不同氨基酸模式對奶牛α-酪蛋白合成和激素分泌及脂肪合成影響的研究.pdf

1、本論文以泌乳奶牛乳腺組織為原科，采用組織塊培養(yǎng)技術(shù)，研究培養(yǎng)基內(nèi)不周氮基酸模式對奶牛乳腺上皮細胞的增殖、α—酪蛋白合成、激素（IGF—Ⅰ、GH、PRL）和甘油三酯（TG）分泌以及脂肪代謝合成關(guān)鍵酶（FAS、ME、G—6—PDH）活性的影響。試驗結(jié)果如下： （1）利用氨基酸平衡指數(shù)調(diào)整三種氨基酸（Met、Lys.Leu）比例設(shè)計不同氨基酸指數(shù)的試驗組（共6個組），采用組織培養(yǎng)法體外培養(yǎng)乳腺組織15天。結(jié)果表明：隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加，

2、細胞數(shù)量逐漸增加，第十天各組細胞數(shù)量分別達到最高，乳腺上皮細胞生長曲線呈“S”形。不同氨基酸模式對乳腺細胞生長有顯著影響，與氨基酸不平衡組相比，氨基酸平衡、理想組更能促進細胞生長，各組間差異顯著。 （2）第九、十天分別取樣，采用SDS—PAGE和ELISA法測α—酪蛋白分泌量。結(jié)果表明：培養(yǎng)生成的乳腺上皮細胞，具有正常分泌乳蛋白功能：且不同氨基酸模式對乳腺細胞α—酪蛋白分泌有顯著影響，試驗組比對照組高，其中第Ⅰ組最高，且各組間差

3、異顯著。這表明培養(yǎng)基內(nèi)不同氨基酸模式可以影響乳腺上皮細胞的數(shù)量，進而調(diào)控乳蛋白的合成。 （3）第九、十天分別取樣，采用放免法測激素分泌量。試驗表明：不周氨基酸模式下，乳腺上皮細胞可分泌IGF—Ⅰ、GH、PRL三種激素；且對三種激素分泌量影響差異顯著，其中第Ⅴ組為最高且顯著高于其它組，這表明激素的合成與分泌受培養(yǎng)基內(nèi)不同氨基酸模式的調(diào)控，進而說明培養(yǎng)基內(nèi)氨基酸平衡狀態(tài)可以直接影響激素的合成與分泌。 （4）第九、十天分別取樣

4、，采用直接連續(xù)監(jiān)測法酶活測定技術(shù)測定脂肪代謝合成關(guān)鍵酶的活性。試驗發(fā)現(xiàn)：不同氨基酸模式對乳腺細胞培養(yǎng)物中脂肪代謝合成關(guān)鍵酶（FAS、ME、G—6—PDH）活性和甘油三酯（TG）分泌產(chǎn)生了顯著影響，通過提高脂肪代謝合成關(guān)鍵酶的活性，提高了甘油三酯的分泌進而促進脂肪的合成。 綜上所述：在培養(yǎng)基內(nèi)不同氨基酸模式作用下，乳腺上皮細胞數(shù)量在第九天或第十天達到最多，同時激素（IGF—Ⅰ、GH、PRL）和甘油三酯（TG）分泌量、α—酪蛋白合成