中國(guó)荷斯坦牛PRL和POU1F1基因多態(tài)性及其與產(chǎn)奶性狀的關(guān)系研究.pdf

1、垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子(POU1F1)是POU家族成員之一，激活促甲狀腺素(thyrotropin，TSH)、催乳素(prolactin，PRL)和生長(zhǎng)激素(growth hormone，GH)基因的表達(dá)，在垂體細(xì)胞的分化和增殖中也發(fā)揮作用。POU1F1發(fā)生突變會(huì)導(dǎo)致垂體前葉發(fā)育不全。POU1F1被抑制后導(dǎo)致 PRL和GH的表達(dá)顯著減少，同時(shí) PRL和GH細(xì)胞系的增殖減少。由于PRL和GH在乳腺的發(fā)育和產(chǎn)奶量方面發(fā)揮必不可少的作用，因而 P

2、OU1F1的變異也可作為產(chǎn)量性狀的一個(gè)遺傳標(biāo)記。催乳素(PRL)有300多種不同的生物功能，在哺乳動(dòng)物體內(nèi)，催乳素對(duì)乳腺發(fā)育與泌乳、性腺發(fā)育、機(jī)體免疫功能、機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)、體細(xì)胞的分裂與增值等相關(guān)功能有一定的調(diào)節(jié)作用。人們把 PRL和POU1F1視為與產(chǎn)奶性狀相關(guān)的重要候選基因。PRL和POU1F1上的某些 SNPs可能直接與奶牛的產(chǎn)奶性狀相關(guān)。
　　本研究試圖發(fā)現(xiàn) PRL和POU1F1上的新的SNP并研究其與奶牛的產(chǎn)奶性狀是否相關(guān)

3、，并觀察 PRL和POU1F1上的SNP是否具有相關(guān)性。
　　本研究的研究對(duì)象為1000頭中國(guó)荷斯坦奶牛的DNA樣品。使用巢式 PCR擴(kuò)增引物，通過PCR-RFLP方法或 CRS-RFLP方法對(duì)所有樣本進(jìn)行基因分型。使用Primer Premier5.0和
　　Oligo5.0軟件進(jìn)行引物設(shè)計(jì)?；蜃儺惻c產(chǎn)奶性狀之間的關(guān)聯(lián)性應(yīng)用SAS8。1統(tǒng)計(jì)軟件，利用最小二乘法擬合線性模型進(jìn)行分析。
　　在POU1F1的第二外顯子1

4、178位點(diǎn)上發(fā)現(xiàn) G/C突變，可用Hha1進(jìn)行酶切，酶切分型為GG、GC、CC三種基因型，在979頭牛中，GG基因型個(gè)體占93.054％，GC型占2.554％，CC型占4392％，G基因頻率為94.331％，C基因頻率為5.669％。產(chǎn)奶量、總?cè)橹涂偟鞍走@三項(xiàng)指標(biāo)中三種基因型之間均存在極顯著差異，GC>GG>CC(P＜0.01)。乳脂率和乳蛋白率在三種基因型之間則不存在顯著差異(P＞0.05)。
　　在PRL的5側(cè)翼調(diào)控區(qū)(Ge

5、nBank上登錄號(hào)為X16641.1)發(fā)現(xiàn)了兩個(gè) SNP，在906位點(diǎn)處存在A/G突變，1134位點(diǎn)存在A/T突變。906位點(diǎn)用Hha1進(jìn)行酶切，得到三種基因型:AA、AG、GG，在719頭牛中，AA基因型個(gè)體占32.80％，AG型占46.12％，GG型占21.07％，A基因頻率為55.76％，G基因頻率為44.14％。AA基因型產(chǎn)奶量顯著大于GG基因型(P＜0.05)、但 GG基因型乳蛋白率顯著大于AA型(P＜0.05)，在總?cè)橹涂?/p>

6、蛋白這兩項(xiàng)指標(biāo)中GG和AA基因型之間均不存在顯著差異(P＞0.05)。1134位點(diǎn)用EcoRV進(jìn)行酶切，得到三種基因型:AA、AT、TT，在780頭牛中，AA基因型個(gè)體占84.44％，AT型占14.75％，TT型占0.81％，A基因頻率為91.82％，C基因頻率為8。18％。產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率及總?cè)橹涂偟鞍走@幾項(xiàng)項(xiàng)指標(biāo)中三種基因型之間均不存在顯著差異(P＞0.05)。
　　在POU1F1和PRL對(duì)產(chǎn)奶性狀的影響上也未觀察到