3、采用高效液相色譜建立了水產(chǎn)品中呋喃西林藥物的檢測方法,方法檢出限為2.5μg/k g,定量限為5μg/k g,加標(biāo)回收率84.8

8、-111.5%之間,精密度小于12.7%。對來自養(yǎng)殖基地的氨基脲陽性顯著的日本沼蝦樣品進行用藥調(diào)查,用藥調(diào)查結(jié)果表明:養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖投入品中未檢出呋喃西林藥物殘留;采用高效液相色譜質(zhì)譜技術(shù)建立了水體中氨基脲的檢測方法,方法檢出限為0.5 ng/L,定量限為1 ng/L,加標(biāo)回收率為86.1-95.2%,精密度小于6.2%,養(yǎng)殖水體及環(huán)境水體中氨基脲污染狀況調(diào)查結(jié)果表明,部分水體含有痕量氨基脲(洞庭湖、天津于橋水庫與安徽晨光村養(yǎng)殖基地),

9、其他地區(qū)未檢出氨基脲。通過以上調(diào)查結(jié)果顯示,養(yǎng)殖基地的氨基脲陽性顯著的日本沼蝦樣品并未使用過非呋喃西林用藥,也未接觸水域環(huán)境污染。
　　4、以日本沼蝦為代表,研究幼體發(fā)育階段的甲殼類水產(chǎn)品中自身產(chǎn)生氨基脲的可能性,室內(nèi)孵化及培育實驗表明,日本沼蝦的初孵幼體自身攜帶氨基脲,含量為3.48μg/k g,并在必要生長條件(存在動物性餌料)下,氨基脲含量有自然增長趨勢,達到仔蝦階段,含量為14.72±1.36μg/k g.實驗結(jié)果顯示,甲