2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩71頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、雞白痢沙門氏菌是腸桿菌科沙門氏菌屬的成員,對禽類具有高度的適應(yīng)性和專嗜性,是目前危害世界養(yǎng)雞業(yè)的病原之一。近年來,雞白痢沙門氏菌的耐藥性逐漸增強,急需開發(fā)安全、高效、種屬特異的抗菌藥物。
   必需基因是維持一個細胞的生命活動所必不可少的基因,去除一個必需基因或者使其不表達或產(chǎn)物失活均會使一個生物體無法繼續(xù)存活,所以微生物必需基因的翻譯產(chǎn)物就有可能成為抗細菌藥物的靶點。
   本實驗采用用隨機PCR的方法獲得雞白痢沙門氏

2、菌基因組的隨機片段,將隨機片段與pIDM1質(zhì)粒連接,該質(zhì)粒含有一個溫度敏感復(fù)制起始蛋白RepAts,導(dǎo)致其在30℃能復(fù)制,而在37℃不能復(fù)制。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到大腸桿菌TG1,共獲得約5×105個克隆。肉眼目測藍白斑比例約為1:9,隨機挑取菌落,應(yīng)用PCR方法進行復(fù)核,結(jié)果文庫目的片段的插入率為90%(9/10)。將合并所有克隆抽提的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入雞白痢沙門氏菌,得到約5×105個克隆,隨機挑取白色菌落,接種于含四環(huán)素的培養(yǎng)基中30℃培養(yǎng)30h,

3、作適當稀釋后涂布于四環(huán)素平板,37℃培養(yǎng)48h,重復(fù)驗證平板上有無細菌生長,以判定插入片段的必需性。
   如果37℃平板上有細菌生長,則該菌株所含質(zhì)粒的克隆片段為非必需基因片段,選取篩選的非必需基因gidA,設(shè)計引物擴增其不同長度的片段,與pIDM-T連接后轉(zhuǎn)入大腸桿菌TG1,抽提質(zhì)粒轉(zhuǎn)入本菌株,轉(zhuǎn)換溫度培養(yǎng)測定不同片段的IPC值;反之,37℃平板上無細菌生長,則該菌株所含質(zhì)粒的插入片段為必需基因部分或空載體。實驗從12384

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論