淫羊藿多糖對豬精液冷凍保存的影響.pdf

1、豬冷凍精液有助于原種豬場的跨地區(qū)種質(zhì)交流和遺傳保護;冷凍精液可增加豬場輸精的時間彈性，并有助于疫病防控。目前，豬精液冷凍方法或程序仍主要應用在需要進行品系轉(zhuǎn)移或出口的情況，尚未廣泛應用于豬的標準化生產(chǎn)中。豬冷凍精液應用的局限性主要受到冷凍程序成熟度的影響，現(xiàn)有的技術(shù)依然不夠完善，效率偏低，窩仔數(shù)下降。近年來，在開發(fā)新型低毒冷凍保護劑（如DMF、DMA、MF等酰胺類物質(zhì)）及嘗試在稀釋液中添加保護性物質(zhì)（海藻糖、紅景天多糖等糖類物質(zhì);褪黑素

2、、谷胱甘肽、維生素E和超氧化物歧化酶等抗氧化物質(zhì)）方面的研究報道日益增多，改善豬精液冷凍后的精子質(zhì)量仍是一項艱巨的任務;探索改善豬凍精質(zhì)量的新方法具有重要的研究意義和應用價值。本研究在對公豬精液品質(zhì)進行調(diào)查的基礎(chǔ)上，嘗試添加中藥成分淫羊藿多糖以改進冷凍稀釋液和解凍液，比較其在提高凍后豬精液質(zhì)量上的效果，以期為進一步研究淫羊藿多糖對豬精液冷凍的作用、機理及應用奠定基礎(chǔ)。本試驗的主要研究內(nèi)容如下。
　　1.公豬新鮮精液品質(zhì)調(diào)查及其與凍

3、后質(zhì)量的關(guān)系
　　長白公豬射精量在250mL以上，活力總體較好，精液品質(zhì)1-6月份最佳，7-8月份最差。大白公豬射精量為50-200mL，11-12月份精液質(zhì)量相對穩(wěn)定，4-10月份射精量變化幅度較大。杜洛克公豬射精量在100-400mL之間，變動范圍150-300mL，精子活力7-9月份最差，10月至次年4月精子活力較好并較穩(wěn)定。為了減少運輸過程對精液質(zhì)量的影響，采集精液后用等體積等溫ZO-PVA液稀釋，用玻璃瓶盛裝并置于保溫瓶

4、中運輸更有利于精液質(zhì)量的保持。對精液樣品質(zhì)量及其凍后活力的分析表明，鮮精活力與冷凍解凍后精子活力呈極顯著相關(guān)(r=0.5623，P＜0.01);鮮精密度與凍后精子活力相關(guān)性也顯著(r=0.4316，P＜0.05)，凍前精液質(zhì)量與凍后精子活力顯著相關(guān)。
　　2.豬精液的細管冷凍保存
　　對冷凍解凍過程中影響豬凍精質(zhì)量的各因素的研究結(jié)果表明，豬精液用等溫等體積ZO-PVA液稀釋后在室溫、17℃或37℃下靜置，對凍后效果無顯著影響

5、。當精子凍存密度達2×109/mL時，凍精解凍后活力最低;以1×109/mL和0.5×109/mL的密度冷凍豬精液，凍后活力差異不顯著。1％甘油+2％DMF組合和1.5％甘油+1.5％DMF組合與3％甘油作為冷凍保護劑的凍后效果差異不顯著，均可嘗試用于豬精液冷凍保存，但仍需進一步的條件優(yōu)化。37℃30s水浴解凍細管凍精后，分別孵育在37℃、30℃和室溫的解凍液中，以及直接將細管置于室溫下處理，凍后精子活力差異不顯著。于2mL解凍液中每次

6、解凍1支細管與解凍3支細管的效果無差異，但兩者均較每次解凍6支細管的效果要好，三組解凍方式的凍后質(zhì)膜完整性差異不顯著。
　　3.淫羊藿多糖對豬精子冷凍保存的保護作用
　　在冷凍稀釋液中添加4mg/mL淫羊藿多糖可以得到較好的凍后活力、質(zhì)膜完整率和頂體完整率。在解凍液中添加2mg/mL淫羊藿多糖得到的凍后精子活力可達0.54，質(zhì)膜完整率62.7％，頂體完整率53.0％。解凍后的不同保存溫度對精子存活時間也有明顯影響，室溫環(huán)境似