緊密連接蛋白、上皮細(xì)胞鈣粘蛋白、腫瘤壞死因子在犬乳腺腫瘤組織中的表達(dá).pdf

1、在獸醫(yī)臨床中，母犬乳腺腫瘤是一種常見的腫瘤疾病。犬乳腺腫瘤在病因、組織學(xué)特性、治療方法及預(yù)后等方面與人乳腺腫瘤很相似。因此，犬的自發(fā)性腫瘤可作為人醫(yī)乳腺腫瘤的模型。本試驗(yàn)采用病理組織學(xué)、免疫組化、分子生物學(xué)等方法，就與腫瘤生長發(fā)育密切相關(guān)的緊密連接蛋白（Claudin-1）、上皮細(xì)胞鈣粘蛋白（E-cadherin）、腫瘤壞死因子（TNF-α）等在自然發(fā)生的乳腺腫瘤組織中的表達(dá)及其意義進(jìn)行研究，以期對(duì)臨床犬乳腺腫瘤疾病的診斷與治療提供理論

2、依據(jù)。
　　 1.Claudin-1、E-cadherin在犬乳腺腫瘤組織中的表達(dá)
　　 本試驗(yàn)對(duì)外科手術(shù)摘除的10個(gè)疑似犬乳腺腫瘤樣本采用病理組織學(xué)觀察進(jìn)行分類后，利用T抗Claudin-1和E-cadherin抗體對(duì)病料組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測，并對(duì)抗體表達(dá)和病理類型進(jìn)行比較。結(jié)果表明，在所檢的乳腺腫瘤中，惡性乳腺腫瘤占60％，其中乳腺浸潤性導(dǎo)管癌占40％；良性腫瘤占20％，而乳腺非腫瘤性疾病占20％。Claudin

3、-1多克隆抗體在非腫瘤組織和良性乳腺腫瘤組織中的表達(dá)明顯高于惡性乳腺腫瘤組織，差異極顯著；Claudin-1蛋白在乳腺癌組織中表達(dá)的陽性率為（2/6，33.3％），顯著低于正常乳腺組織100.0％（2/2）；惡性乳腺組織中E-cadherin表達(dá)的陽性率為33.3％（2/6），明顯低于正常乳腺組織100％（2/2）。Claudin-1和E-cadherin在惡性腫瘤中均表達(dá)下調(diào)。
　　 2.酶聯(lián)免疫吸附法測定乳腺腫瘤患犬血清中T

4、NF-α的變化
　　 TNF-α與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系，目前還沒有相關(guān)的研究。本試驗(yàn)使用ELISA方法系統(tǒng)檢測了拉布拉多、史賓格、德國牧羊犬這三個(gè)品種母犬（均選取3-5歲）在健康狀態(tài)下的TNF-α濃度，以及乳腺腫瘤患犬血清中TNF-α濃度。試驗(yàn)結(jié)果顯示，三個(gè)品種健康母犬血清TNF-α濃度范圍（21.35±4.96 pg/ml），品種之間沒有顯著性差異。犬種對(duì)血清中TNF-α含量變化影響不大，（P>0.05）無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；

5、但乳腺腫瘤患犬血清中TNF-α含量明顯高于健康犬血清中TNF-α含量。
　　 3.PCR法檢測Claudin-1、E-cadherin、TNF-α的基因表達(dá)
　　 本試驗(yàn)建立了PCR法檢測Claudin-1、E-cadherin、TNF-α的基因表達(dá)。從分子生物學(xué)方面檢測犬正常乳腺與乳腺腫瘤組織中Claudin-1，E-cadherin、的基因表達(dá)差異，以及血清中TNF-α的基因表達(dá)。結(jié)果與試驗(yàn)一、二中結(jié)論基本一致，Cl