三種昆蟲(chóng)病原線(xiàn)蟲(chóng)Enolase基因的克隆、原核表達(dá)及功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文三種昆蟲(chóng)病原線(xiàn)蟲(chóng)Enolase基因的克隆、原核表達(dá)及功能研究姓名：高秋峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：農(nóng)藥學(xué)指導(dǎo)教師：吳珍泉邱德文20100401福建農(nóng)林大學(xué)2010屆碩士學(xué)位論文AbstractEntomopathogenienematodes(EPNs)isakindofimportantfactorinpestbiocontr01Nowadays，ithasbeenusedwidelyinagricultural

2、productionEnolaseisakeyenzymeinglycolyticpathwayHoweverrecentstudiesshowedthatenolasewasamultifunctionalprotein，andparticipatedintheinvasionofsomepathogensGenecloning，expressionandfunctionalresearchofenolasefromthreekind

3、sofEPNs，includedSteinernemafeltiae，SteinernemacarpocapsaeandHeterorhabditisindica，werecarriedout1UsingRTPCRandRACRtechnique，thefull—lengthenolaseeDNAfromthreeEPNswereclonedEnolasegenefrom＆feltiaeWas1453bpinlength，include

4、danopenreadingflame(oPt)of131lbp，encoding436aminoacidresidues；Theisoelectricpointandmolecularweightoftheproteinwerepredictedas567and4730982，respectively；GenBankaccession110HM067751Enolasegenefrom＆carpocapsaeWas1405bpinle

5、ngth，includedanopenreadingframe(oPt)of1311bp，encoding436aminoacidresidues；Theisoelectricpointandmolecularweightoftheproteinwerepredictedas559and4715461，respectively；GenBankaccessionnoHM067750Enolasegenefrom＆feltiaeWas161

6、5bpinlength，includedanopenreadingframe(ORE)of1305bp，encoding436aminoacidresidues；Theisoelectricpointandmolecularweightoftheproteinwergpredictedas543and4726863，respectively；GenBankaccessionnoHM067750Multiplesequencealignm

7、entindicatedthatenolasefromthreeEPNssharedmorethan75％identitywiththoseofothersixnematodespeciesattheaminoacidlevel，showinghighhomologyamongthemPhylogenetictreeindicatedthat11indicahastheclosestrelationshipwithCbriggsae，S

8、feltiaeandscarpocapsaehavetheclosestrelationshipeachother2ThreeenolasegeneswereclonedintopGEX6P一1toconstructGSTTagfusionexpressionvectors，andwereexpressedsuccessfullyinEscherichiacoli，respectivelyAndthenrecombinantprotei

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