雞腸道乳酸菌的分離鑒定及其益生作用的研究.pdf

1、雞腸道乳酸菌的分離鑒定及其益生作用的研究單位符號縮寫英文s e c o n dmi n u t eh o u rd a yg r a mm i l l i g r a ml i t e rmi l l i l i t e rmi l l i mo lmi l l i me t e rv o l u me / v o l u me r a t i ow e i g h t / v o l u m e r a t i of i g u

2、r ec a r b o nc o l o n y f o r m i n g u n i tl a c t i c a c i d b a c t e r i as p e c i e smo l / l i t e r簡寫s1mlmmo l〔 口 刃 nv / vw/ vf i g .C O zC F UL A BS p .M漢語名稱秒分小時天克毫克升毫升毫摩爾數(shù)毫米體積比重量體積比圖二氧化碳菌落形成單位乳酸菌種摩爾每升n

3、， ，n ‘ h d 口 D n中文摘要雞腸道乳酸菌的分離鑒定及其益生作用的 研究摘 要為了 開 發(fā)適用于 雞的 益生素， 進(jìn) 一步闡明 乳酸菌 對雞的 益生 作用， 本研究 從雞腸道食糜中 分離 鑒定出 1 2 株乳酸菌， 并對其生長曲 線、 產(chǎn)酸、 抑菌、胃 腸道因 素耐受等特性進(jìn)行了 研究， 最后篩 選出3 株生長 速度快， 其它性能 也較好的乳酸桿菌 制成活菌 制劑用于 生產(chǎn)實 驗以 測定其 應(yīng)用效果. 整個實 驗分為四 部分:

4、第一 部分: 從肉 雞空 腸內(nèi) 容物中 分離 到 1 2 株菌， 均為 革蘭氏陽 性菌， 其中8 株乳桿菌、 4 株腸球菌. 將乳桿菌 和腸球菌分別進(jìn)行種的鑒定， 得出K 9 為嗜酸乳桿菌;D 1 7 為 德氏 乳 桿菌 乳亞種; C I 為 腸乳桿菌; C 1 2 . D l l 為 德氏 乳桿菌 德氏亞 種不同 菌株;D 1 4為嗜淀粉乳桿菌;C 2為果 糖乳桿菌; D 9 為戊糖乳桿菌;K 6 . D 2 1 . D l 和

5、D 7 基本與糞 腸球菌 相同.1 2 株菌中， K 9 . D 1 7 和C 1 的生長速度顯著高于其他菌 株( p < 0 . 0 5 ) 。第 二部分:用體外厭氧發(fā)酵技術(shù) 對從肉 雞空 腸分離的 1 2株乳酸菌產(chǎn)酸能力進(jìn)行了 比 較， 并 對其抑菌 特性及其產(chǎn)生的 抑菌物 質(zhì)的 部分 理化特性進(jìn) 行研究。結(jié)果 表明，發(fā)酵開 始時K 6 產(chǎn)酸 速度最快，1 2 h 時 乳酸濃 度達(dá) 到最高 ， 為3 5 . 6 8 a m

6、 m o l · L - 1 ， 其 次為” 和C 1 ， 為3 3 . 0 3 和3 2 . 0 5 m m o l · L - 1 ; D 1 7 . D 1 1 . D 1 4 . C 2 1 和C 1 2 產(chǎn)酸 能力1 2 h 后繼 續(xù) 上 升， 2 4 h時 乳 酸濃 度 均 在 4 0 m m o l “ L “ 1 以 上， 其中 D 1 7的 最高 ， 為5 2 . 4 4 m m o l

7、 “ L “ ; 而C 1 的 終 末 乳 酸 濃 度最高 ， 為6 2 . 9 4 m m o 1 - L - ' . 在 抑菌 實 驗中 ，D 1 7 . K 9和 C 1 對大 腸桿菌、沙門氏菌和葡萄 球菌的 抑制作用顯著高于 其它菌 株( P < 0 . 0 5 ) ， 排除酸后的結(jié)果表明， 抑菌 作用仍然 保持 9 2 % 以上， 說明3菌 株的 抑菌作用 主 要來自 于 產(chǎn)生的 乳酸;它 們產(chǎn)生的 抑

8、菌 物 質(zhì) 對熱 和蛋白 酶均不 敏感.第 三 部 分 : 研究了 乳酸 桿菌C l . D 1 7 和K 9 對 不 同p H 、 不同 濃 度 膽 鹽 及 對不 同溫 度的 耐 受 能 力， 同 時 還 研究了3 菌 株 對不 同 杭 生 素的 耐 受 能 力 。 結(jié)果 表明 ， 以p H 6 . 4 緩 沖 液 處 理 組 為 對 照 ， C 1 菌 株 對 低p H 值 的 耐 受 性 較 好 ， 在p H 值為2 . 0 時

9、 ， 能 夠 存活3 h， 而D 1 7 和K 9 兩 菌 株 對 低p H 植的 耐 受 性 較 差， 在p H 值為2 . 0 時， 僅能 夠 存活0 . 5 h : 在p H 2 . 5 時， K 9 菌 株 可以 存 活3 h ， 而D 1 7 菌 株 僅能 存活2 h ; 隨 著p H 值的 升 高 ， C 1 . D 1 7 和K 9 3 菌 株 的 存 活 率 亦 提高 ， 在p H 3 . 5 、 p H 4 條

10、 件 下 ， 經(jīng)3 h 處理后， C 1 . D 1 7 和K 9 3 菌 株的活菌 數(shù)高于對照組的0 . 1 %。 以不含膽鹽處理組為 對照，0 . 0 8 % 的膽盆濃 度處理 1 0 m i n 后， C 1 存活數(shù)約為對照組的3 0 %, D 1 7 和K 9 兩菌 株的存活 數(shù)低于 對照 組的1 0 % ， 膽鹽濃 度為0 . 4 % 時， C 1 菌 株的 存活 數(shù)由1 護(hù)降為1 護(hù) ，D 1 7 菌 株存活 數(shù)由1