能量限制對(duì)肉仔雞脾臟和法氏囊基因表達(dá)效應(yīng)的研究.pdf

1、為了研究30％能量限制對(duì)肉仔雞脾臟與法氏囊差異表達(dá)基因的影響，試驗(yàn)采集48日齡健康雌性AA肉仔雞脾臟與法氏囊組織，能量限制組和自由采食組各20個(gè)樣本，以單個(gè)個(gè)體為重復(fù)單位，采用GenefishingTMDEGPremix試劑盒進(jìn)行脾臟與法氏囊差異表達(dá)基因的篩選，使用半定量RT-PCR進(jìn)行差異表達(dá)基因的鑒定。試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 (1)通過GenefishingTMRT-PCR差異表達(dá)試驗(yàn)在脾臟組織中發(fā)現(xiàn)了33個(gè)差異表達(dá)條帶，其中

2、差異表達(dá)片段呈上凋趨勢(shì)的為16條，呈下調(diào)趨勢(shì)的為17條，同時(shí)出現(xiàn)兩條特異性表達(dá)條帶，分別為P4-2和P12-4，其中P4-2特異性表達(dá)條帶在自由采食組特異性表達(dá)，P12-4特異性表達(dá)條帶在能量限制組呈現(xiàn)特異性表達(dá)。33條差異表達(dá)條帶中，成功回收、克隆、測(cè)序了21個(gè)差異表達(dá)EST；在法氏囊組織中發(fā)現(xiàn)了40個(gè)差異表達(dá)條帶，差異表達(dá)片段中表達(dá)呈上調(diào)趨勢(shì)的為27條，表達(dá)呈下調(diào)趨勢(shì)的為13條，能量限制組出現(xiàn)1條特異性表達(dá)條帶命名為F8-2。成功回

3、收，克隆和測(cè)序的片段為17個(gè)。
　　 (2)通過半定量RT-PCR的驗(yàn)證表明：脾臟組織共計(jì)13個(gè)差異表達(dá)EST，9個(gè)呈明顯差異，4個(gè)無差異顯示；法氏囊組織共計(jì)11個(gè)差異表達(dá)EST，7個(gè)呈明顯差異，4個(gè)無差異顯示。
　　 (3)通過生物信息學(xué)分析表明：脾臟差異表達(dá)EST中有4個(gè)能夠找到高度同源的已知基因，4個(gè)有同源推測(cè)基因，另外13個(gè)是未知功能基因。法氏囊脾臟差異表達(dá)EST中有4個(gè)能夠找到高度同源的已知基因，2個(gè)有同源推測(cè)