白樺不同花期雌花發(fā)育相關(guān)基因的篩選及表達(dá)研究.pdf

1、通過解剖觀察及生物制片技術(shù)確定白樺雌花發(fā)育的各個時期,以白樺雌花序為試驗材料,構(gòu)建了白樺花期的正反向消減文庫。從消減文庫中篩選特異基因并進(jìn)行初步的生物信息學(xué)分析。同時在兩個文庫中選出4個特異基因,通過做實時定量PCR檢測這4個基因在不同時期的雌花序,雄花序和葉中的表達(dá)情況,并進(jìn)行基因功能的初步分析。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.確定了白樺雌花序在不同時期的發(fā)育情況,根據(jù)胚胎學(xué)發(fā)育特征,確定4月30日至5月11日為受粉、胚珠珠心、

2、珠被分化及大孢子發(fā)生時期,確定5月12日至25日為雌配子體形成和受精時期,以這兩段時期雌花序的cDNA互為tester和driver構(gòu)建消減文庫BHHQ和BHHZ。
　　 2.在BHHQ消減文庫中篩選到480個特異基因,文庫的冗余度為30.64％,在反向的BHHZ消減文庫中篩選到503個特異基因,文庫冗余度為29.55％。與數(shù)據(jù)庫中已經(jīng)登錄的基因進(jìn)行blastn和blastx比對,分析表明BHHQ和BHHZ庫中分別有357個特異

3、基因(74.38％)和431個特異基因(85.69％)與已知數(shù)據(jù)庫中的核酸或蛋白序列具有同源性(Blastn E-Value＜e-10,Blastx E-Value＜e-5),其余的分別為103個和57個特異基因與己知序列無同源性或同源性較低,可以視作新基因。在BHHQ中篩選到與花發(fā)育相關(guān)的序列中包括WD-重復(fù)蛋白、核苷二磷酸激酶、組蛋白H4、質(zhì)膜H+-ATPase等基因;在BHHZ中篩選到與花發(fā)育相關(guān)的序列包括開花位點T、鋅指蛋白、抗