固始雞胚期視網(wǎng)膜發(fā)育及Notch1在視網(wǎng)膜發(fā)育中的表達變化規(guī)律研究.pdf

1、雞是研究鳥類動物發(fā)育常用的模式動物。視網(wǎng)膜由胚胎時期間腦外壁向外突起形成,屬于腦外中樞系統(tǒng),常作為研究中樞神經(jīng)發(fā)育和再生的模式器官。脊椎動物視網(wǎng)膜基本組織模式相同:兩個突觸層(外網(wǎng)層和內網(wǎng)層)插在三細胞核層之間(外核層、內核層和神經(jīng)節(jié)細胞層)。視網(wǎng)膜的形態(tài)發(fā)育過程包括神經(jīng)祖代細胞分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質細胞過程,以及神經(jīng)元和神經(jīng)膠質細胞按照一定的空間結構構建視網(wǎng)膜過程。Notch-Delta信號途徑是一條在胚胎發(fā)育中起調控作用的保守的途徑

2、。Notch-Delta信號系統(tǒng)的最主要功能就是參與胚胎的分化發(fā)育,Notch1在神經(jīng)視網(wǎng)膜細胞發(fā)育和分化過程中表達。
　　 本實驗采用常規(guī)組織學HE染色技術、免疫組織化學技術和分子半定量技術對固始雞胚期視網(wǎng)膜的發(fā)育進行研究,研究結果顯示:同始雞視網(wǎng)膜是典型的脊椎動物視網(wǎng)膜,可分為色素視網(wǎng)膜和神經(jīng)視網(wǎng)膜,神經(jīng)視網(wǎng)膜又分為7層:神經(jīng)纖維層、節(jié)細胞層、內網(wǎng)層、內核層、外網(wǎng)層、外核層和視錐視桿層；神經(jīng)視網(wǎng)膜在胚期發(fā)育過程中的變化趨勢是

3、:神經(jīng)視網(wǎng)膜厚度從E4至E20呈現(xiàn)波浪形變化趨勢,E4至E8逐漸增厚,E8最厚,從E8開始厚度逐漸變薄,E10與E11厚度相差較大,E14厚度最薄,到E19出現(xiàn)第二個高峰,E11到E20神經(jīng)視網(wǎng)膜厚度相差不大。節(jié)細胞層、內網(wǎng)層、內核層、外網(wǎng)層、外核層于E8時形成,三核層總的變化趨勢是從E8開始厚度逐漸下降,E10和E11相差較大,從E12到出殼當天,厚度總體變化相對穩(wěn)定；三核層的密度總的趨勢變化相同,密度相比內核層最高,其次是外核層,節(jié)

4、細胞層密度最低。免疫組化S-P法染色結果顯示:NSE最早在E12的節(jié)細胞層出現(xiàn),內網(wǎng)層和外網(wǎng)層有亞層形成,Vimentin從E3開始整個胚期都存在,且從E10開始,外網(wǎng)層出現(xiàn)一條陽性條帶形成因為有待進一步研究。半定量研究表明在眼部E3和E18表達量相對較低,推斷E18可能作為理想的時間點研究同始雞視網(wǎng)膜再生。研究還發(fā)現(xiàn)腦部在出殼前兩天Notch1表達量較低與E3相對接近,說明腦部細胞處于祖細胞狀態(tài)或干細胞較多,增殖旺盛,Notch1在腦