青貯源乳酸菌培養(yǎng)工藝及發(fā)酵效果的研究.pdf

1、本論文從青貯窖中篩選了2株乳酸菌,通過16SrDNA的方法對其進行分子生物學鑒定,并利用青貯發(fā)酵罐全面評價這兩株乳酸菌對全株玉米青貯發(fā)酵進程的影響,最后通過飼養(yǎng)試驗研究其對奶牛生產性能的影響,旨在開發(fā)一種青貯飼料接種劑,為生產應用提供科學依據。具體包括以下三個部分:
　　 試驗一響應面法優(yōu)化青貯飼料乳酸菌的培養(yǎng)條件
　　 從青貯飼料中篩選得到2株乳酸菌,經16SrDNA的方法對其進行分子生物學鑒定,兩株乳酸菌分別為植物乳

2、桿菌(GLP01),該菌株與Gen Bank中的Lactobacillus plantarum strain KLDS(登錄號:EU626013.1)相似度為98％；發(fā)酵乳桿菌(BLF01),與Gen Bank中的Lactobacillusfermentum strain44197(登錄號:DQ779203.1)相似度為99％。通過單因素試驗設計研究了培養(yǎng)基組成(碳源、氮源)和培養(yǎng)條件(溫度、接種量、起始pn等)對GLP01和BLF01

3、生長繁殖的影響；采用二次響應面分析方法對其培養(yǎng)條件進行優(yōu)化,得到生長模型以及取得該模型最優(yōu)值時各因素的水平。試驗結果表明,培養(yǎng)GLP01的最適碳源是果糖,最佳氮源是酵母粉,最佳培養(yǎng)條件是起始pn5.47、培養(yǎng)溫度35.3℃、接種量8.16％；培養(yǎng)BLF01的最適碳源是乳糖,最佳氮源是酵母粉,最佳培養(yǎng)條件是起始pn6.5、培養(yǎng)溫度35℃、接種量1％。
　　 試驗二不同微生物接種劑對全株玉米青貯發(fā)酵品質的影響
　　 試驗以蠟

4、熟期全株玉米為原料,設4個處理組,分別為:對照組(CK)、植物乳桿菌組(G)、發(fā)酵乳桿菌組(B)以及植物乳桿菌+布氏乳桿菌組(LG),其中CK組不添加接種劑、G組添加植物乳桿菌105 cfu／gFM,B組添加發(fā)酵乳桿菌也為105 cfu／g FM,LG組添加的植物乳桿菌和布氏乳桿菌均為105 cfu／gFM。青貯飼料發(fā)酵過程中,分別于第1、3、5、7、9、12、15、30、45、60、90天開罐取樣,進行青貯品質檢測、化學成分分析和微生

5、物檢測。結果顯示,本試驗中所用的植物乳桿菌和發(fā)酵乳桿菌均能有效改變全株玉米青貯的發(fā)酵過程,即能夠主導全株玉米青貯發(fā)酵。添加植物乳桿菌能夠有效促進全株玉米青貯中乳酸菌的生長繁殖(P<0.05),同時抑制真菌的活動(P<0.05),從而顯著降低青貯飼料的pH值(P<0.05),同時提高乳乙酸的生成比值,使得發(fā)酵進程向同型發(fā)酵轉變。發(fā)酵乳桿菌也屬于典型的同型發(fā)酵乳酸菌,而且產酸能力顯著高于其他各組(P<0.05),其乳酸的生成量比其他組高出1

6、3.2％～46.36％:在發(fā)酵過程中,該組的pH值顯著低于其他組(P<0.05),為3.68。但是,正因為發(fā)酵乳桿菌的強產酸能力,抑制了大部分乳酸菌的生長,卻為可利用乳酸的酵母菌提供了有利環(huán)境。植物乳桿菌與布氏乳桿菌聯(lián)合應用,能夠促進乳酸菌的生長,顯著降低全株玉米青貯的pH值,同時抑制真菌的生長繁殖活動。但是,該組的乳乙酸生成比值是2.01,為各組中最小,屬于典型的異型發(fā)酵。
　　 試驗三接種不同乳酸菌的全株玉米青貯對奶牛生產性

7、能的影響
　　 以全株玉米為青貯原料,設3個處理組,分別為對照組、植物乳桿菌組和布氏乳桿菌組,其中對照組不添加接種劑,其他兩個組添加的菌種量均為105 cfu／gFM。青貯方式為地上水泥青貯窖,兩個月后開封。同時,選取21頭中國荷斯坦經產奶牛,隨機分成3組,研究不同處理的全株玉米青貯對泌乳牛產奶量和乳成分的影響。結果表明:以4％標準乳計,與對照組相比,植物乳桿菌組產奶量平均每日每頭增加2.21 kg,布氏乳桿菌組增加0.3 kg