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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)對(duì)來(lái)自呼和浩特市30日齡仔豬腸道中分離得到的32株乳酸菌中隨機(jī)選出兩株乳酸菌分別命名為L(zhǎng)Z1、LZ2,并對(duì)其進(jìn)行細(xì)菌學(xué)、生化以及16S rRNA分子生物學(xué)鑒定。以及耐酸、耐膽鹽的試驗(yàn),并對(duì)其活菌體以及代謝物進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)。以小白鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,以致病性大腸桿菌K88菌株作為指示菌,用ERIC-PCR方法檢測(cè)乳酸菌LZ1、LZ2體內(nèi)抗感染試驗(yàn),驗(yàn)證LZ1、LZ2對(duì)指示菌的抑菌效果;用不同劑量的乳酸菌LZ1、LZ2灌服小鼠,在不同時(shí)間
2、分別用ELISA方法和流式細(xì)胞儀測(cè)定小白鼠血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量變化以及外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD28+T細(xì)胞的生長(zhǎng)規(guī)律。
研究結(jié)果表明,分離的乳酸菌LZ1、LZ2用傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)鑒定和分子生物學(xué)16SrRNA的鑒定相一致。乳酸菌活菌體沒(méi)有抑菌活性,而其代謝產(chǎn)物都有較強(qiáng)的抑菌特性,但pH值影響抑菌活性較大,隨著pH值的降低抑菌活性有升高的趨勢(shì),在弱酸或者中性環(huán)境下失去抑菌活性,胃蛋白
3、酶和胰蛋白酶對(duì)代謝產(chǎn)物的影響不大。
在體內(nèi)抗感染的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在停止灌服菌液的第5d,能在小鼠的腸道內(nèi)分離出所飼喂的乳酸菌并且不含有致病菌K88。
LZ1、LZ2低、中、高劑量組在第10,20,30天時(shí)血清中的IL-2含量極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)。LZ1、 LZ2低、中劑量組在第10,20,30天時(shí)血清中的IL-4含量高于對(duì)照組,但差異不顯著(P>0.05)。LZ1低、中劑量組在第10,20,30天時(shí)血清中的I
4、FN-γ含量極顯著高于對(duì)照組(p<0.01); LZ2低劑量組在10,20,30天時(shí)血清中的IFN-γ含量顯著高于對(duì)照組(p<0.05)。LZ1低、高劑量組在第10,20,30天時(shí)血清中的TNF-旺含量極顯著低于對(duì)照組(p<0.01)。LZ2低劑量組在第10,20天時(shí)血清中的TNF-α含量極顯著高于對(duì)照組(p<0.01)。
LZ1低、中、高劑量組在第10時(shí)CD3+T細(xì)胞含量極顯著低于對(duì)照組(p<0.01);LZ2中、高劑量組在
5、第20,30天時(shí)CD3+T細(xì)胞含量極顯著低于對(duì)照組(p<0.01)。LZ1中劑量組在第10,20,30天時(shí)CD4+T細(xì)胞含量顯著低于對(duì)照組(p<0.05); LZ2中、高劑量組在第10,30天時(shí)CD4+T細(xì)胞含量顯著低于對(duì)照組(p<0.05)。LZ1低、高劑量組在第10天時(shí)CD8+T細(xì)胞含量顯著低于對(duì)照組(p<0.05); LZ2低、中、高劑量組在第10,20天時(shí)CD8+T細(xì)胞含量極顯著低于對(duì)照組(p<0.01)。LZ1、LZ2低、中、
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