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文檔簡介
1、本研究以酸棗試管苗葉片、阜平大棗無芽莖段為試材,對(duì)影響葉片離體再生不定芽的因素如基本培養(yǎng)基成分、生長調(diào)節(jié)劑種類及濃度配比、接種材料類型、培養(yǎng)方式以及培養(yǎng)條件等進(jìn)行了系統(tǒng)研究,成功建立了酸棗的離體葉片再生體系;還研究了在MS基本培養(yǎng)基中,滅菌時(shí)間、暗培養(yǎng)時(shí)間以及植物生長調(diào)節(jié)劑對(duì)阜平大棗無芽莖段再生不定芽的影響。
主要研究結(jié)果如下:
1.獲得高效的酸棗葉片再生體系:
(1)通過對(duì)不同培養(yǎng)基的篩選,確
2、定MS或WPM是適合酸棗離體葉片再生的基本培養(yǎng)基。碳源為30g/L的蔗糖。
(2)不同植物生長調(diào)節(jié)劑對(duì)葉片再生影響很大。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞分裂素6-BA和TDZ都可以誘導(dǎo)酸棗葉片再生不定芽,但6-BA誘導(dǎo)的再生率非常低,故誘導(dǎo)酸棗葉片再生的細(xì)胞分裂素宜選用TDZ,濃度為0.5mg/L;低濃度的生長素可以誘導(dǎo)葉片再生不定芽,誘導(dǎo)酸棗離體葉片再生不定芽的生長素為IBA 0.10mg/L。
(3)通過研究發(fā)現(xiàn),繼代10
3、~15代、葉齡30~40d的葉片再生效果較好,再生植株和繼代植株的葉片再生效果無顯著性差異。
(4)通過對(duì)光周期的研究發(fā)現(xiàn),暗培養(yǎng)對(duì)葉片再生不定芽是必要的,經(jīng)過暗培養(yǎng)處理可顯著提高葉片再生率,隨著每天光照時(shí)間的增長,再生率有所下降,光照時(shí)間越長,愈傷組織增長的越多。
(5)通過在培養(yǎng)基中附加一定濃度的AgNO3、胰蛋白胨、蛋白胨,發(fā)現(xiàn)附加1~2 mg/L AgNO3、500~1000 mg/L胰蛋白胨對(duì)提高葉
4、片不定芽的再生率有利,蛋白胨不能促進(jìn)酸棗葉片再生。
(6)本試驗(yàn)采用兩步培養(yǎng)法,首先將葉片接種在分化培養(yǎng)基上,暗培養(yǎng)21天,然后轉(zhuǎn)到MS基本培養(yǎng)基上誘導(dǎo)不定芽再生,此方法中葉片不容易變褐,不定芽伸長較快,且不容易玻璃化,再生率比一步培養(yǎng)法顯著提高。
2.MS+6-BA 0.5mg/L +IBA0.1mg/L+GA30.1 mg/L是適合酸棗再生植株伸長的培養(yǎng)基。
3.MS+6-BA 0.5mg/
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