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1、浙江大學碩士學位論文家蠶后部絲腺蛋白質(zhì)組研究姓名:吳衛(wèi)成申請學位級別:碩士專業(yè):特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)指導教師:鐘伯雄孟智啟20050501哮:重后部絲膩j自質(zhì)姐茸究中文摘要家蠶是重要的經(jīng)濟昆蟲,也是模式實驗昆蟲,鑄就了絢麗的古代文明,從古到今在社會經(jīng)濟文化生活中占有重要的地位。家蠶絲素蛋白基因在時空上受到精密的調(diào)控,僅高效專一地在后部絲腺中表達,同時在家蠶幼蟲期,絲素基因限于食桑期表達,而在眠中處于關(guān)閉狀態(tài)。家蠶絲素基因的表達決定了后部絲腺
2、細胞分泌特異性的功能蛋白質(zhì)。在后基因時代,功能基因組學成為研究的重點,蛋白質(zhì)組是研究基因功能的重要方法,開展家蠶后部絲腺蛋白質(zhì)組研究,一方面能高效利用家蠶作為生物反應器高效地生產(chǎn)蠶絲和其他有價值的蛋白質(zhì),另一方面也能為細胞靜息和增殖的周期性轉(zhuǎn)換、細胞的分化和凋亡及其調(diào)控機理的闡明提供有力的佐證。本研究通過對家蠶后部絲腺細胞蛋白質(zhì)進行雙向電泳分離和圖像分析,從整體水平研究了家蠶后部絲腺細胞蛋白的構(gòu)成,從分子水平揭示了后部絲腺細胞蛋白在五齡
3、期的整體變化。本研究通過對家蠶4眠期和5齡期后部絲腺細胞的蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的比較分析,發(fā)現(xiàn)在家蠶4眠期后部絲腺細胞的蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜中,共檢測到蛋白質(zhì)斑點425個。對5齡期后部絲腺細胞不同發(fā)育時期蛋白質(zhì)圖譜比較分析得知,隨著生長發(fā)育的進程,不斷地出現(xiàn)一些特異的蛋白斑點;在4眠期存在的蛋白斑點,在5齡期基本不消失;5齡期新出現(xiàn)的蛋白斑點也基本保存穩(wěn)定。這些現(xiàn)象說明不同的發(fā)育時期,后部絲腺細胞的蛋白質(zhì)組成是不一致的。這些特異蛋白斑點可能
4、與后部絲腺細胞的生理生化反應相對應。推測5齡前、中期(第l、5天)新增加的蛋白斑點可能與絲素蛋白的合成、分泌有關(guān),而5齡后期(第9天)新增加的蛋白斑點可能與絲腺組織的形態(tài)變化、細胞的分解凋亡有關(guān)。本研究通過對E8、絲膠繭、四海、301t手1J蘭lO等五個家蠶品種五齡期第一天和第四天后部絲腺細胞的蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的比較分析,發(fā)現(xiàn)各個品種五齡第一天與第四天后部絲腺細胞的蛋白質(zhì)組成均存在差異,差異隨品種的不同而不同。E8第四天比第一天多出2
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