影響毛兔毛纖維生長發(fā)育相關(guān)基因的篩選及表達趨勢研究.pdf

1、兔毛質(zhì)地蓬松輕盈，保暖性好，是一種優(yōu)質(zhì)的紡織材料，有著重要的經(jīng)濟價值。目前，有很多學者在研究影響動物毛質(zhì)性狀的候選基因，但是主要研究集中于人和羊，而在家兔中的研究很少，這大大制約了毛兔育種的進展。
　　新西蘭白兔為肉用型家兔，其被毛為標準毛型，被毛密度較稀，毛纖維直徑較粗且粗毛含量高;皖系長毛兔為毛用型家兔，其被毛為長毛型，被毛密度高，毛纖維直徑較細。因此本研究以被毛長度和被毛密度差異較大的新西蘭白兔和皖系長毛兔為試驗材料，采用基

2、因芯片技術(shù)和實時熒光定量PCR方法研究與家兔毛纖維生長發(fā)育相關(guān)基因。本研究主要內(nèi)容包括:1.利用家兔全基因組表達譜芯片篩選與毛纖維生長發(fā)育相關(guān)的基因，并且采用實時熒光定量PCR方法對芯片結(jié)果進行初步驗證。2.采用實時熒光定量PCR技術(shù)研究差異表達基因(Wnt10b、SFRP2、Shh基因)在皖系長毛兔0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22周齡公母兔不同部位的表達規(guī)律。3.采用實時熒光定量PCR技術(shù)研究差異表達基因(

3、Wnt10b、SFRP2、Shh基因)在新西蘭白兔0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22周齡公母兔不同部位的表達規(guī)律。4.利用PCR-SSCP技術(shù)，對皖系長毛兔群體共240個個體的Wnt10b基因外顯子3多態(tài)性進行研究，并將其與皖系長毛兔體重和毛重進行關(guān)聯(lián)性分析。本研究的主要結(jié)果如下:
　　1.利用Aglient家兔全基因芯片表達譜芯片共篩選出1067個在皖系長毛兔和新西蘭白兔中差異表達的基因，其中包括714

4、個已知功能基因，284個上調(diào)基因，430個下調(diào)基因。其中Wnt10b、Shh、Notch1、SH3GL2、SFPR2、DKK4基因可能參與家兔毛纖維的生長發(fā)育。
　　2.Wnt10b、Shh、SFRP2基因在皖系長毛兔和新西蘭白兔中不同周齡、不同部位、不同性別中的表達趨勢雖然不完全一致，但是在0～4周齡，Wnt10b、Shh基因均表現(xiàn)為上調(diào)作用，SFRP2基因表現(xiàn)為下調(diào)作用。
　　3.Wnt10b基因在皖系長毛兔和新西蘭白兔

5、中的變化規(guī)律基本一致，0周齡時Wnt10b基因在皖系長毛兔中的表達量低于新西蘭白兔，16周齡時，在皖系長毛兔中的表達量低于新西蘭兔稍低，但是差異不顯著，其它周齡中，均顯示W(wǎng)nt10b基因在皖系長毛兔中的表達量高于新西蘭白兔。
　　4.SFRP2基因的表達量在不同品種的同一周齡中存在一定的差異，0、4、6、10、12周齡時，SFRP2基因在皖系長毛兔中的表達量低于新西蘭白白兔;2、8、14～22周齡時，SFRP2基因在皖系長毛兔的表

6、達量高于新西蘭白兔。
　　5.Shh基因在兩個兔品種中的表達變化趨勢基本一致。除16周齡時，Shh基因在新西蘭白兔中的表達量顯著高于皖系長毛兔(P＜0.01)，其余周齡中，Shh基因在皖系長毛兔中的表達量均高于新西蘭白兔。
　　6.皖系長毛兔群體中AA型個體數(shù)為179個，基因型頻率為0.746，AB型個體數(shù)為52個，基因型頻率為0.217，BB型個體數(shù)為9個，基因型頻率為0.038。等位基因A的頻率為0.854，等位基因B的